专题八生物技术实践第讲酶的应用和生物技术在其他方面的应用省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx
《专题八生物技术实践第讲酶的应用和生物技术在其他方面的应用省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《专题八生物技术实践第讲酶的应用和生物技术在其他方面的应用省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx(36页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳 (江苏生物江苏生物,15)以下相关以下相关酶酶制制备备和和应应用叙述,正确是用叙述,正确是()。A酶酶解法和吸水解法和吸水涨涨破法破法惯惯用于制用于制备备微生物胞内微生物胞内酶酶 B透析、透析、电电泳和酸解等方法泳和酸解等方法惯惯用于用于酶酶分离与分离与纯纯化化 C棉棉织织物不能使用添加物不能使用添加纤维纤维素素酶酶洗衣粉洗衣粉进进行洗行洗涤涤 D多多酶酶片中胃蛋白片中胃蛋白酶酶位于片位于片剂剂关关键层键层 解析解析利用酶解法和吸水涨破法使细胞解体,用于制备胞内酶;酶纯化利用酶解法和吸水涨破法使细胞解体,用于制备胞内酶;
2、酶纯化 和分离方法有透析法、离心沉降法和电泳法;纤维素酶能去除棉纺织品和分离方法有透析法、离心沉降法和电泳法;纤维素酶能去除棉纺织品 表面浮毛,平整织物表面,故可用添加纤维素酶洗衣粉洗涤棉织物;多表面浮毛,平整织物表面,故可用添加纤维素酶洗衣粉洗涤棉织物;多 酶片中胃蛋白酶位于片剂最外层,保持其它酶在胃中不被破坏。酶片中胃蛋白酶位于片剂最外层,保持其它酶在胃中不被破坏。答案答案A第第2讲酶应用和生物技术在其它方面应用讲酶应用和生物技术在其它方面应用一、了解能力一、了解能力1.第1页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳2(广东理综广东理综,5)以下关于猪血以下
3、关于猪血红红蛋白提蛋白提纯纯描述,不正确是描述,不正确是 ()。A洗洗涤红细涤红细胞胞时时,使用生理,使用生理盐盐水可水可预预防防红细红细胞破裂胞破裂 B猪成熟猪成熟红细红细胞中缺乏胞中缺乏细细胞器和胞器和细细胞核,提胞核,提纯时杂纯时杂蛋白蛋白较较少少 C血血红红蛋白蛋白颜颜色可用于凝胶色色可用于凝胶色谱谱法分离法分离过过程程监测监测 D在凝胶色在凝胶色谱谱法分离法分离过过程中,血程中,血红红蛋白比分子量蛋白比分子量较较小小杂杂蛋白移蛋白移动动慢慢 解析解析猪成熟红细胞中缺乏细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少,是猪成熟红细胞中缺乏细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少,是 提提纯纯血血红红蛋白理想材
4、料。提蛋白理想材料。提纯纯血血红红蛋白分四步:蛋白分四步:红细红细胞洗胞洗涤涤、血、血 红红蛋白蛋白释释放、分离血放、分离血红红蛋白溶液、透析,其中洗蛋白溶液、透析,其中洗涤红细涤红细胞胞时时,要用生,要用生 理理盐盐水重复洗水重复洗涤涤,既要将,既要将红细红细胞洗胞洗涤洁净涤洁净,又要不破坏,又要不破坏红细红细胞,然后再胞,然后再 用蒸用蒸馏馏水和甲苯使水和甲苯使红细红细胞破裂,胞破裂,释释放出血放出血红红蛋白。分离提蛋白。分离提纯纯血血红红蛋白蛋白时时 用凝胶色用凝胶色谱谱法,是依据相法,是依据相对对分子分子质质量大小来分离蛋白量大小来分离蛋白质质,相,相对对分子分子质质 量大蛋白量大蛋白
5、质质移移动动速度速度较较快;血快;血红红蛋白蛋白颜颜色可用于色可用于观观察察红红色区色区带带移移 动动情况,并据此判断分离效果。故情况,并据此判断分离效果。故D不正确。不正确。答案答案D第2页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳3(江苏生物江苏生物,19)在利用在利用鸡鸡血血进进行行“DNA粗提取与判定粗提取与判定”试验试验 中,相关叙述正确是中,相关叙述正确是()。A用蒸用蒸馏馏水将水将NaCl溶液溶液浓浓度度调调至至0.14 mol/L,滤滤去析出物去析出物 B调调整整NaCl溶液溶液浓浓度或加入木瓜蛋白度或加入木瓜蛋白酶酶,都能,都能够够去除部分去除部
