桔小实蝇试验种群饲养技术研究.pdf
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1、天津农业科学TianjinAgricultural Sciences植物保护桔小实蝇试验种群饲养技术研究2023,29(10):79-84尹伊秀娟1,胡永华2,李裕展,杨洁2,詹儒林3,吴正伟4(1.云南农业大学热带作物学院,云南普洱6 6 50 9 9;2.中国热带农业科学院湛江试验站,广东湛江52 40 13;3.中国热带农业科学院三亚研究院,海南三亚57 2 0 2 4;4.广东海洋大学滨海农业学院,广东湛江52 40 8 8)摘要:桔小实蝇(Bactrocera dorsalis Herdel)是重要的检疫性果蔬害虫,采用实验室内饲养技术提供龄期一致的试虫是研究其生物学特性、综合防治,
2、以及抗药性机制的重要前提。为提高桔小实蝇室内饲养效率与规范性,以天然寄主果实与人工饲料饲喂桔小实蝇,观察记录桔小实蝇的孵化、羽化、取食、产卵等行为,摸索出卵、幼虫、蛹、成虫各个虫期的饲养流程及其技术要点。在室内可控条件下,对桔小实蝇的生长发育进行研究并构建种群生命表。结果表明:人工饲料饲养和寄主果实饲养2 种模式下,桔小实蝇的净增殖率Ro分别为2 6 2.2 9、2 7 8.30,平均世代历期T分别为59.37、53.18,内增长率rm分别为0.12、0.13,周限增长率入分别为1.0 2、1.2 1,种群倍增时间DT分别为8.33、9.2 1。因此,寄主果实和人工饲料对桔小实蝇的饲养效果接近
3、,且均有利于桔小实蝇的种群增长。关键词:桔小实蝇;试验种群;技术流程;种群生命表中图分类号:Q969Technical Process for Rearing Experimental Populations of Bactrocera dorsalis HendelYIN Yixiujuan,HU Yonghua,LI Yuzhan,YANG Jie,ZHAN Rulin,WU Zhengwei4(1.Tropical Crops College,Yunnan Agricultural University,Puer,Yunnan 665099,China;2.Zhanjiang Exper
4、imental Station,Chi-nese Academy of Tropical Agricultural Sciences,Zhanjiang,Guangdong 524013,China;3.Sanya Research Institute,Chinese Acade-my of Tropical Agricultural Sciences,Sanya,Hainan 572024,China;4.College of Coastal Agricultural Sciences,Guangdong OceanUniversity,Zhanjiang,Guangdong 524088,
5、China)Abstract:Bactrocera dorsalis is an important quarantine pest in fruits and vegetables.It is an important prerequisite to study the bio-logical characteristics,comprehensive control and resistance mechanism of B.dorsalis by breeding the same age in laboratory.In thisstudy,host fruit and artific
6、ial diet were used to feed B.dorsalis.The hatching,emergence,feeding and laying behaviors were observedand recorded.The equipment,environment and procedure of indoor rearing were standardized,and the feeding process and technicalkey points of egg,larva,pupa and adult were found out.The growth and de
