老年骨质疏松性椎体骨折患者血清miR-15b和miR-122表达变化及其意义.pdf
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1、山东医药2023 年第 63 卷第 25 期老年骨质疏松性椎体骨折患者血清miR-15b和miR-122表达变化及其意义陈明浩,李永全,马金超天津市泰达医院骨科,天津300457摘要:目的探讨老年骨质疏松性椎体骨折(OVF)患者血清微小RNA-15b(miR-15b)、微小RNA-122(miR-122)表达变化及其意义。方法选择老年OVF患者93例(观察组),同期体检健康的志愿者93例(对照组),采集所有研究对象入组后清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-15b、miR-122表达。采用 Pearson相关分析法分析老年 OVF患者血清 miR-15b表达
2、与血清 miR-122表达的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-15b、miR-122表达对老年OVF的诊断效能。结果除骨密度外,两组性别、年龄、BMI以及合并高血压和吸烟史例数比较差异均无统计学意义(P均0.05)。观察组血清miR-15b相对表达量低于对照组,血清miR-122相对表达量高于对照组(P均0.05)。老年OVF患者血清miR-15b相对表达量与骨密度呈正相关关系(r=0.776,P0.05),血清miR-122相对表达量与骨密度呈负相关关系(r=-0.745,P0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-15b、miR-122表达单独和联合诊断老年OVF的曲
3、线下面积(AUC)分别为0.760、0.810、0.922,血清miR-15b、miR-122表达联合诊断老年OVF的AUC高于二者单独(Z分别为2.217、2.033,P均0.05)。结论老年OVF患者血清miR-15b低表达、血清miR-122高表达,二者表达变化可能共同促进老年OVF的发生、发展;血清miR-15b、miR-122表达对老年OVF均具有一定诊断价值,二者联合时诊断价值更高。关键词:老年骨质疏松性椎体骨折;微小RNA-15b;微小RNA-122doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2023.25.013 中图分类号:R683 文献标志码:A 文章编号:1
4、002-266X(2023)25-0053-03骨质疏松性骨折是在骨质疏松症基础上,由非暴力因素引起的一种脆性骨折。其中,椎体骨折是骨质疏松性骨折中最常见的类型,在中老年人群中的发病率非常高。骨质疏松性椎体骨折(OVF)可导致脊柱稳定性降低,继而引起下肢功能障碍,致残率较高,严重影响老年患者的生活质量1。目前,临床通常使用抑制骨吸收药物和促进骨形成药物来治疗OVF,但疗效一般。因此,提前预测老年 OVF发生具有重要的临床意义。微小 RNA(miRNA)是一类内源性非编码单链小分子RNA,能够在转录后水平调控基因的表达,在细胞发育、分化及内环境稳定等方面发挥重要作用。miR-15b是miR-15
5、/16家族中的一员,能够参与细胞增殖、分化、凋亡等生命活动。近期研究发现,miR-15b能够参与调控骨形成和骨代谢过程,与骨骼疾病有一定相关性2-4。miR-122定位于人染色体18q21.31,是在肝脏生理和病理过程中发挥重要作用的特异性miRNA。有研究报道,miR-122还可参与骨形成和骨分化过程5。但目前miR-15b、miR-122 与老年 OVF 的关系尚不完全清楚。本研究探讨了老年 OVF 患者血清 miR-15b、miR-122表达变化及其意义。现报告如下。1 资料与方法 1.1临床资料选择2019年2月2022年2月天津市泰达医院骨科收治的老年OVF患者93例(观察组)。纳入
6、标准:符合椎体骨折临床表现,并经X线、CT、MRI等影像学检查证实6;经双能X线骨密度仪检测,符合骨质疏松症诊断标准;年龄60岁。排除标准:继发性OVF者;合并其他脊柱疾病者;合并心、肝、肾等重要脏器严重疾病者;近1个月内服用过影响骨代谢药物者。同期选择在天津市泰达医院体检健康的老年志愿者93例(对照组)。本研究经天津市泰达医院伦理委员会批准(批准文号:1900136),所有研究对象或其家属知情同意并签署书面知情同意书。1.2血清 miR-15b、miR-122 表达检测采用实时荧光定量PCR法。观察组入院次日,对照组体检当日,采集清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,-80 冰箱保存。采用TRI
7、zol法提取血清总RNA,经 UPT-100 紫外可见分光光度计鉴定,提取的总RNA纯度和浓度合格。按TaKaRa反转录试剂盒说明,将总 RNA 反转录合成为 cDNA。以 cDNA 为模板,按ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix说明53山东医药2023 年第 63 卷第 25 期进行PCR扩增。引物序列:miR-15b上游引物5-ATGAACTTTCTCTGTCTTGG-3、下游引物 5-TCACCGCCTCGGCTTGCTCACA-3,miR-122 上 游 引 物5-AATACCAAGTCTGCGGCTTAAGC-3、下游引物5-ACCTCCGACCA
8、AAAGATTCCT-3,U6 上游引物5-ATTGGAACGATACAGAGAAGATT-3、下游引物5-GGAACGCTTCACGAATTTG-3。PCR 反应体系共 20 L:cDNA 模板 2 L,2 SYBR Green Master Mix 10 L,上下游引物各0.5 L,ddH2O补足至20 L;反应条件:95 预变性 3 min,95 变性 30 s、60 退火30 s、72 延伸30 s共45个循环。反应结束,绘制熔解曲线,获取循环阈值(CT)数。以U6为内参,采用2-CT法计算目的基因相对表达量。1.3骨密度检测老年 OVF 患者入院次日采用EXA-3000双能X线骨密度
9、仪检测腰椎、全髋关节和股骨颈的骨密度,计算腰椎、全髋关节和股骨颈三个部位骨密度的平均值。1.4统计学方法采用SPSS25.0统计软件。符合正态分布的计量资料以-x s表示,结果比较采用独立样本t检验。计数资料比较采用2检验。相关性分析采用Pearson相关分析法。诊断效能分析采用受试者工作特征(ROC)曲线,曲线下面积(AUC)比较采用Z检验。P0.05),观察组骨密度低于对照组(t=7.755,P0.05)。2.2两组血清 miR-15b、miR-122 表达比较观察组与对照组血清miR-15b相对表达量分别为0.82 0.22、1.03 0.29,血清miR-122相对表达量分别为1.25
10、 0.39、1.02 0.26。观察组血清 miR-15b相对表达量低于对照组,血清miR-122相对表达量高于对照组(t分别为5.380、4.732,P均0.05)。2.3老年OVF患者血清miR-15b、miR-122表达与骨密度的关系Pearson相关分析显示,老年OVF患者血清miR-15b相对表达量与骨密度呈正相关关系(r=0.776,P0.05),血清 miR-122相对表达量与骨密度呈负相关关系(r=-0.745,P0.05)。2.4血清miR-15b、miR-122表达对老年OVF的诊断效能分析结果ROC曲线分析显示,血清miR-15b表达诊断老年OVF的AUC为0.760(9
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