薄壳山核桃无性系种实性状综合评价.pdf
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1、DOI:10.12171/j.10001522.20210323薄壳山核桃无性系种实性状综合评价杨兵兵1,2姚小华1张成才1邵慰忠3杨雨晨1刘林秀1(1.中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江杭州311400;2.南京林业大学,江苏南京210037;3.建德市林业技术推广中心,浙江建德311600)摘要:【目的】探究薄壳山核桃成分组成、含量差异及各品质性状之间相关性,为优良种质资源的挖掘和优良新无性系的选育提供参考。【方法】对 50 个无性系的种仁含油率、脂肪酸、酚类物质含量、核果质量、核果高、核果径、仁质量等性状进行测定,分析各性状之间相关性,并基于主成分分析模型进行综合评价。【结果】(1
2、)含油率均处于 70.09%79.99%之间,其中 JD25、JD13、JD6、JH3、JD23、XS3、JD27 和JD28 含油率均值较大。(2)油脂中共检测出 8 种脂肪酸,且脂肪酸各成分的相对含量存在差异,其中 JH1、JD21、XS3、JD27 和 XS7 不饱和脂肪酸含量高于其他无性系。(3)各个性状之间存在显著差异,其中不饱和脂肪酸变异系数为 0.38%,最为稳定;总黄酮与缩合单宁变异系数为 51.22%和 49.88%,属高度变异。(4)采用主成分分析模型对 50 个无性系进行综合评价,其中 XS12、XS1、JD23、XS3、JH1、XS8、JD30 和JD29 排名靠前。【
3、结论】综合含油率和主成分分析模型排名考虑,分别选择各自排名前 3 和两者共有的无性系,即 JD23、XS3、XS12、XS1、JD25、JD13 和 JD6 作为优良种质资源和优良无性系进行培育与选育。关键词:薄壳山核桃;营养性状;经济性状;相关性;主成分分析中图分类号:S664.1文献标志码:A文章编号:10001522(2023)05005710引文格式:杨兵兵,姚小华,张成才,等.薄壳山核桃无性系种实性状综合评价 J.北京林业大学学报,2023,45(5):5766.YangBingbing,YaoXiaohua,ZhangChengcai,etal.Comprehensiveevalu
4、ationofseedandfruittraitsofthinshellofpecanclonesJ.JournalofBeijingForestryUniversity,2023,45(5):5766.Comprehensive evaluation of seed and fruit traits of thin shell of pecan clonesYangBingbing1,2YaoXiaohua1ZhangChengcai1ShaoWeizhong3YangYuchen1LiuLinxiu1(1.ResearchInstituteofSubtropicalForestry,Chi
5、neseAcademyofForestry,Hangzhou311400,Zhejiang,China;2.NanjingForestryUniversity,Nanjing210037,Jiangsu,China;3.JiandeForestryTechnologyExtensionCenter,Jiande311600,Zhejiang,China)Abstract:ObjectiveThispaperaimstoexplorethecomposition,contentdifferenceandcorrelationofthecomponentsofpecans,andtoprovide
6、areferencefortheminingofsuperiorgermplasmresourcesandthebreedingofsuperiornewclones.MethodTheoilcontent,fattyacid,phenolicsubstancecontent,drupemass,drupeheight,drupediameter,andkernelmassof50clonesweremeasuredtoanalyzethecorrelationamongthetraits,andcomprehensiveevaluationwasmadebasedontheprincipal
