水中细菌总数的测定.doc
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1、水中细菌总数的检测1. 实验目的1、学习并掌握水的细菌学检测方法2、了解水质状况与细菌数量在饮用水检测中的重要性。2. 菌落总数standard plate-count bacteria水样在营养琼脂上、有氧条件下37C培养48 h后,所得1 mL水样所含菌落的总数。细菌总数是评价水质污染程度的主要卫生指标,所测定的细菌总数增多说明水被生活废弃物污染。由于结果不能说明污染的来源,因此必须结合总大肠菌群数来判断污染源和安全程度。3. 培养基与试剂2.1 营养琼脂成分蛋白胨10 g牛肉膏3 g氯化钠5 g琼脂1020 g蒸馏水1000 mL2.2 制法:根据实际需要量,按照上述配方称取各成分混合后
2、,加热溶解,调整pH为7.47.6,分装于玻璃容器中(如用含有较多杂质的琼脂,应先过滤。),经103.43 kPa(121C,15 lb)湿热灭菌20 min,储存于冷暗处备用。4. 仪器和材料4.1 仪器:高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱、水热恒温培养箱、电炉、天平、冰箱。4.2 材料:灭菌平皿(直径9 cm)、灭菌试管、刻度吸管、三角烧瓶、采样瓶、酒精灯、消毒水、镊子、试管架等。4.3 放大镜或菌落计数器、pH计或精密pH试纸、火柴或打火机。5. 样品采集5.1 自来水的取样:先将自来水龙头用酒精棉擦拭,再用酒精灯火焰灭菌,打开龙头放水3-5 min,用无菌空三角瓶接取水样200 ml。5.2
3、纯净水取样:用消毒酒精棉擦拭纯水机出口后,先放走部分水,再用无菌空三角瓶接取水样200毫升。5.3 地表水的取样:应取距水面1015 cm的深层水样,先将灭菌的带玻璃塞瓶,瓶口向下浸入水中,然后翻转过来,除去玻璃塞,水即流入瓶中,盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出,最好立即检查,否则需放入冰箱中保存。6. 检验步骤6.1 生活饮用水(自来水、纯净水):以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1 mL充分混匀的水样,注入灭菌培养皿中,倾注约15 ml已融化并冷却到45C左右的营养琼脂培养基,并立即旋摇平皿,使水样与培养基充分混匀。每次检验时应做一平行接种,同时另用一个平皿只倾注培养基作为空白对照。待冷却凝固后
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