6、分杂质杂质 C将将丝丝状物溶解在状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺溶液中,加入二苯胺试剂试剂即呈即呈蓝蓝色色 D用菜花替用菜花替换鸡换鸡血作血作为试验为试验材料,其材料,其试验试验操作步操作步骤骤相同相同 解析解析用蒸馏水将用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至溶液浓度调至0.14 mol/L时,滤取析出物;将时,滤取析出物;将 丝状物溶解在丝状物溶解在0.015 mol/LNaCl中,加入二苯胺试剂,需沸水浴加中,加入二苯胺试剂,需沸水浴加 热几分钟,才呈蓝色;用菜花替换鸡血为试验材料,需要对材料热几分钟,才呈蓝色;用菜花替换鸡血为试验材料,需要对材料 细胞壁进行处理。调整细胞壁进
7、行处理。调整NaCl溶液浓度改变不一样物质在其中溶解溶液浓度改变不一样物质在其中溶解 度,加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都能够去除部分杂质,故度,加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都能够去除部分杂质,故B正确。正确。答案答案B第3页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳4(江苏生物江苏生物,25)(多多项选择项选择)图图1表示制表示制备备固定化酵母固定化酵母细细胞相关操胞相关操 作,作,图图2是利用固定化酵母是利用固定化酵母细细胞胞进进行酒精行酒精发发酵示意酵示意图图,以下叙述正,以下叙述正 确是确是 ()A刚刚溶化海藻酸溶化海藻酸钠应钠应快速与活化酵母菌混合制快速与活化酵母
8、菌混合制备备混合液混合液 B图图1中中X溶液溶液为为CaCl2溶液,其作用是使海藻酸溶液,其作用是使海藻酸钠钠形成凝胶珠形成凝胶珠 C图图2发发酵酵过过程中程中搅搅拌目拌目标标是是为为了使培养液与酵母菌充分接触了使培养液与酵母菌充分接触 D图图1中制中制备备凝胶珠用蒸凝胶珠用蒸馏馏水洗水洗涤涤后再后再转转移到移到图图2装置中装置中二、获取信息能力二、获取信息能力第4页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳解析解析溶化海藻酸钠应冷却至室温后与活化酵母菌混合,溶化海藻酸钠应冷却至室温后与活化酵母菌混合,A项错误。海项错误。海藻酸钠与酵母菌混合液应滴入藻酸钠与酵母菌
9、混合液应滴入CaCl2溶液中,以制备凝胶珠;凝胶珠用蒸溶液中,以制备凝胶珠;凝胶珠用蒸馏水冲洗馏水冲洗23次后,可转移到发酵装置中;搅拌可使酵母菌与培养液充次后,可转移到发酵装置中;搅拌可使酵母菌与培养液充分接触,有利于发酵顺利进行,故分接触,有利于发酵顺利进行,故B、C、D三个选项正确。三个选项正确。答案答案BCD第5页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳5(江苏生物江苏生物,32)某生物某生物兴兴趣小趣小组组开展开展DNA粗提取相关探究活粗提取相关探究活 动动,详细详细步步骤骤以下:以下:材料材料处处理:称取新理:称取新鲜鲜花菜、辣椒和蒜黄各花菜、辣椒和
10、蒜黄各2份,每份份,每份10 g。剪碎后。剪碎后 分成两分成两组组,一,一组组置于置于20、另一、另一组组置于置于20 条件下保留条件下保留24 h。DNA粗提取:粗提取:第一步:将上述材料分第一步:将上述材料分别别放入研放入研钵钵中,各加入中,各加入15 mL研磨液,充分研研磨液,充分研 磨。用两磨。用两层纱层纱布布过滤过滤,取,取滤滤液液备备用。用。第二步:先向第二步:先向6只小只小烧烧杯中分杯中分别别注入注入10 mL滤滤液,再加入液,再加入20 mL体体积积分分 数数为为95%冷酒精溶液,然后用玻璃棒冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓缓缓地向一个方向地向一个方向搅搅拌,使絮拌,使絮 状物状物