7、velopment of B.dorsalis were studied in laboratory undercontrolled conditions and the population life table was constructed.The results showed that under the two modes of artificial feed andhost fruit feeding,the net growth rate Ro was 262.29 and 278.30,the average generation time T was 59.37 and 53
8、.18,the intrinsicgrowth rate Tm was 0.12 and 0.13,and the weekly growth rate A was 1.02 and 1.21,respectively.The population doubling time DT was8.33 and 9.21 respectively.Therefore,the rearing effects of host fruit and artificial diet are similar to each other,and both of them arebeneficial to the
9、population growth of B.dorsalis.Key words:Bactrocera dorsalis Hendel;experimental population;technical process;population life table桔小实蝇(Bactroceradorsalis Hendel),属双翅目(Diptera),实蝇科(Trypetidae),果实蝇属(Bactrocera)。桔小实蝇广泛分布于华南、西南等9 省区,其寄主范围广,可危害番石榴、芒果、杨桃等百余种水果和蔬菜。其危害方式主要是雌虫产卵于寄主果实内,孵化后的幼虫蛀食果肉造成果实腐烂,未熟先落
10、果,严重影响果实产量。研究发现,桔小实蝇在我国华南地区文献标识码:ADOI编码:10.39 6 9/j.issn.10066500.2023.10.014全年发生4,华东地区还存在越冬现象5,桔小实蝇种群受气温、降雨、食物等因素影响较大间,虫口数不稳定。近年来,随着国内外学者对桔小实蝇在生物学、生理学、病理学,以及遗传学等领域研究的不断深入 7-9 ,实验室需要大量龄期一致的桔小实蝇作为试验材料。因此,探索桔小实蝇实验室种群饲养方法,规范饲养流程成为桔小实蝇各项生物学研究的基础。收稿日期:2 0 2 3-0 2-0 8基金项目:海南省自然科学基金(32 1QN0941)作者简介:尹伊秀娟(2
11、0 0 0 一),女,云南个旧人,在读本科生,主要从事植物病虫害生物防治研究。通讯作者简介:杨洁(19 8 3一),女,河南安阳人,助理研究员,博士,主要从事植物病虫害生物防治研究。80:关于桔小实蝇的饲养早有报道。陈毅超等 10 研究表明,酵母和蔗糖是饲料配方不可或缺的主剂,比例不超过2 5%,氨基酸可分为差异显著的4个数量级,B族维生素和矿物质分为3个数量级,并推断桔小实蝇对氨基酸种类的需求大于含量,B族维生素则刚好相反。袁盛勇等 测定桔小实蝇单雌产卵量和孵化率,筛选出最理想饲料配方(酵母粉2 0 g、大豆蛋白5g、糖6 0 g琼脂6 g、尼白金0.6 g山梨酸0.4g、抗坏血酸3g、鸡蛋
12、2 5g、水50 0 mL)。袁盛勇等 12)通过人工饲喂和建立试验室种群,分别统计2 5、28条件下,桔小实蝇的孵化率与羽化率,结果差异不大,证明在试验室内饲养方法可行。郑传伟 3 自主研发了新型实蝇多虫态饲养箱,与传统养虫箱比,新型实蝇多虫态饲养箱的孵化率、化蛹率、羽化率均差异显著。郑传伟 14在冬季饲养桔小实蝇时,通过补充规律光照、控制温度、调整饲喂的管理方法,保障了冬季试验种群的数量以及冬季试验材料的供给。郑小萍等 15 研究表明,幼虫的取食经历对成虫产卵时选择水果的部位和颜色也有影响。袁瑞玲等 6 利用自行设计的新型实蝇多虫态养虫箱和改进的饲料配方饲养桔小实蝇,与传统养虫箱饲养的桔小
13、实蝇相比,其孵化率、化蛹率和羽化率均较高,各阶段发育历期正常及各指标良好,能保证桔小实蝇全年饲养,并获得发育健康的试验材料,但是都没有形成固定流程和规模化饲养技术,因此本研究试图探索桔小实蝇试验室种群饲养方法,规范饲养流程。根据近年来国内外报道的常用昆虫饲养配方以及桔小实蝇不同虫期饲料及饲养方法 6.14.10,本研究优化了桔小实蝇饲养笼空间结构、产卵引诱器、幼虫饲养装置、幼虫和成虫饲料、饲养环境调控,旨在探索在保证桔小实蝇健康的前提下,使用简单易操作、成本相对低廉、可重复的饲养方法,为其生物学试验提供数量大、发育整齐、生理状况稳定的桔小实蝇,为桔小实蝇生物学研究提供技术基础。1材料与方法1.
