吴茱萸碱调节cAMP_PKA信号通路在糖尿病大鼠视网膜损伤中的作用.pdf
《吴茱萸碱调节cAMP_PKA信号通路在糖尿病大鼠视网膜损伤中的作用.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《吴茱萸碱调节cAMP_PKA信号通路在糖尿病大鼠视网膜损伤中的作用.pdf(6页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉氉氉氉引文格式:刘磊,刘珊珊,胡菲菲,王洪华,王莹 吴茱萸碱调节 信号通路在糖尿病大鼠视网膜损伤中的作用 眼科新进展,():【实验研究】吴茱萸碱调节 信号通路在糖尿病大鼠视网膜损伤中的作用刘磊刘珊珊胡菲菲王洪华王莹欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉氉氉氉作者简介:刘磊(:),男,年 月出生,山东人,硕士研究生,主治医师。研究方向:内分泌学与代谢性疾
2、病。:通信作者:王莹(:),女,年 月出生,山东人,硕士研究生,主治医师。研究方向:内分泌学与代谢性疾病。:收稿日期:修回日期:本文编辑:付中静基金项目:山东省高等学校科技计划项目(编号:)作者单位:山东省泰安市,山东第一医科大学第二附属医院(刘磊,胡 菲 菲,王 洪 华,王 莹);山东省泰安市,泰安市中心医院(刘珊珊)【摘要】目的探讨吴茱萸碱()调节环磷酸腺苷()蛋白激酶 ()信号通路在糖尿病大鼠视网膜损伤中的作用。方法将 只(眼)大鼠分为对照组(组)、模型组(组)、低剂量组(组)、中剂量组(组)、高剂量组(组)、羟苯磺酸钙()组、组、组,每组 只。除 组以腹腔注射生理盐水代替链脲佐菌素外,
3、其他组大鼠均构建糖尿病视网膜病变模型。建模成功后,分别进行相应给药处理,每天给药一次,持续 周。利用血糖仪检测各组大鼠血糖;染色检测各组大鼠视网膜组织病理变化;染色检测各组大鼠视网膜组织中神经节细胞凋亡;检测各组大鼠视网膜组织中超氧化物歧化酶()、丙二醛()、肿瘤坏死因子 ()、白细胞介素()、水平;检测各组大鼠视网膜组织中 相关 蛋白()、磷酸化的 ()蛋白表达。结果与 组比较,组大鼠视网膜组织病理损伤严重,血糖、视网膜神经节细胞凋亡率、水平、水平、水平、蛋白、蛋白表达均升高,水平、水平、蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(均为 );与 组比较,组、组、组、组大鼠视网膜组织病理损伤减轻,血糖
4、、视网膜神经节细胞凋亡率、水平、水平、水平、蛋白、蛋白表达均降低,水平、水平、蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(均为 );与 组比较,组大鼠视网膜组织病理损伤严重,血糖、视网膜神经节细胞凋亡率、水平、水平、水平、蛋白、蛋白表达均升高,水平、水平、蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(均为 );与 组比较,组大鼠视网膜组织病理损伤加剧,血糖、视网膜神经节细胞凋亡率、水平、水平、水平、蛋白、蛋白表达均升高,水平、水平、蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(均为 )。结论 可能通过激活 信号通路改善糖尿病大鼠视网膜损伤。【关键词】吴茱萸碱;环磷酸腺苷 蛋白激酶 信号通路;糖尿病视网膜病变;炎症;氧化应
5、激【中图分类号】内分泌失调可引起糖尿病,而糖尿病视网膜病变是糖尿病最常见的微血管并发症,据统计,的病程超过 年的糖尿病患者患有糖尿病视网膜病变 。此外,神经节细胞凋亡、炎症和氧化应激是糖尿病视网膜病变的三大主要病理特征 。目前,眼内注射抗血管内皮生长因子、类固醇等治疗视网膜血管功能障碍的药物发展迅速,但一些不良反应仍时有发生 。因此,开发新的改善视网膜损伤的药物对于糖尿病视网膜病变的治疗具有重要意义。吴茱萸碱()是一种从吴茱萸(芸香科)未成熟的干燥果实中提取的生物碱,其可以降低糖尿病大鼠的血糖,改善氧化应激和炎症反应 。但 能否改善糖尿病大鼠视网膜损伤尚未完全明确。相关研究显示,激活环磷酸腺苷