11、缠绕缠绕在玻璃棒上。在玻璃棒上。第三步:取第三步:取6支支试试管,分管,分别别加入等量加入等量2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮溶液溶解上述絮 状物。状物。三、试验与探究能力三、试验与探究能力第6页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳DNA检测检测:在上述:在上述试试管中各加入管中各加入4 mL二苯胺二苯胺试剂试剂,混合均匀后,置于沸,混合均匀后,置于沸水中加水中加热热5 min,待,待试试管冷却后比管冷却后比较较溶液溶液颜颜色深浅,色深浅,结结果以下表。果以下表。(注:注:“”越多表示越多表示蓝蓝色越深色越深)分析上述分析上述试验过试验过程,回答以下程
12、,回答以下问题问题:(1)该该探究性探究性试验课题试验课题名称是名称是_。(2)第二步中第二步中“缓缓缓缓地地”搅搅拌,拌,这这是是为为了降低了降低_。(3)依据依据试验结试验结果,得出果,得出结论结论并分析。并分析。结论结论1:与:与20 相比,相同相比,相同试验试验材料在材料在20 条件下保留,条件下保留,DNA提取提取量量较较多。多。结论结论2:_。材料保留温度花菜花菜辣椒辣椒蒜黄蒜黄20 20 第7页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳针对结论针对结论1,请请提出合理解提出合理解释释:_。(4)氯氯仿密度大于水,能使蛋白仿密度大于水,能使蛋白质变质变
13、性沉淀,与水和性沉淀,与水和DNA均不相溶,且均不相溶,且对对DNA影影响极小。响极小。为为了深入提升了深入提升DNA纯纯度,依据度,依据氯氯仿特征,在仿特征,在DNA粗提取第三步基粗提取第三步基础础上上继续继续操作步操作步骤骤是:是:_,然后用体,然后用体积积分数分数为为95%冷酒精溶液使冷酒精溶液使DNA析出。析出。解析解析(1)(1)该试验中把不一样材料在不一样条件该试验中把不一样材料在不一样条件(温度温度)下处理,目标是探究不一下处理,目标是探究不一样材料和不一样保留温度对样材料和不一样保留温度对DNADNA提取量影响。提取量影响。(2)(2)“缓缓地缓缓地”搅拌是为了降低搅拌是为了降
14、低DNADNA断裂。断裂。(3)(3)分析表格可得出结论:分析表格可得出结论:相同材料在相同材料在20 20 条件下保留,条件下保留,DNADNA提取量提取量较多。原因可能是低温抑制了较多。原因可能是低温抑制了DNADNA酶活性,酶活性,DNADNA降解速度慢。降解速度慢。等质量不一样试等质量不一样试验材料,在相同保留温度下,从蒜黄中提取验材料,在相同保留温度下,从蒜黄中提取DNADNA最多。最多。(4)(4)依据氯仿特征,可在依据氯仿特征,可在第三步得到溶液中加入氯仿,使蛋白质变性。第三步得到溶液中加入氯仿,使蛋白质变性。答案答案(1)探究不一探究不一样样材料和不一材料和不一样样保留温度保留
15、温度对对DNA提取量影响提取量影响(2)DNA断裂断裂(3)等等质质量不一量不一样试验样试验材料,在相同保留温度下,从蒜黄提取材料,在相同保留温度下,从蒜黄提取DNA量最多量最多低温抑制了相关低温抑制了相关酶酶活性,活性,DNA降解速度慢降解速度慢(4)将第三步取得溶液与等量将第三步取得溶液与等量氯氯仿充仿充分混合,静置一段分混合,静置一段时间时间,吸收上清液,吸收上清液第8页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳6(上海生物上海生物,(五五)回答以下关于微生物和回答以下关于微生物和酶酶问题问题。环环境境污污染物多聚染物多聚联联苯苯难难以降解,研究以降解,研究