7、componentanalysismodel.Result(1)Theoilcontentrangedfrom70.09%to79.99%,amongwhichthemeanoilcontentsofJD25,JD13,JD6,JH3,JD23,XS3,JD27andJD28werehigher.(2)Atotalof8kindsoffattyacidsweredetected,andtherelativecontentsoffattyacidsweredifferent,amongwhichthecontentsofJH1,JD21,XS3,JD27and XS7 unsaturated f
8、atty acids were higher than those of other varieties.(3)There were significantdifferencesamongtraits,andthevariationcoefficientofunsaturatedfattyacidswas0.38%,whichwasthe收稿日期:20210826修回日期:20220221基金项目:江西省林业局林业科技创新专项“薄壳山核桃无性系引种试验与筛选”(创新专项(2020)04),华东区薄壳山核桃优质轻简高效栽培技术集成与示范(2020YFD100070303)。第一作者:杨兵兵。主要
9、研究方向:经济林育种研究。Email:地址:311400 浙江省杭州市富阳区大桥路 73 号。责任作者:姚小华,博士,研究员。主要研究方向:经济林遗传育种与栽培技术研究。Email:地址:同上。本刊网址:http:/;http:/第45卷第5期北京林业大学学报Vol.45,No.52023年5月JOURNALOFBEIJINGFORESTRYUNIVERSITYMay,2023moststableone.Thecoefficientsofvariationoftotalflavonoidsandcondensedtanninwere51.22%and49.88%,respectively,wh
10、ich were high variables.(4)Principal component analysis was used tocomprehensivelyevaluatethe50clones,amongwhich,XS12,XS1,JD23,XS3,JH1,XS8,JD30andJD29rankedthetop.ConclusionConsideringthecomprehensiveoilcontentandprincipalcomponentanalysismodelranking,thetop3clonesofeachandtheclonessharedbyboth,i.e.
11、JD23,XS3,XS12,XS1,JD25,JD13 and JD6 are selected as excellent germplasm resources and excellent clones for cultivation andbreeding.Key words:Carya illinoensis;nutritionalproperty;economictrait;correlation;principalcomponentanalysis薄壳山核桃(Carya illinoinensis)起源于美国和墨西哥交界处的河谷地带,为胡桃科(Julandaceae)山核桃属(Car
12、ya)植物12。薄壳山核桃是世界上重要的木本油料树种之一,其坚果个大(80100粒/kg),壳薄且出仁率高(50%70%),取仁容易,产量比较高(15002250kg/hm)3。果实种仁富含油脂和蛋白质,种仁含油率可达 51.57%69.47%,含有 17 种氨基酸,其中 7 种为人体必需氨基酸4。薄壳山核桃引入中国已有 110 多年5,至今已在 20 多个省(直辖市、自治区)引种并栽植。我国薄壳山核桃产业发展缓慢,一直未形成规模化的高产园,其中一个重要原因就是种质资源匮乏。我国薄壳山核桃的种质资源评价和育种工作才刚刚起步6,李永荣等7通过对 249 株薄壳山核桃实生单株和 21 个引进无性系
