血球计数板专题复习市公开课一等奖百校联赛获奖课件.pptx
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1、血细胞计数板显微镜直接计算法第1页血球计数板结构和使用血球计数板结构和使用第2页 方格网上刻有方格网上刻有9个个大方格,其中只有大方格,其中只有中间一个大方格为中间一个大方格为计数室计数室,供微生物,供微生物计数用计数用。大方格长和宽各为大方格长和宽各为1mm,深度为,深度为0.1mm,即即1mm1mm0.1mm,其容积为,其容积为0.1mm3;第3页 血球计数板是一个专门用于计算血球计数板是一个专门用于计算较大单细胞微生物数较大单细胞微生物数量量仪器,由一块比普通载玻片厚特制玻片制成玻片中有仪器,由一块比普通载玻片厚特制玻片制成玻片中有四条下凹槽,组成三个平台。中间平台较宽,其中间又四条下凹
2、槽,组成三个平台。中间平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网方格网。血球计数板结构第4页大方格中方格小方格第5页计数1625型:普通取四角四普通取四角四个中方格(个中方格(100个个小方格)计数小方格)计数2516型:普通计数四个角普通计数四个角和中央五个中方格和中央五个中方格(80个小方格)细个小方格)细胞数。胞数。第6页计数室两种规格 11625型计数板 将计数室放大,可见它含16中格,普通取四角:1、4、13、16四个中方格(100个小方格)计数。细胞个数1mL100个小方格细胞总数/100 40010000稀释倍数 第7页2
3、2516型计数板 中央大方格以双线等分成25个中方格,每个中方格又分成16个小方格,供细胞计数用(见图三)。普通计数四个角和中央五个中方格(80个小方格)细胞数。细胞个数1mL80个小方格细胞总数/80 40010000稀释倍数 第8页血球计数板使用方法步骤血球计数板使用方法步骤1 1镜检计数室。在加样前,先对计数板计数室进行镜镜检计数室。在加样前,先对计数板计数室进行镜检。若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数;检。若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数;2 2加样品。将清洁干燥血球计数板加样品。将清洁干燥血球计数板计数室上加盖专用计数室上加盖专用盖玻片,用吸管吸收稀释后酵母菌悬液,盖玻片,
4、用吸管吸收稀释后酵母菌悬液,滴于盖玻片边滴于盖玻片边缘,让培养液自行缓缓渗透,一次性缘,让培养液自行缓缓渗透,一次性充满计数室充满计数室,预防,预防产生气泡,多出培养液可用滤纸吸去;产生气泡,多出培养液可用滤纸吸去;3 3计数。稍待片刻(约计数。稍待片刻(约5min5min),待酵母菌细胞全部沉),待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后,将计数板放在载物台中央,先在降到计数室底部后,将计数板放在载物台中央,先在低低倍镜下找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计倍镜下找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并统计数并统计。第9页注意事项注意事项l1.从试管中吸出培养液进行计数之前,建议将试管震
5、荡几次,目是什么?目:使培养液中酵母菌分布均匀,以保证 估算准确,减少误差2 2 假如一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应该对假如一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应该对培养液进行稀释。详细方法是:培养液进行稀释。详细方法是:摇匀试管,取摇匀试管,取1mL1mL酵母菌培养液,加入成酵母菌培养液,加入成倍无菌水稀释,稀释倍无菌水稀释,稀释n n倍后,再用血球计数板倍后,再用血球计数板计数,所得数值乘以稀释倍数。以每小方格计数,所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有内含有4545个酵母细胞为宜。个酵母细胞为宜。第10页3 3活酵母有芽殖现象,若芽体到达母细胞大小活酵母有芽殖现象,若芽体到达母细胞大
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