16、发觉联发觉联苯降解菌内苯降解菌内联联苯水解苯水解酶酶是催化多是催化多 聚聚联联苯降解关苯降解关键键酶酶。以下培养基中能有效分离以下培养基中能有效分离联联苯降解菌是苯降解菌是_,原因是,原因是 _。A培养基培养基(g/L):某生:某生长长因子因子2.0,(NH4)2SO4 2.0,K2HPO4 3.0,MgSO4 1.0,pH7.4,多聚,多聚联联苯苯50 mL B培养基培养基(g/L):牛肉膏:牛肉膏10.0,蛋白,蛋白胨胨20.0,葡萄糖,葡萄糖20.0,NaCl 5.0,pH 7.4 C培养基培养基(g/L):某生:某生长长因子因子2.0,淀粉,淀粉20.0,NH4NO3 2.5,MgCl
17、2 0.5,K2HPO43.0,多聚,多聚联联苯苯50 mL,pH 7.4 深入研究深入研究发觉发觉,不一,不一样样金属离子金属离子对联对联苯水解苯水解酶酶活性有一定影响,活性有一定影响,结结果果见见下下 表:表:四、综合利用能力四、综合利用能力第9页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳(1)依据表中依据表中结结果,金属离子果,金属离子_对该对该酶酶活性有一定促活性有一定促进进作用。金属离子作用。金属离子对对酶酶活活性有促性有促进进或抑制作用,可能原因是或抑制作用,可能原因是_ _。(2)经过经过酶酶工程可将工程可将联联苯水解苯水解酶酶用于生用于生产实产实践
18、。践。酶酶工程通常包含工程通常包含酶酶生生产产、_、酶酶固定化和固定化和酶酶应应用等方面。用等方面。酶酶固定化好固定化好处处是是_ _。(3)下列下列图实线图实线表示表示联联苯水解苯水解酶酶催化反催化反应应速度与速度与酶酶浓浓度关系,虚度关系,虚线线表示在其它条件不表示在其它条件不变变情况下,底物情况下,底物浓浓度增加一倍,反度增加一倍,反应应速度与速度与酶酶浓浓度关系,能正确表示二者关系是度关系,能正确表示二者关系是_。金属离子金属离子/mmolL1相相对对活性活性/%对对照照组组100Mn2123Co279Mg274第10页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整
19、合归纳(4)红红球菌和假球菌和假单孢单孢菌都能降解多聚菌都能降解多聚联联苯,但研究苯,但研究发觉发觉以每克菌体以每克菌体计计算,算,两种菌降解多聚两种菌降解多聚联联苯能力有所不一苯能力有所不一样样,对对此此现现象合理假象合理假设设是是_或或_。解析解析(1)A培养基中只有多聚联苯一个碳源,只有联苯降解菌能够利用培养基中只有多聚联苯一个碳源,只有联苯降解菌能够利用这一个碳源而生存。所以,这一个碳源而生存。所以,A培养基能够作为分离联苯降解菌选择培养培养基能够作为分离联苯降解菌选择培养基。基。第11页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳(2)依据表格数据,当培养
20、基中添加依据表格数据,当培养基中添加Mn2时,能使联苯水解酶活性升高。金属离子时,能使联苯水解酶活性升高。金属离子是经过与酶结合后,改变酶空间结构来影响酶活性。是经过与酶结合后,改变酶空间结构来影响酶活性。(3)酶含有专一性、高效性,酶催化后,酶分子结构不改变,假如能利用酶工程将酶酶含有专一性、高效性,酶催化后,酶分子结构不改变,假如能利用酶工程将酶固定下来,便能够重复利用,使酶催化反应连续进行。酶工程操作包含酶生产、酶固定下来,便能够重复利用,使酶催化反应连续进行。酶工程操作包含酶生产、酶分离纯化、酶固定化和酶应用等几个方面。分离纯化、酶固定化和酶应用等几个方面。(4)影响酶促反应速度原因有
21、酶浓度、底物浓度和温度、影响酶促反应速度原因有酶浓度、底物浓度和温度、pH等反应条件。在反应条等反应条件。在反应条件适宜,酶量不足情况下,增加底物量,酶促反应速度不增加,此时酶促反应速度件适宜,酶量不足情况下,增加底物量,酶促反应速度不增加,此时酶促反应速度限制因子是酶浓度。伴随酶浓度增加,当酶浓度不是酶促反应速度限制因子时,底限制因子是酶浓度。伴随酶浓度增加,当酶浓度不是酶促反应速度限制因子时,底物量增加,酶促反应速度增加。物量增加,酶促反应速度增加。(5)红球菌和假单孢菌降解多聚联苯能力不一样原因可能是两种菌内酶量不一样,或红球菌和假单孢菌降解多聚联苯能力不一样原因可能是两种菌内酶量不一样