14、1养虫笼本试验所用的网纱式养虫笼为12 0 目,孔径为0.125mm(SY L-30 B,杭州艾普仪器设备有限公司)。养虫笼要循环通风、高透光、方便观察。正面有拉链式开关门以及袖筒,方便拿取笼内昆虫、更换饲料,同时避免昆虫飞逃,支架方便安装,容易拆卸清洗,天津农业科学结构稳定不易倒。不同大小的养虫笼(30 cmx30cmx30 cm,40 cmx40 cmx40 cm,50 cmx50 cmx50 cm)适用于不同时期、不同数量的桔小实蝇饲养。1.2养虫室稳定的生活环境对保持桔小实蝇种群稳定非常重要。本研究选择采光充足、通风良好的实验室,配有人工光源,调节光周期,提高桔小实蝇的交配效率,室内还
15、放置养虫笼的桌子或架子。初步探索出光周期(L:D=14:10)对雌性桔小实蝇产卵效果最佳,温度为2 5 2 8 的条件更适合桔小实蝇的生长发育。养虫室还应避免外界生物的干扰,室内窗户应安装纱窗,避免其他昆虫进入,一旦发现应及时清理。1.3野生虫源的采集从中国热带农业科学院南亚热带作物研究所种质资源圃内采集被桔小实蝇寄生的番石榴和杨桃。采集的虫果放置于装有消毒的湿润沙或土(约5cm厚)的保鲜盒中,让老熟的幼虫跳出化(沙土的湿度保持在7 5%左右,即用手捏无水滴渗出,成团松开后能分散落下为宜)。羽化后的成虫要隔离饲养,相近日龄的雌雄成虫可共同饲养,增加交配率。养虫笼要根据虫数选择适宜的大小,成虫生
16、活环境过于拥挤会增加死亡率,影响实验室种群建立。1.4数据分析本试验数据使用MicrosoftExcel2010软件整理数据,使用SPSS26.0进行统计分析,采用独立样本t检验分析桔小实蝇净生殖率、平均世代周期、内增长率、周限增长率、种群加倍时间在不同饲养模式间的差异显著性,采用邓肯氏新复极差法进行多重比较。生命表各项参数采用文献 17 的计算方法:净生殖率Ro=Zlmx(1)平均世代周期T=Zxl.m./Ro(2)内增长率rm=(l n R o)/T(3)周限增长率入=erm(4)种群加倍时间DT=ln(2)/rm(5)式中,x为天数;l,为昆虫个体在x期间的存活率;mx为x期间每头雌蝇的
17、平均产卵量。2结果与分析2.1所卵的采集与孵化试验采用自制简易集卵器收集桔小实蝇卵(图1、图2)。使用较软的透明塑料杯,深度为8 cm,在距离杯底3cm以上部分沿杯壁均匀扎孔,孔直径为1mm,孔呈反射状,间距1cm,杯子底部倒人浓缩番第2 9 卷第10 期石榴汁或放人新鲜的香蕉片,深度为2 3cm。在桔小实蝇产卵高峰期,于每日上午8:0 0 9:0 0 将准备好的集卵器放进桔小实蝇养虫笼中,晚上2 0:0 0 取出。用洗瓶将瓶壁上收集到的卵冲洗至纱布上,用移液管将纱布上的卵移至寄主水果中孵化。孵化温度为28,湿度为7 5%。通过人工收集卵,可以繁育出龄期一致的试验种群。尹伊秀娟等:桔小实蝇试验
18、种群饲养技术研究图3幼虫的饲养环境图1自制集卵器图4人工饲料饲养的幼虫图2 自制集卵器收集的卵2.2幼虫的饲养幼虫的饲养方式主要有2 种:寄主整果饲养和人工饲料饲养。本着经济、简单、可操作性强的原则,根据饲养的虫数、规模、季节等因素选择饲养方式。2.2.1寄主整果饲养此法一般在饲养虫数较少、温度适宜、有充足寄主水果时使用。用镊子把刚孵化的幼虫直接挑入寄主水果中,使用的寄主水果最好与父母本的寄生水果保持一致(图3、图4)。2.2.2幼虫人工饲养在不满足上述整果饲养条件时,根据陈毅超 10 方法进行饲养。配方如下:酵母粉5g、蔗糖10 g、麦麸粉6 g、麦麸12 g、苯甲酸钠0.1g、对羟基苯甲酸
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