乳头状甲状腺癌患者BRAFV600E基因突变与病情进展及预后的相关性分析.pdf

医药前沿 2024年1月 第14卷第2期 综合医学 119乳头状甲状腺癌患者 BRAF V600E 基因突变与病情进展 及预后的相关性分析周磊磊，冯婉婷，刘 华（南京医科大学附属淮安第一医院肿瘤内科 江苏 淮安 223000）【摘要】目的：分析乳头状甲状腺癌患者 BRAF V600E 基因突变与病情进展及预后的相关性。方法：选取 2017 年10 月2022 年 10 月南京医科大学附属淮安第一医院收治的 50 例行手术治疗乳头状甲状腺癌患者作为研究对象，收集患者性别、年龄、病灶大小、病灶数目、有无淋巴结转移、有无侵犯被膜、组织学亚型、有无桥本甲状腺炎、临床分期、有无 BRAF V600E 基因突变、术后 12 个月是否复发等资料，并根据有无 BRAF V600E 基因突变将患者分为基因突变组（40 例）和非基因突变组（10 例），分析 BRAF V600E 基因突变与病情进展及预后的相关性。结果：基因突变组患者病灶大小、组织学亚型、临床分期与非基因突变组对比，差异无统计学意义（P 0.05）；而病灶数目多个率高于非基因突变组，有淋巴结转移、侵犯被膜、桥本甲状腺炎、术后复发的患者比例高于非基因突变组（P 0.05）。Spearman相关性分析结果显示，BRAF V600E 基因突变与淋巴结转移、术后复发呈正相关性（P 0.05），与病灶数目、有无侵犯膜外、有无桥本甲状腺炎的相关性无统计学意义（P 0.05）。结论：乳头状甲状腺癌患者 BRAF V600E 基因突变与淋巴结转移及术后复发呈正相关，BRAF V600E 基因突变可作为乳头状甲状腺癌手术方案制定及预后情况的重要预测指标。【关键词】乳头状甲状腺癌；BRAF V600E 基因突变；淋巴结转移；术后复发；相关性【中图分类号】R736.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2024）02-0119-03甲状腺癌的病理类型有甲状腺滤泡状癌、乳头状甲状腺癌等，但尤以乳头状甲状腺癌发病率最高，约占所有甲状腺癌的 80%以上1。乳头状甲状腺癌的恶性程度虽并不高，可通过手术切除病灶，术后大部分患者可获得良好预后，但仍有部分患者表现出极强的侵袭性，淋巴结转移及术后复发风险较高，甚至会导致患者死亡，不利于患者预后，因此，制定科学合理的乳头状甲状腺癌患者手术方案，并早期准确评估患者预后，予以针对性干预十分重要2。鉴于近年来越来越多的研究发现，BRAF V600E 基因突变可能与乳头状甲状腺癌的发生、发展及预后有关，能够成为乳头状甲状腺癌患者病情发展及预后评估的重要指标，但相关研究尚处于探索阶段3-4，为对其进行深入探讨，本研究分析乳头状甲状腺癌患者 BRAF V600E 基因突变与病情进展及预后的相关性，现报道如下。1 资料与方法1.1 一般资料选取 2017 年 10 月2022 年 10 月南京医科大学附属淮安第一医院收治的 50 例行手术治疗的乳头状甲状腺癌患者作为研究对象，其中男性 9 例、女性 41 例，年龄23 64 岁，平均年龄（45.839.17）岁。本研究符合赫尔辛基宣言相关要求。纳入标准：（1）符合甲状腺微小乳头状癌诊断与治疗中国专家共识（2016 版）5中乳头状甲状腺癌的诊断标准；（2）初次行甲状腺癌手术治疗；（3）术后接受 BRAF V600E 基因突变检测；（4）对本研究知情同意。排除标准：（1）合并其他恶性肿瘤；（2）入组前即存在远处转移；（3）存在手术禁忌证。1.2 方法收集患者性别、年龄、病灶大小、病灶数目、有无淋巴结转移、有无侵犯被膜、组织学亚型、有无桥本甲状腺炎、临床分期、有无 BRAF V600E 基因突变、术后12 个月是否复发等资料，并根据有无 BRAF V600E 基因突变将患者分为基因突变组和非基因突变组。BRAF V600E 基因突变检测：取术中切取的病变组织，石蜡包埋后切片制作 8 m 厚切片 5 张，按标准操作流程处理后提取 DNA，采用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）进 行 BRAF 基 因 检 测，稀 释DNA 原液至浓度为 5 mg/L 后，加入 8 联管中（每管13.5 L），并加入 1.5 L 的 Taq DNA 聚合酶，采用荧光定量 PCR 检测仪（江苏迅睿生物技术有限公司，MA-1620Q 型）按照试剂盒说明书进行 PCR 扩增（95 环境下预变性 10 min、95 退火处理 15 s、60 环境下延伸处理60 s，共40个循环），获得相应Ct值。