吉他霉素片溶出度检查的再研究.doc

吉他霉素片溶出度检查的再研究
刘金凤1 康红钰2 杨月华1 李岩1
（1.河南省漯河市食品药品检查所，河南 漯河462023；2.河南省漯河市医学高等专科学校，河南 漯河 462023）
摘要：目的 改变吉他霉素片溶出度实验条件，使溶出度检查和人的生理特点更接近，更能区分不同厂家药品的质量高低。方法 采用原法定方法和减少转速及改变溶出介质方法的比较。结果 质量好的药片二种方法的溶出度没有差别，而质量差的药片的溶出度二种方法有明显的差别。结论 建议吉他霉素片溶出度检查条件改成第二法，以盐酸溶液（5.6→1000）900ml为溶出介质，转速为每分钟50转；溶出介质配制简朴，使用试剂少，对环境的污染也少。
关键词：吉他霉素片 溶出度 转速 溶出介质
Once More Study on the Examination at Dissolution ofKitasamycin Tablets
LIU Jin-feng1 ，KANG Hong-yu2 ，YANG Yue-hua1，LI Yan1
(1. Henan Luohe Institute for Food and Drug Control, 2. Henan Luohe Medical College, Luohe 462023,China)
Abstract：Objective：To change experimental condition of dissolution of kitasamycin tablets, make the human physiological characteristics more close,and distinguish different manufacturers the quality of the drugs. Method：Adopting schedule method to compare with reducing revolutions and changing dissolution medium. Result:There is no difference of the two methods in the dissolution of drugs of good qulity,but there is significant difference in the dissolution of drugs of bad qulity. Conclusion: The second method was proposed to determine the dissolution of kitasamycin tablets,taking the hydrochloric acid solution (5.6-1000)900ml as dissolution medium,rotating speed is 50rpm; dissolution medium is simple and fewer reagent consumption with lower pollution.
keywords：Kitasamycin tablets；Dissolution；Rotationai speed；Dissolution medium
中图分类号： 文献标记码： 文章编号：
吉他霉素片为临床常用药物，质量的好坏直接关系着人民群众用药的安全性与有效性。溶出度是评价口服固体药物制剂内在品质优劣的核心技术所在[1]，由于溶出度与生物运用度密切相关，故提高片剂的溶出度实验条件，则可大大提高在各种人群体内的生物运用度。
根据吉他霉素在水中极微溶解[2]（极微溶解系指溶质1g能在溶剂1000～不到10000ml中溶解[3]）这一物理性质，规格10万单位（0.1g）的吉他霉素片能在100～不到1000ml水中溶解；根据口服吉他霉素片在tmax为0.5小时[4]；根据国家药品标准工作手册[5]溶出度转速一般选择第一法100转/分，第二法50转/分，溶出介质首选水和盐酸溶液，体积900ml，来重新选择吉他霉素片溶出度检查项的实验条件，采用以下二种方法比较。
1 仪器与试剂、试药
天津大学无线电厂ZRS-8G智能溶出实验仪；日本岛津UV-240紫外分光光度仪；杭州东星仪器厂pHS－3C数显酸度仪；普利赛斯92-202A-DR分析天平；
磷酸二氢钠，氢氧化钠，盐酸均为分析纯；水为重蒸馏水；
吉他霉素片：规格0.1g 选自六家不同的生产公司，其中一家4批，一家2批，其余各一批。
2 测定方法及其方法认证
2.1 溶解度实验[6] 精密称取吉他霉素原料2份每份1.000g，分别置100ml具塞三角瓶中，1份加100ml磷酸盐缓冲液（pH5.0），另1份加100ml盐酸溶液（5.6→1000），置25℃水浴中每5分钟强力振摇30秒钟，30分钟均能溶解完。那0.1g规格的吉他霉素片在900ml的上述二种溶出介质中的溶出情况应当和它的崩解情况关系密切。
2.2 紫外最大吸取图谱及吸光度实验 精密称取吉他霉素原料2份，第一份10.12mg，用磷酸盐缓冲液（pH5.0）溶解并定量稀释成20.24µg·mL-1.的溶液，第二份10.02mg，用盐酸溶液（5.6→1000）溶解并定量稀释成20.04µg·mL-1.的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A），在231±5nm的波长处测定它们的吸光度，空白对照各用各的溶解溶液。结果见图1.吉他霉素的二种溶液的最大吸取图谱没有变化；最大吸光度（第一份0.728，第二份0.706）和它们浓度的比值的相对误差为2.1％，不符合仪器及操作规定的偏差±0.5%[7]，说明二种溶液对吉他霉素的最大吸取有影响。

