水痘-带状疱疹病毒微生物学检验.doc
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1、水痘-带状疱疹病毒微生物学检验关键词:细胞库 菌株培养中心 atcc 北纳细胞网(一)检验程序水痘-带状疱疹病毒检验程序同图29-1。(二)标本的采集VZV感染者几乎均出现皮肤水痘或疱疹。水疱内液体含有高浓度的无细胞病毒,且采集方法简单易行,故水疱液体是确诊VZV感染的最主要标本。PCR检测可以拭子采集水疱液,置病毒运输培养基或生理盐水。VZV DNA很稳定,PCR法检测可采集血清、血浆、全血和外周血单核细胞(peripheral blood mononuelear,PBMC)保存于-20。然而,VZV极不稳定,-20冰冻后病毒活性极大地降低。故病毒培养时,应尽早接种,否则标本应加冷冻保护剂保
2、存于-80。(三)标本直接检查1.显微镜检查最原始且最简单易行的是Tzanck试验,方法是取水疱基底部含有细胞的标本涂片,用瑞特-吉姆萨(Wright-Giemsa)染色。镜检可见多核巨细胞、多个嗜酸性核内包涵体。由于HSV、VZV感染均可以观察到此形态的病变细胞,故此方法不能用于VZV的特异性诊断。2.抗原检测VZV抗原检测是住院病人VZV,感染的首选实验诊断方法。采用无菌皮肤刮勺用力刮取疱疹基底部含细胞的标本,涂片,用低温丙酮固定,室温干燥,加荧光标记的VZV特异性单克隆抗体在37潮湿的培养箱中染色培养半小时,洗去未结合抗体,加盖玻片后在荧光显微镜下观察。也可采用间接荧光抗体法检测VZV抗
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