扩增成功标准：阴性对照内控、外控信号未升高、待测样本内控信号升高、阳性质控内控信号升高且外控信号 Ct 20。BRAF V600E 基因突变判定：待测样本 Ct 28 为阳性，反之则为阴性。1.3 统计学方法使用 SPSS 23.0 统计软件进行统计分析，符合正态分布的计量资料以（x s）表示；计数资料以频数和百分比（%）表示，行2检验；BRAF V600E 基因突变与120 医药前沿 2024年1月 第14卷第2期 综合医学病情进展及预后的相关性采用 Spearman 相关性分析；以P 0.05 为差异具有统计学意义。2 结果2.1 50 例乳头状甲状腺癌患者 BRAF V600E 基因突变情况及分组50 例乳头状甲状腺癌患者，40 例发生 BRAF V600E基因突变，设为基因突变组；10 例无 BRAF V600E 基因突变，设为非基因突变组。基因突变组与非基因突变组性别、年龄比较，差异无统计学意义（P0.05），见表1。2.2 两组患者病变情况及预后比较基因突变组病灶大小、组织学亚型、临床分期与非基因突变组比较，差异无统计学意义（P 0.05）；而基因突变组病灶数目多个率高于非基因突变组，有淋巴结转移、侵犯被膜、桥本甲状腺炎、术后复发的患者比例高于非基因突变组，差异有统计学意义（P 0.05），见表 2。表 1 两组患者一般资料比较 n（%）组别例数性别年龄男女 45 岁 45 岁基因突变组407（17.5）33（82.5）21（52.5）17（42.5）非基因突变组102（20.0）8（80.0）7（70.0）3（30.0）20.0340.994P0.8540.319表 2 两组患者病变情况及预后比较 n（%）组别例数病灶大小病灶数目淋巴结转移侵犯被膜 1 cm 1 cm单个多个有无有无基因突变组407（17.5）33（82.5）22（55.0）18（45.0）17（42.5）23（57.5）13（32.5）27（67.5）非基因突变组101（10.0）9（90.0）9（90.0）1（10.0）0（0.0）10（100.0）0（0.00）10（100.0）20.3354.1606.4394.392P0.5630.0410.0110.036组别例数组织学亚型桥本甲状腺炎临床分期术后复发滤泡型经典型有无期期及以上是否基因突变组405（12.5）35（87.5）20（50.0）20（50.0）38（80.85）2（66.67）12（30.0）28（70.0）非基因突变组101（10.0）9（90.0）1（10.0）9（90.0）9（90.0）1（10.0）0（0.00）10（100.0）20.0475.2550.1333.947P0.8280.0220.7150.0472.3 BRAF V600E 基因突变与病情进展及预后的相关性分析Spearman 相关性分析结果显示，BRAF V600E 基因突变与淋巴结转移、术后复发呈正相关性（P 0.05），与病灶数目、有无侵犯膜外、有无桥本甲状腺炎的相关性无统计学意义（P 0.05），见表 3。表 3 BRAF V600E 基因突变与病情进展及预后的 Spearman 相关性分析因素rP病灶数目0.2160.139淋巴结转移0.431 0.001侵犯被膜0.2870.064桥本甲状腺炎0.2340.085术后复发0.483 0.0013 讨论乳头状甲状腺癌是以甲状腺内肿块为主要表现的甲状腺恶性肿瘤，具有生长缓慢、恶性程度低等特点。虽然大部分乳头状甲状腺癌患者的预后较好，可通过手术切除，但近年来乳头状甲状腺癌的发病率日益升高，且有少部分患者预后不良，手术切除后复发风险较高，严重威胁人们的身体健康。目前，为早期及时准确评估乳头状甲状腺癌患者淋巴结转移及术后复发风险，指导临床治疗方案的制定，以改善患者预后，针对乳头状甲状腺癌的研究逐渐成为临床医生关注的热点。有学者发现，部分乳头状甲状腺癌的生物学特点表现为多中心、多灶性生长，淋巴结转移风险较大，即肿瘤组织中的部分分子机制可能与肿瘤侵袭性及复发转移风险密切相关6。近年来，BRAF V600E 基因突变在临床上被越来越多的研究学者所关注，BRAF 是 RAF 基因家族成员之一，已被证实是一种位于 7p34 的原癌基因7。随着基因研究的不断深入，甲状腺癌组织中 BRAF 基因突变多发已成共识，且突变位点多见于 7p34 原癌基因 15 外显子 1799位点，其中第 600 位的缬氨酸基因突变为谷氨酸，可导致 MAPK 信号通路异常8。