图1 吉他霉素在2种溶液中的紫外吸取图谱
Fig 1 UV absorption spectrum of Kitasamycin in the two kinds of solution
1. 吉他霉素的磷酸盐缓冲液吸取图谱(Absorption spectrum of Kitasamycin in the phosphate buffer liquid) 2. 吉他霉素的盐酸溶液吸取图谱(Absorption spectrum of Kitasamycin in the hydrochloric acid )
2.3 线性关系的建立 精密称取吉他霉素原料（效价1305u/mg）21.50 mg，置于100 mL量瓶中，用盐酸溶液（5.6→1000）溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取此溶液1.00，2.00，3.00，4.00，5.00，6.00 mL分别置于50 mL量瓶中，用盐酸溶液（5.6→1000）稀释至刻度，摇匀，在231nm的波长处测定它们的吸光度。以吸光度为纵坐标 (A)，以浓度为横坐标(C)进行线性回归，得回归方程为：A=0.0314C-0.0214 r=0.9992 结果表白，吉他霉素在5.61u·mL-1～33.66 u·mL-1的范围内呈良好的线性关系。
2.4 稳定性实验 取“2.3”项下的22.44 u·mL-1 吉他霉素溶液，分别于制备后0，2，4，8 h 测定吸光度，测得吸光度RSD为0.96％ ，表白溶液在8 h 内稳定。
3 溶出度实验
3.1 药典法定方法 中国药典2023年版二部吉他霉素片溶出度检查项[8]的方法：药典附录第二法，以磷酸盐缓冲液（pH5.0）1000ml为溶出介质，转速为每分钟75转，依法操作，经45分钟时，取溶液适量，用0.8μm的滤膜滤过。精密量取续滤液5ml置25ml量瓶中，加溶出介质至刻度，摇匀，即得每1ml中约含20单位的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A），在231nm的波长处测定吸光度；另取本品10片，精密称定，研细，精密称取相称于平均片重的量至100ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液使吉他霉素溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取续滤液2ml置100ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液至刻度，摇匀，即得每1ml中约含20单位的对照溶液，同法测定，按公式（×100％）计算出每片的溶出量。由
于吉他霉素是多组分药物，各批组分不尽相同，故按药典原法定方法采用自身对照法，由于对照溶液和被测试溶液浓度基本一致，除主成分外其他辅料成分和被测试溶液几乎相同，空白对照用本法溶出介质，可以消除辅料及不同溶出介质对紫外吸光度的干扰。实验结果见表1 。
表1.药典法定方法（第二法） 转速75转/分
Tab 1. statutory methods of Pharmacopoeia (The second method) Rotationai speed 75rpm
生产厂家 平均值（％）
（Manufacturers） （Average ％）
1 97.3
2 87.8
3 92.7
4 83.3
5(1) 89.7
5(2) 92.5
6(1) 99.9
6(2) 97.7
6(3) 97.2
6(4) 96.5
3.2 药典附录第二法 以盐酸溶液（5.6→1000）900ml为溶出介质[9][10]，转速为每分钟50转。其它操作测定同2.3.1 ，用本法溶出介质配制对照溶液，空白对照用本法溶出介质，可以消除辅料及不同溶出介质对紫外吸光度的干扰。按公式（×100％）计算出每片的溶出量。
实验结果见表2 。
表2. 药典附录第二法 转速50转/分
Table 2. Pharmacopoeia Appendix II Rotationai speed 50rpm
生产厂家 　　平均值（％）
(Manufacturers) (Average ％）
1 97.0
2 81.9
3 92.9
4 71.7
5(1) 73.9
5(2) 80.8
6(1) 92.1
6(2) 95.3
6(3) 87.0
6(4) 96.0
3.3 溶出度曲线 根据表1和表2的数据选择有代表性的4批药品按上述两种方法测定溶出度曲线.取样时间分别为10分钟，20分钟，30分钟，40分钟和45分钟。各点数值均为6片的平均值。结果见图2－图5.

