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基因工程的操作工具和操作程序练习题
班级 姓名
一、选择题
1.下面哪项不具有限制酶识别序列的特征（ ）
A．GAATTC B．GGGGCCCC C．CTGCAG D．CTAAATC
CTTAAG CCCCGGGG GACGTC GATTTAG
2．EcoRI和SmaⅠ限制酶识别的序列均由6个核苷酸组成，但切割后产生的结果不同，其识别序列和切割点（图中箭头处）分别如下图所示，请据图分析正确的是

A．所有限制酶的识别位点均由6个核苷酸序列组成
B．SmaⅠ限制酶切割后产生的是黏性末端
C．用连接酶连接平末端和黏性末端的连接效率一样
D．细菌细胞内限制酶可以切割外源DNA，防止外源DNA入侵
3．下列DNA片段能够用DNA连接酶连接起来的是

A．①和⑤ B．①和⑤、②和④ C．①和③ D．①和③、④和⑥
4.对基因组文库的描述，不正确的是
A．含有某种生物的全部基因
B．基因中含有启动子和内含子
C．文库的基因是通过受体菌承载的
D．文库中的全部基因可以在物种间交流
5．下表是基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是 

目的基因供体
分子手术刀
分子缝合针
载体
受体
A
质粒
限制性
内切酶
DNA连接酶
提供目的基因
的生物
大肠杆菌等
B
提供目的基因的生物
DNA连接酶
限制性
内切酶
质粒
大肠杆菌等
C
提供目的基因的生物
限制性
内切酶
DNA连接酶
质粒
大肠杆菌等
D
大肠杆菌等
DNA连接酶
限制性
内切酶
提供目的基因
的生物
质粒
6．目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是

①检测受体细胞是否有目的基因 ② 检测受体细胞是否有致病基因
③检测目的基因是否转录mRNA ④ 检测目的基因是否翻译蛋白质
A．①②③ B．②③④ C．①②④ D．①③④
7．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC－，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是

A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
8．人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是
A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的分子量 D.便于与外源基因连接
9. 有关基因工程的叙述正确的是 （　 ）
A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成
　C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
10．下列有关基因工程中限制内切酶的描述，错误的是
A．一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B．限制性内切酶的活性受温度的影响
C．限制性内切酶能识别和切割RNA
D．限制性内切酶可从原核生物中提取
线性DNA分子的酶切示意图
11．已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是
A．3 B．4 C．9 D．12
12．下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是

A．将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法或基因枪法
B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌

C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌
D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长
13．下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步需用到的工具是

A．DNA连接酶和解旋酶 B．DNA聚合酶和限制性核酸内切酶
C．限制性核酸内切酶和DNA连接酶 D．DNA聚合酶和RNA聚合酶
14．人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是
A．大肠杆菌 B．酵母菌 C．T4噬菌体 D．质粒DNA
15．下图为用于基因工程的一个质粒示意图。用EcoRI限制酶切割目的基因和该质粒，再用DNA连接酶连接形成重组质粒，然后导人大肠杆菌，最后将大肠杆菌放在四种培养基中培养：a一无抗生素的培养基，b一含四环素的培养基，c一含氨苄青霉素的培养基，d一含四环素和氨苄青霉素的培养基。 含重组质粒的大肠杆菌能生长的是( )

A．a B．a和c C．a和b D．b和c

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二、填空题
16.为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。
（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限 制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）
（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方 法有农杆菌转化法和 法。
（3）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要 用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

17.以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。
（1）获得目的基因的方法通常包括 和 。
（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是 和 。
（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或 ，后者的形状成 。
（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率 ，所以在转化后通常需要进行 操作。
（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和 序列上是相同的。[来源:Z§xx§k.Com]

18． 1970年，特明和巴尔的摩证实了RNA病毒能依赖RNA合成DNA的过程，并发现了催化此过程的酶。下面为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请根据图解回答下列问题：

70～75℃
RNA单链
杂交双链
RNA链 DNA链
①
核酸酶H
单链DNA
②
双链DNA
90～95℃
③
55～60℃
④
⑤

（1）催化①过程的酶是 ；核酸酶H的作用是 。
（2）③过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90~95℃时才能完成，说明DNA分子具有 性。
（3）由图中信息分析可知，催化②⑤过程的酶都是 ，两者在作用特性上的区别是 。

19．在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
[来源:学|科|网Z|X|X|K]侵
染
抗虫基因
含kan质粒
重组质粒
土壤农杆菌
含重组质粒土壤农杆菌
A
构建
导入
B
培养选择
转基因抗虫植株
再生植株
愈伤组织
离体棉花叶片组织
C
诱导选择
分化
D
检测

[来源:Zxxk.Com]

请据图回答：
（1）A过程需要的酶有_______________________________________________。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是____________________
____________________________________________________________。
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________
________________________________________________作为探针。
（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与________________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。