光合细菌的培养操作教程.doc
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1、 . 光合细菌的培养操作教程1、配制光合细菌菌液:(1)配制比例:光合细菌培养基、清水、菌种的配制比例为:0.5:80:20。示例1: 0.5公斤(500克)培养基 + 80升水 + 20升菌种(接种),配成100升的光合细菌菌液。示例2(少量培养): 0.05公斤(50克)培养基 + 8升水 + 2升菌种(接种),配成10升的光合细菌菌液。(2)配制方法:下面以配制100升光合细菌菌液为例来说明配制方法: 溶化培养基:取培养基0.5公斤(500克),用少量水溶化(可以用50左右的热水,溶化培养基的速度会快些),搅拌均匀,然后倒入一个容量在100升以上的容器中; 配制培养液:往容器中加水到80
2、升,80升培养液配制完成; 接种:再加入20升菌种,并搅匀, 100升菌液配制完成; 装瓶(袋):将配制好的菌液装入干净的透明容器(瓶、壶、塑料袋等),容器中留5%的空气在里面,密封待用。菌液配制说明及注意事项: a. 以上各成分的数量是以配制100升菌液为例来说明配制方法的,如配制其他数量的光合细菌菌液,各成分数量按比例增减即可;b. 培养用水源的选择:一般含杂菌较低的清洁淡水、海水或加粗食盐的淡水都可以,如井水、河水、自来水、蒸馏水和纯净水等,甚至干净的池塘水也行。从经济、实用的角度考虑,地下水(如井水)含杂菌低,是最理想的培养水源;清洁的地表水也可使用,如河水、池塘水等;含氯量较高的自来
3、水应敞口放置两天或调PH值至偏碱后使用;蒸馏水及纯净水固然很好,但成本太高,可用于提纯菌种;c. 培养用容器的选择:必须为透明容器并清洗干净,透明的容器可让光合细菌最大限度的吸收到充分的光线,少量培养如饮料瓶、食用油壶等,规模培养如透明塑料桶、透明塑料袋等。d. 菌种的接种量:一般接种量为20-50%,即培养液与菌种的比例为4:1(4升培养液加1升菌种)到1:1(1升培养液加1升菌种),接种量最低不能低于20%。接种量越高,光合细菌菌种越容易形成优势菌群而抑制其他杂菌生长,培养速度快,且培养成熟的浓度更高。但产出效率也越低,光合细菌易老化。接种量越低,培养产出效率越高,但如果低于20%的接种量
4、,光合细菌不容易形成优势菌群,培养初期易染杂菌,培养的成功率低。我们推荐的接种量为20%,如果用太阳光培养,推荐的接种量为25-40%。e. 容器不要装满培养液,留5%左右的空气在里面;实践证明, 光合细菌在微厌氧的条件下生长最好,也就是说,要留有一定的空气给它,又要适度的密封,光合细菌长得最好,还便于摇动均匀, 留一点空气在容器内,反而比不留空气长得快。f. 如果有条件,您手上有PH试纸的话,可以测一下配好的菌液的PH值,一般菌液PH值在6.5-7.5之间;2、光照培养:通过以上操作,我们就有了配制好了的光合细菌菌液,现在,我们就要对菌液施以光照,这样,光合细菌有了培养基的营养物质,又获得了
5、光照的能量,满足了光合细菌生长所需要的条件,光合细菌能够得到快速的生长和繁殖。通过光照,菌液中的光合细菌开始生长,生长过程中,红色会越来越深,菌液越来越浑;几天后,菌液长成深红色并呈浑浊状态即为成熟,此时PH值为8.0-9.0。根据您培养的数量,培养方法分为少量培养和规模培养;根据光照光源的不同,可分为灯泡培养和太阳光培养。(1)少量培养:如果您初次接触光合细菌,手上用于培养的菌种数量少,或者平时光合细菌用量较少,您可以采用少量培养的方法。少量培养多使用白炽灯泡作光源,用白炽灯泡培养稳定性高,培养出来的光合细菌质量好,菌液浓度高,颜色鲜艳,可用作规模培养用的菌种。少量培养方法非常简单,在气温高
6、于30时(如夏季或春秋季里较热的时节),只需将菌液瓶围成一个圈,中间吊一个40-100W的白炽灯泡(钨丝灯,可发热的),灯泡与瓶子距离在10-20公分,准备一个温度计监测培养温度,控制培养温度在30-38之间;在气温低于30时(如冬季或春秋季里较冷的时节),我们可以使用纸箱保温培养,或用塑料布将全部菌液和灯泡遮盖起来以保温。使用纸箱培养,用白炽灯泡作光源对菌液进行光照,同时灯泡本身发热,纸箱起保温作用,可提升纸箱内温度。制作培养用纸箱:准备一个纸箱(如电脑纸箱、电视机纸箱等),纸箱顶部开一小半口(方便取放菌液瓶子),纸箱中间悬挂一个40-100瓦的白炽灯(钨丝灯,可发热的),在纸箱侧边钻一个小
7、洞,从小洞中插入一根温度计(方便掌握箱内温度),如右图:箱内控制培养温度在30-38之间,温度太高可以在纸箱上戮孔散热或敞开培养,温度太低可以盖住纸箱上口,或在纸箱外用保温材料(如旧衣服、旧棉被等)加以包裹以提升箱内温度。少量培养说明及注意事项: 灯泡与瓶子距离在10-20公分,太远光照强度弱,太近光照太强; 控制培养温度在30-38(菌液温度在28-35),最高不超过40,最低不低于25 菌液瓶子至少每天摇动2次。 由于热胀冷缩,在培养一天后,可以旋开瓶盖,放气排压,再盖上。 培养好的光合细菌,又可以当菌种用,无限循环培养下去,不会老化或退化。菌种要保存好,放在阴凉干燥有光线的地方,同时要注
8、意:夏天三个月、其他季节六个月要转培养一次,以保证菌种活力。(2)室内规模培养:在地面制作小池子,用来固定将要放在里面的塑料培养袋(也可以用木方来固定),将菌液装入塑料薄膜袋子中(可以使用虾苗袋子),塑料薄膜袋子两头密封好,进行培养,见右图:使用60-100瓦白炽灯,灯与液面距离为20公分左右,每平方米用2-3个,室内设置加热装置,夏天则不需要,主要是冬天需要加热,北方有暖气片,南方可以使用煤炉(注意把煤气用管道排出室外),南方冬天也可以用电热丝,不过比较耗电。这种方法的缺点是无法搅拌。只能静止培养,培养时间稍长一点。(3)太阳光培养:用太阳光作为光源培养,只需把菌液用一个大的不易破损的塑料袋
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