22、,或者是两种菌内酶结构不一样致使酶活性不一样。者是两种菌内酶结构不一样致使酶活性不一样。答案答案A该该培养基中多聚培养基中多聚联联苯苯为为唯一碳源唯一碳源(1)Mn2金属离子与金属离子与酶酶结结合能合能够够改改变变酶酶空空间结间结构构(尤其是活性部位尤其是活性部位结结构构)(2)酶酶分离分离纯纯化便于重复利用,能化便于重复利用,能连续进连续进行反行反应应(3)B(4)两种菌内两种菌内酶酶量不一量不一样样两种菌内两种菌内酶酶基因基因结结构构(酶酶结结构构)不一不一样样第12页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳(1)酶酶活力活力测测定普通原理和方法;定普通原理
23、和方法;(2)酶酶在食品制造和洗在食品制造和洗涤涤等方面等方面应应用;用;(3)植物植物组织组织培养;培养;(4)蛋白蛋白质质提取和分离;提取和分离;(5)PCR技技术术基本操作和基本操作和应应用。用。进行本讲复习应从以下角度展开进行本讲复习应从以下角度展开(1)从从试验试验角度剖析每角度剖析每项项技技术术,把握其原理、材料与器材、操作流程及注意,把握其原理、材料与器材、操作流程及注意事事项项等;等;(2)用用对对比方法区分一些主要概念和方法;比方法区分一些主要概念和方法;(3)用用联络观联络观点点对对待不一待不一样样技技术术,如固定化酵母,如固定化酵母细细胞等内容。胞等内容。教授箴言经过以上
24、高考体验,能够归纳总结:第13页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳固定化酶和固定化细胞技术比较固定化酶和固定化细胞技术比较(见下表见下表)更清楚考点一酶研究与应用考试说明考试说明(1)酶在食品制造和洗涤等方面应用酶在食品制造和洗涤等方面应用/(2)制备和应用固定化酶制备和应用固定化酶类类型型固定酶种类适用方法适用方法优优点及不足点及不足实实例例固定固定化化酶酶_种种化学结正当、物理吸附法可重复利用,但只催化_或_化学反应固定化葡萄糖固定化葡萄糖异构异构酶酶固定化固定化细细胞胞一系列一系列_成本低、操作轻易,但反应效果_固定化酵母固定化酵母细细胞胞一一一个一
25、个一一类类包埋法包埋法下降下降第14页高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳1 1酶活性酶活性(酶活力酶活力)测定普通原理和方法测定普通原理和方法 (1)酶酶活性活性(酶酶活力活力)含含义义:酶酶活性活性(酶酶活力活力)是指是指酶酶催化一定化学反催化一定化学反应应能能 力。力。(2)酶酶活性活性(酶酶活力活力)测测定普通原理和方法:定普通原理和方法:酶酶活性活性(酶酶活力活力)通常以通常以单单位位时时 间间内底物消耗量或者在内底物消耗量或者在单单位位时间时间内内产产物生成量来表示。物生成量来表示。2影响酶活性原因、酶用量及应用试验探究时注意问题影响酶活性原因、
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 专题 生物技术 实践 第讲酶 应用 其他 方面 公共课 一等奖 全国 获奖 课件
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,个别因单元格分列造成显示页码不一将协商解决,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【a199****6536】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【a199****6536】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。
链接地址:https://www.zixin.com.cn/doc/3090751.html