既往研究显示，甲状腺良性疾病患者无 BRAF V600E 基因突变情况，而乳头状甲状腺癌 BRAF V600E 基因突变率在不同国家的研究中各医药前沿 2024年1月 第14卷第2期 综合医学 121不相同，突变率范围在 29%90%，因此，BRAF V600E基因突变在甲状腺癌的预测中敏感性及特异性较高9。本研究结果显示，50 例乳头状甲状腺癌患者，40 例有BRAF V600E 基因突变，突变率高达 80%。且通过分析BRAF V600E 基因突变者与非基因突变者的病变进展及预后发现，基因突变组患者病灶数目多个率高于非基因突变组，有淋巴结转移、侵犯被膜、桥本甲状腺炎、术后复发的患者比例高于非基因突变组；Spearman 相关性分析结果显示，BRAF V600E基因突变与有淋巴结转移、术后复发呈正相关性，与张莹等10研究显示的 BRAF V600E 基因突变是甲状腺癌预后差的危险因素，检测BRAF V600E 基因突变情况有助于早期预测患者淋巴结转移、术后复发情况的结果相似。BRAF V600E 基因突变能通过作用于多种途径影响肿瘤细胞的增生，如通过过度激活 MAPK 信号通路，或改变细胞膜整合素受体、细胞外基质蛋白骨桥蛋白表达水平等，增加肿瘤侵袭性，诱导肿瘤的多发、对周围组织的侵袭与淋巴结转移及术后的复发11-12。由此可见，进行乳头状甲状腺癌手术过程中，应严格对转移的淋巴结进行彻底清扫，以避免肿瘤复发。另外，桥本甲状腺炎是一种慢性炎症性疾病，本研究结果表明其能够影响 BRAF V600E 基因突变情况，进而影响乳头状甲状腺癌的淋巴结转移、肿瘤侵袭性及术后复发情况，故为降低 BRAF V600E 基因突变对乳头状甲状腺癌患者病情发展及预后的影响，应积极治疗桥本甲状腺炎。综上所述，乳头状甲状腺癌患者 BRAF V600E 基因突变与淋巴结转移及术后复发呈正相关，BRAF V600E基因突变可作为乳头状甲状腺癌手术方案制定及预后情况的重要预测指标。但本研究观察时间短、样本量少，结果可能存在一定程度偏倚，仍需大样本前瞻性研究进一步研究探讨。【参考文献】1 程红，王笛甲状腺乳头状癌组织的 CCND1、LGALS3 表达及与淋巴结转移的关系 J临床肿瘤学杂志，2023,28(8):707-712.2 吴达熙，黄禾菁，周群群，等超声弹性成像联合血清 TSH、TK1、LMTK3 对甲状腺乳头状癌的诊断价值及与肿瘤侵袭和增殖的关系研究 J现代生物医学进展，2023,23(14):2655-2659,2608.3 车勇军，连蕾，侯钰，等桥本氏甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌患者的临床病理特征及其与 BRAF 基因突变的相关性研究 J中国耳鼻咽喉头颈外科，2023,30(2):69-73.4 周斌，黑虎，李艳青，等BRAF V600E 突变与甲状腺乳头状癌侵袭性生物学行为的相关性 J中华医学杂志，2023,103(14):1060-1063.5 高明，葛明华，嵇庆海，等甲状腺微小乳头状癌诊断与治疗中国专家共识（2016 版）J中国肿瘤临床，2016,43(10):405-411.6 王晶，刘龙腾，崔娣，等BRAF V600E 突变与甲状腺乳头状癌发生及预后相关因素分析 J中华病理学杂志，2019,48(4):288-292.7 姬巍，董健，昌红，等甲状腺乳头状癌患者临床病理特征和BRAF V600E 基因突变对其颈部淋巴结转移的影响 J吉林大学学报（医学版），2022,48(4):995-1002.8 李林平，柴芳，王俊，等BRAFV600E 基因突变与甲状腺乳头状癌的临床病理关系 J中国老年学杂志，2020,40(11):2304-2306.9 胡斌，冯江龙，沈丹丹，等BRAFV600E 基因突变与甲状腺乳头状癌临床病理特征的相关性 J贵州医科大学学报，2020,45(8):928-932.10 张莹，刘姝颖，王哲甲状腺乳头状微小癌 BRAFV600E 基因突变及其与临床病理特征的关系 J诊断病理学杂志，2022,29(11):1028-1031.11 张富全，王兴越，高英堂，等BRAF 基因 V600E 突变与甲状腺乳头状癌关系的研究进展 J山东医药，2019,59(34):87-92.12 李鸿涛，罗琳，马斌林192 例甲状腺乳头状癌中 BRAFV600E基因突变与临床病理因素的关系 J新疆医科大学学报，2018,41(2):221-224.