锯缘青蟹产组胺菌的分离与鉴定.pdf
《锯缘青蟹产组胺菌的分离与鉴定.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《锯缘青蟹产组胺菌的分离与鉴定.pdf(4页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、现代食品XIANDAISHIPIN171/分析检测AnalysisandTestingdoi:10.16736/41-1434/ts.2023.15.042锯缘青蟹产组胺菌的分离与鉴定Isolation and Identification of Histamine-Producing Bacteria from Scylla serrata 陈德强1,2,谢吉红1,孙菲霞1,黄 丽1,2(1.北部湾大学,广西 钦州 535011;2.广西高校北部湾海产品高值化利用与预制食品重点实验室,广西 钦州 535011)CHEN Deqiang1,2,XIE Jihong1,SUN Feixia1,H
2、UANG Li1,2(1.Beibu Gulf University,Qinzhou 535011,China;2.Guangxi College and Universities Key Laboratory of High-value Utilization of Seafood and Prepared Food in Beibu Gulf,Qinzhou 535011,China)摘 要:本研究从锯缘青蟹中分离得到24株产组胺菌。经检测,24株产组胺菌均携带组氨酸脱羧酶hdc基因,通过 16S rDNA 比对分析,共鉴定为 9 个属 15 个细菌种,其中 Acinetobacter b
3、aumannii 为优势分离菌种,占比为25.0%;产组胺能力检测表明,24 株产组胺菌发酵上清液平均组胺含量为 33.97 mgL-1,Aeromonas hydrophila(H20)的组胺含量最高达 45.06 mgL-1。本研究为进一步了解锯缘青蟹产组胺微生物种类,以及加强锯缘青蟹产品质量安全控制提供一定参考。关键词:锯缘青蟹;产组胺菌;分离鉴定Abstract:In this study,24 strains of histamine producing bacteria were isolated from Scylla serrata.All these 24 bacterial
4、 strains carried the histidine decarboxylase gene hdc.A total of 9 genera and 15 bacterial species were identified through 16S rDNA analysis,among which Acinetobacter baumannii was the dominant isolated strain,accounting for 25.0%.The average histamine content in the fermentation supernatant of the
5、24 strains was 33.97 mgL-1,with the highest histamine content 45.06 mgL-1 in Aeromonas hydrophila(H20).This study provides some reference for further comprehension of the types of histamine producing microorganisms and the quality and safety control in Scylla serrata.Keywords:Scylla serrata;histamin
6、e producing bacteria;separation and identification中图分类号:F762.6锯缘青蟹(Scylla serrata)是我国南方沿海重要的经济水产养殖品种,具有很高的营养与经济价值。近年来,锯缘青蟹养殖业及其贸易发展快速。由于锯缘青蟹具有高蛋白、高水分的生物学特征,在贮运与保鲜过程中极易受到微生物污染而引起腐败。在适宜条件下,蟹体内游离组氨酸经腐败菌的脱羧作用容易生成大量的组胺,引起食用过敏,危害人体健康。同时,组胺含量超标也是制约我国海产品出口贸易的主要瓶颈因素1。本研究将从锯缘青蟹中分离筛选产组胺的微生物种类,并对其产组胺能力进行测定,旨在为锯
7、基金项目:北部湾大学大学生创新创业训练计划项目(S202111607041);广西科技计划项目(桂科AD19245119);北部湾大学引进高层次人才科研启动项目(2019KYQD11、2019KYQD12)。作者简介:陈德强(1987),男,博士,讲师,研究方向为海产品与农产品微生物检测。通信作者:黄丽(1985),女,博士,讲师,研究方向为水产品保鲜。E-mail:。现代食品XIANDAISHIPIN172/分析检测Analysis and Testing缘青蟹及其产品的保鲜加工和组胺控制提供一定的参考依据。1 材料与方法1.1 样品采集锯缘青蟹分别采集于钦州市城东市场(7 份)、东风市场(
8、5 份)和鸿发市场(7 份),共 19 份样品。采集的锯缘青蟹样品保存于 4 的冰箱备用。1.2材料与试剂化学试剂:组胺标准品、L-组氨酸、正戊醇、对硝基苯胺,购于上海麦克林公司;Bacterial DNA Kit(Omega);Taq PCR 试剂盒(GenStar)。产组胺菌初筛培养基:蛋白胨5.0 g、酵母粉5.0 g、氯化钠 5.0 g、碳酸钙 1.0 g、溴甲酚紫 0.06 g、L-组氨酸 4.0 g、琼脂粉 20.0 g、蒸馏水 1 L,调 pH 值为 5.3。产组胺菌复筛培养基:L-组氨酸 10 g、NaCl 5 g、磷酸吡哆醛 0.01 g、溴甲酚紫 0.06 g、琼脂 20
9、g、蒸馏水 1 L,调 pH 值为 5.3。组胺检测培养基:L-组氨酸10.0 g、蛋白胨15.0 g、NaCl 3.0 g、K2HPO4 2.5 g、丙酮酸钠 10.0 g、葡萄糖 2.5 g、蒸馏水 1 L,调 pH 值为 6.0。1.3 仪器与设备高速离心机(德国 Hettich,Universal 320);恒温培养箱(上海合恒,DHG-9030A);PCR仪(Thermo,ProFlex 332 孔);分光光度计(Thermo,Evolution 201);电泳仪(北京六一,DYY-6C);凝胶成像系统(美国 SIM,Bio-best135A)。1.4 试验方法1.4.1 产组胺菌分
10、离筛选参照陆踊南等2方法,无菌条件下将锯缘青蟹研磨均匀,称取 10 g 研磨组织加入 90 mL 生理盐水,得到 10-1稀释液,并依次进行 10 倍梯度稀释得到系列稀释液。吸取1 mL稀释液于灭菌培养皿中,倒入约15 mL初筛培养基混匀,凝固后 37 培养 48 h;挑取变紫色的菌落划线接种于复筛培养基上,37 培养 48 h 后,再次观察,变紫色的菌落则为产组胺细菌。1.4.2 组氨酸脱羧酶 hdc 基因检测按 Bacterial DNA Kit(Omega)说明书操作提取各菌株 DNA,采用 JAW 等3设计的 hdc 引物进行扩增检测,预期片段大小 1 380 bp 左右。引物:hdc
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 锯缘青蟹产 组胺 分离 鉴定
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。