免疫组化在肺活检小细胞肺癌与非小细胞肺癌中的应用.pdf

57中国现代药物应用2024年3月第18卷第5期Chin J Mod Drug Appl,Mar 2024,Vol.18,No.5免疫组化在肺活检小细胞肺癌与非小细胞肺癌中的 应用张伟基【摘要】目的以病理学诊断为标准,分析免疫组化法在鉴别肺活检小细胞肺癌与非小细胞肺癌过程中多种分子标记物的表达来确定肺癌类型。方法分析 13 例小细胞肺癌和 47 例非小细胞肺癌患者的肺穿刺活检标本、纤维支气管镜活检标本和病理资料,采用免疫组化法检测病理样本组织中 CK、CK7、Napsin A、P40、P63、CgA、Syn、CD56、TTF-1、Ki-67 等多种分子标记物表达水平。比较非小细胞肺癌与小细胞肺癌患者的肺癌分子标记物阳性表达率,分析肺癌分子标记物在小细胞肺癌(CgA、Syn、CD56、Ki-67)及非小细胞肺癌(P40、P63、Napsin A)中的诊断效能。结果小细胞肺癌患者的CgA、Syn、CD56、Ki-67、TTF-1 阳性表达率分别为 92.3%、92.3%、100.0%、92.3%、92.3%,均高于非小细胞肺癌患者的 4.2%、2.1%、4.2%、6.4%、34.0%,P40、P63、Napsin A 阳性表达率分别为 0、0、0,均低于非小细胞肺癌患者的 59.6%、55.3%、25.5%,有显著差异(P0.05)。非小细胞肺癌与小细胞肺癌患者的 CK 阳性表达率均为 100.0%。CgA、Syn、CD56、Ki-67 诊断小细胞肺癌的敏感性分别为 0.923、0.923、1.000、0.923,特异性分别为 0.957、0.979、0.957、0.936,准确率分别为 0.950、0.967、0.967、0.933。P63、P40 和Napsin A 在非小细胞肺癌中呈现高阳性率,P40、P63 和 Napsin A 诊断非小细胞肺癌的敏感性分别为0.596、0.553、0.255,特异性分别为 1.000、1.000、1.000,准确率分别为 0.683、0.650、0.417。结论病 理学诊断结合免疫组化检测 P63、P40 和 Napsin A 的表达水平在非小细胞肺癌诊断中具有较高的可靠性；而病理学诊断结合免疫组化检测 CgA、Syn、CD56 和 Ki-67 的表达水平在小细胞肺癌诊断中具有较高的可靠性,免疫组化检测可为小细胞肺癌和非小细胞肺癌的病理学诊断提供参考依据,值得临床推广 应用。【关键词】小细胞肺癌；非小细胞肺癌；免疫组化；肺活检DOI：10.14164/11-5581/r.2024.05.014Application of immunohistochemistry in lung biopsy of small cell lung cancer and non-small cell lung cancer ZHANG Wei-ji.Department of Pathology,Jingdezhen First Peoples Hospital,Jingdezhen 333000,China【Abstract】Objective Based on the pathological diagnosis,the expression of multiple molecular markers by immunohistochemistry in differentiating small cell lung cancer from non-small cell lung cancer on lung biopsy.Methods Lung puncture biopsy specimens,fiberoptic bronchoscopy biopsy specimens and pathological data of 13 small cell lung cancer and 47 non-small cell lung cancer patients were analyzed,and the expression levels of multiple molecular markers such as CK,CK7,Napsin A,P40,P63,CgA,Syn,CD56,TTF-1,and Ki-67 were detected in tissues of pathological specimens by immunohistochemistry.The positive expression rates of lung cancer molecular markers were compared between patients with non-small cell lung cancer and small cell lung cancer,and the diagnostic efficacy of lung cancer molecular markers in small cell lung