老年护理医院长期住院患者肠道耐碳青霉烯类肠杆菌携带分析.pdf
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1、老年医学与保健 年第 卷第 期 ,老年护理医院长期住院患者肠道耐碳青霉烯类肠杆菌携带分析李奇,薛坚,张泓 上海市儿童医院 上海交通大学医学院附属儿童医院检验科,上海;上海市金山区众仁老年护理医院检验科,上海 基金项目:上海市科技创新行动计划(),上海市金山区卫健委公卫项目()通信作者:张泓,电子信箱:摘要 目的 分析上海市金山区众仁老年护理医院长期住院者耐碳青霉烯肠杆菌()肠道携带情况,为临床防控 提供依据。方法 于 年 月选取上海市金山区众仁老年护理医院 例长期住院者(住院时间)作为研究对象,收集患者的相关病史资料,使用 筛选平板筛选粪便中,使用 进行菌种的鉴定,采用碳青霉烯酶抑制增强实验检
2、测 的耐药表型,用聚合酶链式反应()方法检测 种耐药基因(、和),使用软件 进行数据的统计分析。结果 例患者中,肠道携带者的所占比为 (),以耐碳青霉烯大肠埃希菌、()为主(),其次为耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌()()。株 均产碳青霉烯酶,(,)为主要产酶基因,其次为(,);有(,)和(,)两种亚型,的亚型均为。例肠道 携带者中,例是长期使用留置胃管()的患者,该类型患者最有可能是 的肠道携带者()。结论 老年护理医院长期住院者中,有较高比例的 肠道携带者,肠道携带 的分子特征提示有耐药播散的风险,临床上应对入院者开展肠道 的携带筛查,采取适当的干预措施,降低 的传播风险。关键词 耐碳青霉烯肠杆菌
3、;长期住院;老年患者;肠道携带 ,;,:,:(),(),(,)(),(),()(),()(),(,),(,):(,)(,),(),(),老年医学与保健 年第 卷第 期 ,;耐碳青霉烯肠杆菌(,)是临床上常见的多重耐药菌,在医院环境中可以通过人物间或人际间的直接接触发生播散或转移定植。携带 的患者可能成为医院内 的传播来源,尽早发现 有助于更好地预防和控制,因此 年以来国内外多项指南建议对易感染 的高风险人群开展 定植的主动筛查,并建议将肠道标本作为筛查的优选标本。老年护理医院的绝大部分患者具有住院时间长、高龄、深度的免疫衰老或伴有多种慢性疾病等临床特点,是易感染 的高风险人群。近年来在综合性医
4、院中对易发生 感染患者开展 肠道定植的研究较多,对老年护理医院住院患者肠道 的携带情况研究较少。本课题以主动筛查的方式对老年护理医院长期住院者肠道 的携带情况进行探讨,了解 肠道携带者的比例、临床特征以及 的分子特征,为进一步的控制干预措施提供依据。资料与方法 一般资料 于 年 月依据入选标准随机选取上海市金山区众仁老年护理医院 位 岁及以上长期住院者(住院时间)作为研究对象,收集相关病史资料,其中女性 位,男性 位,平均年龄()岁,平均住院时间为 。入选标准:()年龄 岁,住院时间 个月;()能自主排便;()入组患者采样前无肠道感染症状。所有研究均在医院伦理委员会的批准下进行(伦理批号:)。
5、采集样本类型和频率 首次采样在 年 月 日全部完成,计划采集 次,隔 周采集 次,主要采集纳入患者的粪便样本,对于当日无粪便的患者则采集肛拭子样本。若患者送检样本中检测出,则判断该患者肠道有 携带,不再进行后续采样;若患者 次采集的粪便样本中均未发现,则判断该患者肠道无 携带。仪 器 与 试 剂 全 自 动 细 菌 鉴 定 分 析 仪 为(法国生物梅里埃公司),鉴定卡为配套的 卡;药敏纸片亚胺培南、美罗培南的品牌为;培养基和 显色培养基购自于上海科玛嘉微生物科技有限公司,和 试剂购自于珠海迪尔生物工程有限公司,所有试剂均在有效期内。阴性质控菌株 来源于上海市临床检验中心,阳性质控菌株是经基因测
6、序的 型肺炎克雷伯菌临床株。方法 的筛查()大便标本的采集和运送按照全国临床检验操作规程(第 版)要求进行。()的筛选将大便样本接种于 显色培养基,于 温箱中培养 。依据 显色培养基使用说明书,将疑似 挑出并纯化,培养 后使用接种环挑取少许菌落置入含有 胰大豆脑心浸液的菌株保存管中并混匀,随后放置在 冷冻冰箱种保存。的鉴定与复核菌株的鉴定将冷冻保存的菌液恢复至室温,从中吸取 m 转种于哥伦比亚血琼脂平板,培养 。使用仪器 配套的 卡进行菌种的鉴定。对鉴定为肠杆菌科的细菌,采用 法测定该菌对亚胺培南、美罗培南的耐药性,若对任意一种药物表现为耐药,则认为该菌为。体外药敏试验折点的判断依据美国临床和
7、实验室标准协会(,)年 文件。耐碳青霉类药物表型检测采用碳青霉烯酶抑制增强实验检测 耐碳青霉类药物表型,具体操作见参照文献。产 类碳青霉烯酶:含 的亚胺培南纸片抑菌圈直径与单药纸片相差;产 类碳青霉烯酶:含 的亚胺培南纸片抑菌圈直径与单药纸片相差;同时产 类碳青霉烯酶和 类金属酶:同时含 和 的亚胺培南纸片抑菌圈直径与单药纸片相差;不产 类或 类碳青霉烯酶:含酶抑制剂的亚胺培南纸片抑菌圈直径与单药相差均 。产碳青酶烯酶基因检测 使用 检测 常见的 种产碳氢酶烯酶基因(、和),将分纯后的菌株送至上海派森诺生物科技有限公司进行 实验、凝胶电泳和基因测序,测序结果在 上比对以确定基因型。反应体系为
8、:液 、模板、引物上下游各、双蒸水 ,反应条件设置为 预变性,变性,退火 ,延伸 ,总共循环数为 个(退火温度和引物老年医学与保健 年第 卷第 期 ,序列见下表)。统计分析 采用 软件对实验数据统计分析,计量资料使用()表示,组间比较使用 检验;计数资料采用百分比的形式表示,组间比较使用c检验;对有统计学意义的临床特征使用二分类 回归分析,为差异有统计学意义。结果 肠道携带 的筛检结果 位患者中肠道 携带者的所占比为 ()。第 批次送检的 份粪便样本中,份粪便样本中筛查出;第 批次和第 批次 位无肠道 携带者的粪便样本中均未检测出。在菌群分布上以 为主,其所占比为 ();其次为,所占比 (),
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