进口萨福克冷冻胚胎移植及受体同期发情技术研究.pdf
《进口萨福克冷冻胚胎移植及受体同期发情技术研究.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《进口萨福克冷冻胚胎移植及受体同期发情技术研究.pdf(4页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、2023 05畜牧兽医XUMUSHOUYI摘要:为了丰富我国绵羊遗传资源,开展绵羊品种繁育和新品系培育工作,从澳大利亚引进纯种萨福克胚胎331 枚。并对进口冷冻胚胎的质量、受体处理、技术员操作等因素对胚胎移植妊娠率的影响进行了应用研究。随机将受体羊分为 4组,在相同的环境、饲养和管理条件下,采用舍饲加放牧的饲养模式开展相应的应用研究。结果表明,4 组胚胎中 A 级胚胎占 45%47%,B 级胚胎占 35%36%,C 级胚胎占 17%19%;4 组受体羊同期发情移植率分别为 88.10%,82.83%,88.42%和 83.49%;移植受胎率分别为 58.10%,73.17%,48.81%和 4
2、1.76%,平均受胎率为55.46%。从以上实验数据可以看出,在相同的饲养环境、胚胎质量、受体状态的条件下,技术人员的操作水平对受胎率产生极大的影响,差异极显著。本文对羊胚胎移植中的技术环节和水平进行试验和针对性的讨论,以期对该技术的生产应用提供参考。关键词:萨福克;冷冻胚胎;移植;受体;同期发情技术胚胎移植又称为借腹怀胎,亦称为受精卵移植,是通过超数排卵技术获得优良母畜的早期胚胎(囊胚、桑椹胚或二细胞受精卵),同时对受体母畜进行同期发情处理,使供受体母羊处于发情期的同一阶段,然后将早期胚胎移植到生理状态相同的受体母畜子宫内,使之继续发育成独立个体的生物繁殖技术应用1-2。胚胎移植技术最早出现
3、在英国剑桥大学的Walter Heape 教授,他在1890年使比利时母兔成功生产出安哥拉仔兔,该技术引起了国际上的广泛关注3。随后,胚胎移植技术在动物繁殖中得到快速推广,特别是在绵羊、奶牛、山羊、猪、鼠等动物中快速扩繁种群以及优良种畜的跨地域、跨国际间的流通方面起到了举足轻重的作用。我国动物胚胎移植技术的研究起步较晚,在20世纪50 60年代,我国的胚胎移植技术一直处在研究开发阶段。直至20世纪70 80年代期间,胚胎移植技术才逐步在猪、马、牛、羊等物种上取得成功,并进行推广应用4-5。本文从进口胚胎移植中的影响因素开展了相关的应用研究,总结出了在相同的环境、饲养和管理条件、受体状态等因素下
4、,技术人员的移植技术水平是影响移植成功率的重要因素,特别是受体羊子宫角在体外滞留时间,技术人员在控制子宫角的力度和方向以及子宫角钝性打孔时的出血与否等等是直接影响受体羊受胎率的关键因素。为今后一段时间内绵羊胚胎的移植提供技术借鉴。1材料与方法1.1试验材料1.1.1试验羊受体的选择标准为:受体羊健康、无繁殖性疾病和胎衣不下,无不良遗传或传染性疾病,母性好,泌乳量高,体型稍大,年龄2.5 5.0岁,经产羊1 2胎为宜。1.1.2试验药品孕马血清 1 000 IU/支(宁波市三生药业有限公司);CIDR栓 50个/包,45 mg/个(北京燕瑞生物股份有限公司);PGF2a0.2 mg/支,2 mL
5、/支(宁波第二激素厂生产);胚胎解冻液和胚胎保存液(美国ICP公司生产);静松灵 10 mL/支(丹东市兽药厂);75%酒精 500 mL/瓶(德州利兴消毒制品有限进口萨福克冷冻胚胎移植及受体同期发情技术研究*党鹏程1.2,陈祥1,熬政1,王智鹏2,刘长彬3*,倪建宏3*,卢守亮3,张振良3(1.贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵州贵阳550025;2.新疆生产建设兵团第十师一八八团;3.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所)收稿日期:20230316*基金项目:贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室开放课题(黔教合KY字(2022)370号);兵团科技合作计划(202