cancer(CgA,Syn,CD56,Ki-67)and non-small cell lung cancer(P40,P63,Napsin A)was analyzed.Results The positive expression rates of CgA,Syn,CD56,Ki-67 and TTF-1 in small cell lung cancer patients were 92.3%,92.3%,100.0%,92.3%and 92.3%,which were higher than 4.2%,2.1%,4.2%,6.4%and 34.0%in non-small cell lung cancer patients;the positive expression rates of P40,P63 and Napsin A in small cell lung cancer patients were 0,0 and 0,which were lower than 59.6%,55.3%and 25.5%in non-small cell lung cancer patients;there were significant differences(P0.05).The CK positive expression rate of non-small cell lung cancer patients and small cell lung cancer patients was both 100.0%.The sensitivity of CgA,基金项目：景德镇市科技计划项目(项目编号：20202SFZC033)作者单位：333000景德镇市第一人民医院病理科临床检验58中国现代药物应用2024年3月第18卷第5期Chin J Mod Drug Appl,Mar 2024,Vol.18,No.5Syn,CD56 and Ki-67 in diagnosing small cell lung cancer was 0.923,0.923,1.000,0.923,the specificity was 0.957,0.979,0.957,0.936,and the accuracy was 0.950,0.967,0.967,0.933.P63,P40 and Napsin A showed high positivity in non-small cell lung cancer.The sensitivity of P40,P63 and Napsin A in the diagnosis of non-small cell lung cancer was 0.596,0.553 and 0.255,and the specificity was 1.000,1.000 and 1.000,and the accuracy was 0.683,0.650 and 0.417.Conclusion Pathological diagnosis combined with immunohistochemistry to detect the expression levels of P63,P40 and Napsin A has high reliability in the diagnosis of non-small cell lung cancer;while pathological diagnosis combined with immunohistochemistry to detect the expression levels of CgA,Syn,CD56 and Ki-67 has high reliability in the diagnosis of small cell lung cancer.Immunohistochemical detection can provide a reference basis for the pathological diagnosis of both small cell lung cancer and non-small cell lung cancer,and is worthy of clinical promotion and application.【Key words】Small cell lung cancer;Non-small cell lung cancer;Immunohistochemistry;Lung biopsy肺癌是肺部支气管黏膜或腺体的恶性肿瘤,其早期阶段无明显症状,一般为咳嗽、胸部胀痛、低热、痰血等。中晚期阶段会出现面颈部水肿、声音嘶哑和气促等明显的临床症状。因肺癌发病隐匿、起病迅速、预后极差等特点,导致其发病率和死亡率逐年递增1-4。据统计,全球肺癌新发病人数占癌症总发病人数的 11.6%,死亡率为 18.4%,而我国肺癌新发病人数占癌症总发病人数的 17.9%,死亡率为 23.8%,其中男性发病率和死亡率远高于女性,严重威胁患者的生命健康5。