13、进行包括单果质量、果径、出仁率、含油率等指标在内的果实性状调查,筛选出 49 个优良单株。不同薄壳山核桃无性系在营养成分上存在差异8。脂肪酸是薄壳山核桃重要的营养成分,其中油酸和亚油酸是主要成分,两者总量的相对含量基本保持不变9。多酚类物质广泛存在于植物中,主要有缩合单宁、类黄酮类等10,具有较高的抗氧化活性,能够显著降低阿尔海默症、帕金森综合征、癌症等许多慢性疾病的发病率1112。薄壳山核桃果仁中多酚类物质含量丰富,研究者们首先从薄壳山核桃种仁中检测到没食子酸和水杨酸衍生物,而后又陆续在种仁和果壳中鉴定到儿茶素、鞣花酸等成分1316。当前关于薄壳山核桃果实营养成分和脂肪酸组成方面的研究多以波
14、尼、马罕等已审(认)定无性系为主17,对于尚未审定无性系的报道不多,且罕有将坚果性状、含油率、脂肪酸、酚类物质含量等进行比较分析的研究。本文以 50 个薄壳山核桃无性系为研究对象,对其坚果的重要品质性状、脂肪酸组成和多酚含量等进行测定和分析,探究其成分组成、含量差异以及相关性,同时采用主成分分析模型进行综合评价,旨在为优良种质资源的挖掘和优良新无性系的选育提供参考。1材料与方法 1.1 试验材料试验材料采自浙江省建德市更楼街道洪宅村营建的 12 年生薄壳山核桃无性系测定试验林(2928N,11923E),海拔 100m,年平均气温 16.7,无霜期254d,年降水量 1500mm,土壤为紫砂土
15、,属于亚热带北缘季风气候带,试验林株行距为 6m6m。每个无性系 3 个重复,每个重复 30 个果。试验时间为2020 年 1012 月。1.2 实验仪器气相色谱仪(Agilent7890 型,美国)、液相色谱仪(Agilent,美国)、可见分光光度计(723N,上海精科仪器有限公司)、电热恒温鼓风干燥箱(DHG-9146A,上海精宏)、索式抽提仪(BUCHI,0014983)。1.3 研究方法1.3.1含油率测定薄壳山核桃含油率测定方法9:薄壳山核桃剥壳为种仁后,先在 105 的烘箱中烘干 9h,然后研磨成粉末。将直径为 12.5cm 的定性滤纸折成滤纸包,置于铝盒中在 105 的烘箱中烘干
16、 0.5h。然后进行称质量并记录,记 m1=m盒+m包。取研磨好的种仁粉末11.5g 左右放入滤纸包中,在105 下烘干2h,称质量记为 m2=m盒+m包+m样。将有种仁粉末的滤纸包放入索式抽提器中,并加入适量的石油醚进行浸泡,抽提 6h 后,取出滤纸包并放入原铝盒中,在 105 下烘干 4h,称质量记为 m3=m残渣。含油率计算方法为:含油率=(m2m3)/(m2m1)100%,每个处理重复 3 次,取平均值。1.3.2脂肪酸测定薄壳山核桃脂肪酸含量测定按照 GB5009.1682016 第 3 法进行测定,即:加入内标物十一碳酸甘油三酯的样品经水解乙醚溶液提取脂肪,在碱性条件下皂化和甲酯化
17、,生成脂肪酸甲酯,经毛细管气相色谱,内标法定量测定脂肪酸甲酯含量。而后依据各脂肪酸甲酯含量和转换系数计算各脂肪酸含量。每个处理重复 3 次,取平均值。58北京林业大学学报第45卷1.3.3儿茶素测定儿茶素测定按照 GB/T83132008 测定,即:磨碎样品用 70%的甲醇溶液在 70 水浴上提取。测定使用 C18柱,检测波长为 278nm,梯度洗脱,高效液相色谱(HPLC)分析,用儿茶素类标准物质外标法直接定量。每个处理重复 3 次,取平均值。1.3.4缩合单宁测定缩合单宁含量测定参照张春江等18的方法,即:取 100L 萃取液置于 20mL 磨口刻度试管中,加入 3mL 香兰素甲醇溶液(4
18、0g/L)摇匀,再加入 1.5mL浓盐酸摇匀,20min 后,于 500nm 处测定吸光度(A500),以(+)儿茶素作标准曲线。以不添加香兰素的处理作为空白对照。每个处理重复 3 次,取平均值。1.3.5总酚测定总酚含量测定参照张春江等18的方法,即:取100L 萃取液置于 20mL 刻度试管中,加入 6mL蒸馏水及 2.5mLFolin-Denis 试剂,用力摇匀,保持3min,加入 1mL 饱和碳酸钠溶液,而后补足体积至 10mL,充分混匀,室温下保持 1h,于 725nm 处测吸光值(A725)。取 100L 蒸馏水代替萃取液,按照以上程序处理作为空白对照。以没食子酸作标准曲线。每个处
19、理重复 3 次,取平均值。1.3.6总黄酮测定总黄酮含量测定参照钟冬莲等19的方法,即:取 1mL 样品溶液置于 10mL 的比色管中,加入0.1mol/LAlCl3溶液 2mL,加入 1mol/L 的乙酸钾溶液 3mL,用 70%甲醇溶液定容至刻度,摇匀,室温下放置 30min,于 420nm 波长处用分光光度计比色法测定。每个处理重复 3 次,取平均值。1.3.7鞣花酸测定鞣花酸含量测定参照罗会婷等20的方法,即:准确称取鞣花酸 1mg,用甲醇定容至 10mL,得到0.1mg/mL 相应的标准品母液,分别用甲醇逐级稀释至 0.0500、0.0250、0.0166、0.0125 和 0.01