6、3AB009-01);兵团科技创新人才计划(2020CB022)。*通讯作者:刘长彬,男,博士,研究员,主要从事动物胚胎生物技术创新研究,E-mail:;倪建宏,男,硕士,研究员,主要从事动物遗传育种与繁殖方向,E-mail:。502023 05XUMUSHOUYI畜牧兽医公司)和碘伏 500 mL/瓶(山东利尔康股份有限公司);青霉素G粉针160万IU(江西省可大动物药业有限公司)。1.1.3试验设备恒温水浴锅4孔(上海精宏实验设备有限公司,DK-8D);腹腔镜及其胚胎设备(Germany Wolf Laparoscopic,Henke Sass Wolf);体式显微镜(日本尼康公司);外科
7、器械(上海金钟医疗器械有限公司);B超仪(Tringa Linear Vet,意大利百胜集团荷兰公司);羊 用 子 宫 角 打 孔 器(专 利 号:ZL2015 20272750.4);移植针(美国ICP公司)。1.2试验方法1.2.1同期发情处理方案随机筛选400只受体母羊,“两病”检测全部为阴性,分组进行PGF2a颈部肌肉注射,剂量为1mL(0.1 mg)/只,补饲胡萝卜或亚硒酸钠维生素E灌服。7 d后阴道放置CIDR栓,记为0 d;埋置CIDR栓后13 d,撤出CIDR栓,颈部肌肉注射PMSG 330 450 IU或PGF2a0.1 mg/mL;试情公羊试情,36 48 h羊群出现发情记
8、为0 h,记为15 d;从发情开始计算,发情后第5 d受体羊需要断食限水,补饲一定量(200 g/只)的全价精饲料;于发情后的6 d,即可进行胚胎移植技术操作。1.2.2胚胎移植技术步骤第一步,将空腹、断水和补饲精料的受体母羊,固定在手术架上,用肥皂水呈扇形打湿乳房基部前3 10 cm处羊毛,用刮毛刀将羊毛全部剃除干净。第二步,使用喷壶将剪毛部位喷洒碘酒消毒,待30 s后,使用酒精喷壶,喷洒碘酒部位进行脱碘,待30 s后,再用消毒棉球或纱布,由内向外旋转擦干剪毛(手术)部位。第三步,选择血管较少的部位,使用腹腔镜打孔器错位打孔,避免出血,通过光源探查对侧腹壁手术部位的血管分布,避开血管,使用手
9、术刀片,切开一个切口,切口长约1.0 1.5 cm。此时,使用子宫钳夹住子宫角小弯处,轻轻拉出腹壁外,使用子宫角打孔器,选择子宫角分布的毛细血管间隙打孔,避免子宫角出血。第四步,将装好胚胎的移植针对准子宫角移植孔,插入子宫角内约2 3 cm深,迅速地将胚胎推送至子宫角小弯处,完成胚胎移植过程。第五步,将腹壁切口缝合1针,打结,缝合后在切口处涂抹土霉素软膏或喷洒碘酒进行消毒处理。刚刚移植后的受体母羊需要休息2 h后再进行适量的饮水和采食优质干草,并补饲一定量的全价精饲料以及胡萝卜等。1.2.3进口胚胎质量分级鉴定标准胚胎质量分级评定标准详见表1。表1胚胎质量分级评定标准6序号1234级别A级B级
10、C级D级内细胞团内细胞团呈均匀对称球形,单个卵裂球的大小、颜色、密度一致,发育阶段与预期的发育阶段一致,不规则的细胞相对较少,透明带必须是光滑的而不应该是凹陷或平坦的,至少有85%以上的细胞质是完整的、具有活性的细胞团。内细胞团的大小、性状以及单个细胞的颜色和密度存在一定的不规则。至少50%以上的细胞结构是完好的、具有活性的细胞团。内细胞团的大小、形态以及单个细胞的颜色、密度存在严重不规则,至少25%以上的细胞结构是完好的、具有活性的细胞团。死亡或退化。退化的胚胎、卵母细胞、细胞胚胎等,内细胞团没有活力。2结果与分析2.1进口萨福克冷冻胚胎质量鉴定依据胚胎质量鉴定标准,A、B级胚胎在移植后,因
11、胚胎质量不同,受体羊子宫所产生的信号也不同,因此受胎率明显高于C级胚胎。所以在生产胚胎时,除了考虑激素类药品的品质和剂量、处理程序、膘情和品种等,还应考虑供体的饲料是否均衡和供应充足7。由表2可知,A级胚胎平均占比为45%47%,B级胚胎平均占比为35%36%,C级胚胎平均占比为13%16%。基本达到了胚胎商业化利用的胚胎质量水平。C级胚胎严格来说是不能作为商业化胚胎出口的,胚胎质量主要体现在透明带裂痕或破损、内细胞团松散等,C级胚胎的产生可能与胚胎冷冻后的冷冻损伤有关。表2进口胚胎不同级别占比组别1234A级(枚)35373843A级占比(%)47.30a45.12a45.24a47.25a
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 进口 萨福克 冷冻 胚胎 移植 受体 同期 发情 技术研究
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。