大量资料表明,长期大量吸烟是导致肺癌发生的最主要病因之一,但具体的发病原因尚不明确。目前,针对肺癌的临床诊断方式主要有影像学检查、经皮肺穿刺活检、经纤维支气管镜肺组织活检、多种分子标记物检测等。肺癌的早期诊断对临床治疗效果及预后具有重要的参考意义6。早发现、早诊断、早治疗是提高肺癌患者生存率的关键,肺癌中绝大多数是非小细胞肺癌,对于小细胞肺癌和非小细胞肺癌的鉴别,肺癌分子标记物是诊断肺癌的主要依据,如CK、CK7、Napsin A、P40、P63、CgA、Syn、CD56、TTF-1、Ki-67 等7-9。因此。本研究通过选取 2020 年 7 月 2023 年 3 月在本院诊断的 13 例小细胞肺癌和 47 例非小细胞肺癌患者为研究对象,分析肺癌分子标记物在患者病理诊断中的重要作用,旨在为肺癌患者的临床治疗提供重要参考依据,提高患者的整体生存率及预后效果。现报告如下。1资料与方法1.1一般资料选取 2020 年 7 月 2023 年 3 月在本院诊断的 13 例小细胞肺癌和 47 例非小细胞肺癌患者为研究对象,其中男性患者 49 例,女性患者 11 例；年龄 5087 岁,平均年龄(64.682.61)岁；非小细胞肺癌类型包括鳞状细胞癌(低分化鳞状细胞癌、中分化鳞状细胞癌)、腺癌(低分化腺癌、中分化腺癌)、大细胞癌。纳入标准：意识清晰,无精神疾病史或智力障碍；符合肺癌的临床筛查标准。排除标准：不愿配合研究调查的患者；术前已经接受过手术治疗或放射治疗的患者。1.2方法所有肺癌患者进行肺癌类型筛查,即小细胞肺癌和非小细胞肺癌两种类型,临床上,相对成熟的肺癌病灶主要有腺癌、鳞癌和小细胞癌等,通常情况下利用光学电子显微镜观察皮肺穿刺活检、经纤维支气管镜肺组织活检样本可进行以上类型癌细胞的观察,但无法准确有效的进行诊断,需进一步检测明确诊断结果。免疫组化：采用中性福尔马林溶液(10%)固定标本,然后进行石蜡包埋切片,切片厚度为 4 m,包埋切片完成后行苏木精-伊红染色(HE 染色),并于光镜下观察和记录结果。免疫组化采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法,抗体选用 CK、CK7、Napsin A、P40、P63、CgA、Syn、CD56、TTF-1、Ki-67,所有一抗均为即用型,设定阳性对照组。免疫组化结果显示棕黄色为肿瘤细胞,若阳性细胞超过比例的 10%则为阳性,肿瘤细胞未染色为阴性。1.3观察指标比较非小细胞肺癌与小细胞肺癌患者的肺癌分子标记物(CK、CK7、Napsin A、P40、P63、CgA、Syn、CD56、TTF-1、Ki-67)阳性表达率,分析肺癌分子标记物在小细胞肺癌(CgA、Syn、CD56、Ki-67)及非小细胞肺癌(P40、P63、Napsin A)中的诊断效能,包括特异性、敏感性及准确率。1.4统计学方法采用 SPSS22.0 分析软件对数据进行分析。计数资料以率(%)表示,采用2检验。以P0.05 表示差异具有统计学意义。2结果2.1非小细胞肺癌与小细胞肺癌患者的肺癌分子标记物阳性表达率比较小细胞肺癌患者的 CgA、Syn、CD56、Ki-67、TTF-1 阳性表达率均高于非小细胞肺癌患者,P40、P63、Napsin A 阳性表达率均低于非小细胞肺癌患者,有显著差异(P0.05)。非小细胞肺癌与小细胞肺癌患者的 CK 阳性表达率均为 100.0%。见表 1。2.2肺癌分子标记物在小细胞肺癌中的诊断效能 CgA、Syn、CD56、Ki-67 诊断小细胞肺癌的敏感性分59中国现代药物应用2024年3月第18卷第5期Chin J Mod Drug Appl,Mar 2024,Vol.18,No.5表 1非小细胞肺癌与小细胞肺癌患者的肺癌分子标记阳性物表率比较n(%)标记物阳性表达阴性表达2P小细胞肺癌(n=13)非小细胞肺癌(n=47)小细胞肺癌(n=13)非小细胞肺癌(n=47)CgA12(92.3)a2(4.2)1(7.7)45(95.8)44.1360.000Syn12(92.3)a1(2.1)1(7.7)46(97.9)48.7950.000CD5613(100.0)a2(4.2)045(95.8)49.7870.001CK13(100.0)47(100.0)00-CK77(53.8)20(42.6)6(46.2)27(57.4)0.5250.469P400a28(59.6)13(100.0)19(40.4)14.5210.000P630a26(55.3)13(100.0)21(45.7)12.6910.000Napsin A0a12(25.5)13(100.0)35(74.5)4.1490.042Ki-6712(92.3)a3(6.4)1(7.7)44(93.6)40.0980.001TTF-112(92.3)a16(34.0)1(7.7)31(66.0)13.8900.000注：与非小细胞肺癌比较,aP0.05表 2CgA、Syn、CD56、Ki-67 