20、00mg/mL,按 HPLC 条件进行测定:Gemini 色谱柱(250mm4.6mm,5m);采用 A 和 B 双泵系统,流速 1.0mL/min;流动相 A 为体积分数 2%乙酸,流动相 B 为体积分数 100%乙腈;洗脱流程为 5%37%B(040min),37%5%B(4041min),5%B(4150min);柱温 35,检测波长 250nm,进样量 10L。每个处理重复 3 次,取平均值。1.4 数据处理数据采用 Excel2010、IBMSPSSStatistics26及 RStudio 进行处理分析。2结果与分析 2.1 不同无性系含油率差异分析对 50 个薄壳山核桃无性系含油
21、率的差异性进行单因素方差分析中使用多重比较(LSD)检验,结果表明(表 1):JD25、JD13、JD6、JH3、JD23、XS3、JD27、JD28 无性系含油率均值最大,分别为 79.99%、79.30%、79.17%、78.99%、78.81%、78.78%、78.63%和 78.50%。且 JD25 与 JD13、JD6、JH3、JD23、XS3含油率差异显著,JD13、JD6、JH3、JD23、XS3 之间差异不显著。表1不同薄壳山核桃无性系含油率变异分析Tab.1Variationanalysisofoilcontentsindifferentpecancultivars无性系Cl
22、one含油率Oilcontent/%无性系Clone含油率Oilcontent/%JD176.890.44ijklmJD2678.280.19defJD270.770.42vJD2778.630.37bcdeJD373.050.83tJD2878.500.12cdeJD476.750.63jklmJD2974.540.45sJD575.400.31pqrJD3076.630.31klmJD679.170.23bcXS178.240.19defJD775.250.38pqrXS275.490.25pqrJD871.900.50uXS378.780.19bcdJD976.540.66klmnXS4
23、76.280.20mnoJD1077.760.61fghXS575.680.36opqJD1176.500.12lmnXS675.810.46opJD1275.470.06pqrXS777.420.14ghijJD1379.300.11bXS875.420.36pqrJD1476.740.27jklmJH174.960.04rsJD1577.540.10ghiJH278.280.22defJD1677.710.20fghJH378.990.20bcJD1776.970.19ijklmJH477.260.14hijkJD1876.870.54ijklmJH577.060.41hijklJD197
24、0.090.50wJD3177.750.40fghJD2076.740.32jklmXS974.440.48sJD2175.410.33pqrXS1075.930.09nopJD2277.270.23hijkXS1177.180.44hijklJD2378.810.43bcdXS1276.340.82mnoJD2478.000.14efgXS1375.020.54qrsJD2579.990.13aXS1472.210.12u注:不同小写字母表示在P0.05时差异显著。Note:differentlowercaselettersindicatesignificantdifferencesatP亚
25、油酸棕榈酸硬脂酸亚麻酸顺-11-二十碳烯酸花生酸棕榈烯酸。由图 1 可知:50 个薄壳山核桃无性系中单不饱和脂肪酸(棕榈烯酸、油酸、顺-11-二十碳烯酸)质量分数均值为 71.08%,变异系数为 5.55%;多不饱和脂肪酸(亚油酸、亚麻酸)质量分数均值为 20.38%,变异系数为 18.68%。其中 JH1、JD21、XS3、JD27和 XS7 不饱和脂肪酸质量分数高于其他无性系,分别为 92.04%、92.19%、92.15%、92.20%和 92.02%。2.3 不同无性系各性状之间的比较50 个薄壳山核桃无性系的各个性状之间表现出较大的差异性,其中平均不饱和脂肪酸相对含量为91.46%,
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