图2. 第1厂家吉他霉素片溶出度曲线图
Fig 2 The curve of dissolution of kitasamycin for the first manufacturer
图3. 第4厂家吉他霉素片溶出度曲线图
Fig 3 The curve of dissolution of kitasamycin for the fourth manufacturer

图4. 第5(1)厂家吉他霉素片溶出度曲线图
Fig 4 The curve of dissolution of kitasamycin for the fifth(1) manufacturer

图5. 第6(1)厂家吉他霉素片溶出度曲线图
Fig5 The curve of dissolution of kitasamycin for the sixth(1) manufacturer
3.4
4 讨论
4.1 药典法定方法每分钟75转，仪器转速太快，等于强制药物溶出，不符合人体生理特点；并且做一批吉他霉素片的溶出度检查至少需要配制6000ml的磷酸盐缓冲液（pH5.0），要用165.69g的磷酸二氢钠和约8g的氢氧化钠，调节pH值还要用pH计，配制繁琐且消耗试剂量大，既浪费又污染环境。
4.2 从以上结果可以看出，第一、第三和第六厂家的药片在不同的溶出度条件下，结果没有差异，均符合规定（中国药典规定限度为表达量的80％[8]）。；而第四和第五厂家的药片就有明显的差异，二批不符合规定。说明这两厂家的药片在强制溶出条件下的溶出度高，在通用条件下的溶出度低。从溶出度曲线可以看出好的药片就是在低转速条件下30分钟也大部分溶出了，能不久在人体内溶出吸取而达成较高的血药浓度，疗效就好。
4.3 综上所述，建议吉他霉素片溶出度检查项的条件改成第二法，以盐酸溶液（5.6→1000）900ml为溶出介质，转速为每分钟50转。更能区分出药片的质量高低；并且溶出介质配制简朴，使用试剂少，对环境的污染也少。
参考文献
1．XIE Mu-feng（谢沐风），et el. The introduc about the Project of Drug Qoality’s Re-evaluation in Japan(Series one of the Dissolution Study) 简介日本“药品品质再评价”工程（溶出度研究系列一）. Drug Standards of China (中国药品标准) [J]2023，6（6）： 42
2．ChP(中国药典)[S].2023.Vol Ⅱ(二部)：177
3．ChP(中国药典)[S].2023.Vol Ⅱ(二部)：凡例：Ⅷ
4．Chinese Pharmacopoeia Commission (国家药典委员会). Impressions on Some Chapters in the Guide To Clinical Information .The file of Chemicals and Biological Products((临床用药须知.化学药和生物制品卷) [M]2023. 540
5．Chinese Pharmacopoeia Commission (国家药典委员会).National Drugs Standard Manual(国家药品标准工作手册)[S] 1998. 10：68
6．ChP(中国药典)[S].2023. Vol Ⅱ(二部)：凡例：Ⅷ
7. National Institute for the Controlof Pharmaceutical and Biological Products(中国药品生物制品检定所).China Drug Test Standard Operate Norm(中国药品检查标准操作规范)[S] 2023：55
8．ChP(中国药典)[S].2023. Vol Ⅱ(二部)：178
9．ChP(中国药典)[S].2023. Vol Ⅱ(二部)：7
10．ChP(中国药典)[S].2023. Vol Ⅱ(二部)：225