在小细胞肺癌中的诊断效能标记物敏感性特异性准确率95%CICgA0.923(12/13)0.957(45/47)0.950(57/60)0.837,0.955Syn0.923(12/13)0.979(46/47)0.967(58/60)0.922,1.000CD561.000(13/13)0.957(45/47)0.967(58/60)0.852,0.986Ki-670.923(12/13)0.936(44/47)0.933(56/60)0.876,0.998表 3P40、P63、Napsin A 在非小细胞肺癌中的诊断效能标记物敏感性特异性准确率95%CIP400.596(28/47)1.000(13/13)0.683(41/60)0.828,0.935P630.553(26/47)1.000(13/13)0.650(39/60)0.914,1.000Napsin A0.255(12/47)1.000(13/13)0.417(25/60)0.837,0.951别为 0.923、0.923、1.000、0.923,特异性分别为 0.957、0.979、0.957、0.936,准确率分别为 0.950、0.967、0.967、0.933。见表 2。2.3肺癌分子标记物在非小细胞肺癌中的诊断效能 P63、P40 和 Napsin A 在非小细胞肺癌中呈现高阳性率,P40、P63 和 Napsin A 诊断非小细胞肺癌的敏感性分别为 0.596、0.553、0.255,特异性分别为 1.000、1.000、1.000,准确率分别为 0.683、0.650、0.417。见表 3。3讨论肺癌为临床上常见的恶性肿瘤疾病类型,早期肺癌的诊断较为困难,因其发病隐匿,临床症状不明显,导致大多数患者早期的重视程度较低,而进展到晚期后,往往预后较差,导致肺癌的致死率大幅上升。随着肺癌的疾病进展,患者的病情及治疗信心将会进一步恶化,最终威胁患者的生命健康10。肿瘤分子标记物是临床及科研机构常用的疾病诊断与治疗的研究方向,肿瘤分子标记物是恶性肿瘤发生发展过程中肿瘤细胞相关基因的差异表达产生的基因或蛋白,分子标记物在肿瘤的筛查、辅助诊断、疗效监测、预后判断等临床应用方面都具有重要的价值,检测这些基因或蛋白在肿瘤中差异表达有助于疾病的筛查及诊断。作为肿瘤分子标记物必须具备特异性好、敏感性高及检测便捷等特点11。我国医疗机构对肺癌的检查手段较为单一,同时医师取材中存在许多不规范的操作方式,导致肺癌诊断中出现难以鉴别的情形,影响患者的后期治疗与预后,增加患者的医疗成本与时间。而免疫组化在肺癌类型的鉴别中具有重要的作用,但免疫组化检测小细胞肺癌与非小细胞肺癌的分子标记物诊断组合尚未明确,仍需进一步探索。肺癌相关的分子标记物主 要 有 CK、CK7、Napsin A、P40、P63、CgA、Syn、CD56、TTF-1、Ki-67,也是肺癌中应用最广的分子标记物。研究表明,分子标记物早期检测对疾病的诊断和治疗具有重要的应用价值12-14。因此,本研究通过免疫组织化学检测肺癌患者中的分子标记物表达水平、指标灵敏性及特异性,旨在分析其在非小细胞肺癌和小细胞肺癌诊断中的应用效果及价值。王斌等15通过支气管动脉灌注化疗联合栓塞术治疗肺癌患者结果发现,经治疗后,肺癌患者临床治疗有效率显著升高。白冰等16通过免疫组织化学检测肺癌患者体内分子标记物表达量同样发现,癌细胞特异性和敏感性均在 80%以上,且临床总有效率高达70%。本研究结果显示,Napsin A、P40、P63、CgA、60中国现代药物应用2024年3月第18卷第5期Chin J Mod Drug Appl,Mar 2024,Vol.18,No.5Syn、CD56、TTF-1、Ki-67 在非小细胞肺癌和小细胞肺癌患者中的表达水平具有差异性,P63、P40 和Napsin A 在非小细胞肺癌中呈现高阳性率,且指标的敏感性和特异性较高。CgA、Syn、CD56、Ki-67 在诊断小细胞肺癌中的敏感性与特异性较高。结果提示,非小细胞肺癌的免疫组织化学检查指标为 P63、P40和 Napsin A,小细胞肺癌的免疫组织化学检查指标为CgA、Syn、CD56、Ki-67,分子标记物的免疫组织化学检测能够为肺癌的临床诊疗提供重要的参考价值。综上所述,肺癌分子标记物的病理诊断对肺癌患者的临床诊疗具有重要的参考意义及价值,可提高肺癌患者的临床治疗效果,缩短临床治疗周期。本研究中的不足之处在于样本量较少,且使用的分子标记物均为传统的肺癌分子标记物,临床工作中可能会有无法鉴别的肺癌类型,因此需进一步增加研究样本量,增加分子标记物检测指标。但就目前而言,本研究结果对医疗机构病理科肺癌的病理诊断仍具有重要的意义。参考文献1 崔国辉,胡海.肺癌分子标志物的研究进展及转化应用.生物医学转化,2020,1(1):79-85.2 王新,墙建军.小细胞肺癌发生和预后相关血清外泌体分子标记物的鉴定和验证.现代医学,2023,51(1):31-37.3 陈娟,梁龙,姚文秀.晚期 NSCLC 患者外周血炎性标记物与EGFR-TKIs 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