6、()蛋白激酶()信号通路改善了高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞炎症反应和凋亡损伤 ;且 可调控异丙肾上腺素损伤的 细胞中 、表达 。然而 能否调控 信号通路改善糖尿病大鼠视网膜损伤尚未完全明确。因此,本研究主要探究 对糖尿病大鼠视网膜病变的改善作用以及其作用机制。材料与方法 材料 实验动物 只(眼)周龄的雄性 大鼠,体重为 ,购自导科医药技术(广东)有限公司 生产许可证号:(粤)。所有动物实验均经本院动物保护与使用委员会批准进行,符合实验动物使用条例,获山东第一医科大学第二附属医院伦理委员会审批(批号:)。主要试剂 (规格:)购自滁州仕诺达生物科技有限公司;链脲佐菌素购自上海宝曼生物科技有限公司
7、;羟苯磺酸钙()购自上海源叶生物科技有限公司;抑制剂 购自上海西格生物科技有 :眼 科新进展 年 月第 卷第 期 限公司;大鼠超氧化物歧化酶()、丙二醛()试剂盒均购自深圳海思安生物技术有限公司;大鼠肿瘤坏死因子()、白细胞介素()、试剂盒均购自上海富雨生物科技有限公司;细胞凋亡检测试剂盒购自北京伊塔生物科技有限 公 司;兔 源 一 抗 相 关 蛋 白()、磷酸化的 ()、及辣根过氧化物酶()标记的羊抗兔二抗均购自英国 公司。方法 糖尿病视网膜病变大鼠模型的构建将大鼠按照 的剂量腹腔注射链脲佐菌素,后若尾静脉血糖 则认为糖尿病大鼠模型构建成功 ;继续喂养 周后,处死大鼠,收集大鼠视网膜组织,根
8、据视网膜病理变化判断糖尿病视网膜病变大鼠模型是否构建成功 。实验分组按照随机数字表法将 只 大鼠随机分为对照组(组)只(眼)、糖尿病视网膜病变组 只(眼)。组除以腹腔注射生理盐水代替链脲佐菌素外,其他操作同造模过程,糖尿病视网膜病变组大鼠按照 所述方法构建糖尿病视网膜病变大鼠模型后,若大鼠的视网膜病理变化符合糖尿病视网膜病变的特点则为模型构建成功,经鉴定,糖尿病视网膜病变大鼠模型构建成功率为 。将 只糖尿病视网膜病变组大鼠按照随机数字表法随机分为模型组(组)、低剂量组(组)、中剂量组(组)、高剂量组(组)、组、组、组,每组 只。组、组、组大鼠分别灌胃 、,且均同时行腹腔注射等体积的生理盐水;组
9、大鼠灌胃 ,且还同时行腹腔注射等体积的生理盐水;组 大 鼠 腹 腔 注 射 ,且还同时灌胃等体积的生理盐水;组大鼠灌胃 ,且还同时行腹腔注射 ;组、组大鼠灌胃等体积的生理盐水,且还同时行腹腔注射等体积的生理盐水。每天给药一次,持续 周。标本收集末次处理 后,收集每组全部大鼠(只)的尾静脉血用于血糖的检测;尾静脉血收集后,处死大鼠,收集大鼠的视网膜组织,分为两部分,每部分包含 只大鼠的视网膜组织(双眼),一部分(只 眼)固定于 多聚甲醛溶液中用于 和 染色,另一部分(只 眼)储存在 中用于 、及氧化应激指标的检测。染色检测各组大鼠视网膜组织病理变化取出固定在 多聚甲醛溶液中的每组 只大鼠双眼的视
10、网膜组织,将固定的组织包埋在石蜡中,然后切片。染色后,显微镜下观察切片,分析各组大鼠视网膜组织病理损伤情况。染色检测各组大鼠视网膜组织中神经节细胞凋亡取 中的视网膜组织切片,用二甲苯脱蜡,并用梯度乙醇水化,用磷酸盐缓冲溶液洗 次后,将组织切片置于蛋白酶 溶液中,并在室温下孵育 。切片用无菌水洗涤次,加入末端脱氧核苷酸转移酶标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸反应液,孵育过夜。加入约 封闭溶液并在 的潮湿箱中孵育 。磷酸盐缓冲溶液洗 次后加入 ,甘油缓冲液封片。使用荧光显微镜观察大鼠视网膜组织中视网膜神经节细胞凋亡情况。检测各组大鼠视网膜组织中 、水平严格按照试剂盒说明书步骤检测每组另外 只大鼠双眼视网膜
11、组织中 、水平。、水平通过双抗体夹心法测定。检测各组大鼠视网膜组织中 、蛋白表达取 中的视网膜组织,使用 裂解缓冲液提取每组另外 只大鼠双眼的视网膜组织匀浆总蛋白质。将蛋白质进行定量、电泳分离、转膜、封闭后,加入一抗 ()、()、()、()、()在 孵育过夜,加入 标记山羊抗兔二抗()孵育 ,试剂显影后,使用 软件对目的蛋白条带进行定量分析,以 为内参对照标准化 、蛋白表达,以 为内参对照标准化 蛋白表达。统计学分析使用 统计学软件对数据进行分析,各组大鼠血糖、视网膜神经节细胞凋亡率、水平及 、蛋白表达水平均以均数 标准差表示。单因素方差分析用于分析多组数据间的差异,方差齐时,进一步两两比较采
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 吴茱萸 调节 cAMP_PKA 信号 通路 糖尿病 大鼠 视网膜 损伤 中的 作用
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。