土壤—有效磷的测定—盐酸硫酸浸提法.doc

有效磷的测定—盐酸硫酸浸提法
1 范围
本方法适用于质地较轻的酸性土壤有效磷的测定。
2 原理
土样以盐酸和硫酸溶液浸提，使土样中较活性的磷酸铁、铝盐被溶解释出，然后以钼锑抗光度法测定磷。
3 试剂
3.1 盐酸-硫酸浸提剂：0.05mol/L盐酸-0.025mol/L硫酸，量取4.0mL盐酸（ρ1.19g/mL）和0.7mL硫酸（ρ1.84g/mL），加入水中，再加水稀释至1000mL。
3.2 无磷活性碳。
3.3 对硝基酚指示剂：称取0.20g对硝基酚，溶于100mL水中。
3.4 氢氧化钠溶液：2mol/L，称取80.0g氢氧化钠溶于水，再加水稀释至1000mL。
3.5 硫酸溶液：0.5mol/L，量取28.0mL硫酸（ρ1.84g/mL），缓慢加入水中，再加水稀释至1000mL。
3.6 钼锑贮存液：量取153mL硫酸（ρ 1.84g/mL），缓慢地加入400mL水中，搅拌，冷却。另取10g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]溶解于约60℃的300mL水中，冷却。然后将硫酸溶液缓慢倒入钼酸铵溶液中，再加入100mL 5g/L酒石酸锑钾（KSbOC4H4O6·H2O）溶液，最后用水稀释至1000mL，避光贮存。
3.7 钼锑抗显色剂：称取1.50g抗坏血酸（C6H8O6），溶于100mL钼锑贮存液中，随用随配。
3.8 磷标准溶液：称取在105℃烘2h的磷酸二氢钾（KH2PO4）0.4394g(精确至0.0001g)溶于水中，加5mL硫酸（ρ1.84g/mL），再加水稀释至1000mL，此溶液1mL含100µg磷。吸取10.00mL上述标准溶液置于200mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，此溶液1mL含5µg磷，不宜久存。
4 仪器
4.1 分光光度计。
4.2 振荡机。
4.3 容量瓶，50mL。
4.4 锥形瓶，200mL。
5 操作步骤
5.1 待测液的制备：称取通过2mm筛孔的风干土样5.0000g（精确至0.0001g）置于200mL锥形瓶中，加入25mL盐酸-硫酸浸提剂，加塞，放在振荡机上振荡5min。用慢速滤纸过滤于50mL容量瓶中，用水洗涤，再加水稀释至刻度，摇匀。同时做空白试验。如滤液有颜色，可加少量无磷活性炭作脱色处理。
5.2 测定吸光度：吸取2.00mL～10.00mL溶液置于50mL容量瓶中，加水至15mL～20mL，加1滴对硝基酚指示剂，用2mol/L氢氧化钠溶液调节溶液至黄色，再用0.5mol/L硫酸溶液调节溶液至微黄色，加入5mL钼锑抗显色剂，加水稀释至刻度，摇匀。放置30min后，在分光光度计上，于700nm波长处，用1cm～2cm吸收皿测定吸光度，从工作曲线上查得相应的磷量。
5.3 工作曲线：分别取0、5、10、15、20、25、30µg磷标准溶液置于50mL容量瓶中，按5.2操作步骤操作，绘制工作曲线。
注1：钼锑抗光度法要求显色液中硫酸浓度为0.23mol/L～0.33mol/L。如酸度小于0.23mol/L，虽然显色加快，但稳定时间较短。如酸度大于0.33mol/L，则显色变慢。本法要求显色温度为15℃以上，如室温低于15℃，可放置在30℃~40℃的恒温箱中保持30min，冷却后测定吸光度。
6 结果计算
按下式计算土壤有效磷量：
WP=
式中：
WP——有效磷量，mg/kg；
C——从工作曲线上查得有效磷量，µg；
t——分取倍数（溶液总体积50mL/吸取溶液体积）；
m——风干土样质量，g；
K——风干土样换算成烘干土样的水分换算系数。
7 允许差
样品进行两份平行测定，取其算术平均值，取一位小数。两份平行测定结果允许差按表1规定。
表1 有效磷测定允许差
有效磷量(mg/kg)
允许差(mg/kg)
>25
>2.5
10~25
1.0~2.5
2.5~10
0.5~1.0
<2.5
<0.5