窖泥功能菌液中4种有机酸的检测方法.pdf

窖泥功能菌液中4种有机酸的检测方法王加彬，张智洋，王耀，任国军，王慧，严伟，淦吉林(内蒙古河套酒业集团股份有限公司，内蒙古巴彦淖尔015400)摘要:研究窖泥功能菌液中的有机酸的含量、组成比例，对于窖泥功能菌液的接种培养很重要。利用气相色谱法检测窖泥功能菌液中的有机酸,将样品经甲酸酸化、50%vol 乙醇溶液定容 0.22 m，尼龙滤膜过滤后直接上机检测，此方法样品前处理简单，结果准确度和精密度高，适用于监控窖泥功能菌液的接种培养。关键词：窖泥功能菌液；有机酸；气相色谱法中图分类号：TS262.3；TS207.3文献标识码：BDetection Method Four Organic AcidS in Pit Mud Functional BacterialLiquidWANG Jiabin,ZHANG Zhiyang,WANG Yao,REN Guojun,WANG Hui,YAN Wei,GAN Jilin(Inner Mongolia hetao liquor Co.,Ltd.,Bayinnaoer 015400,Inner Mongolia,China)Abstract:The content and proportion of organic acids in pit mud functional bacterial liquid is very important for inoculation and culture of pitmud functional bacterial liquid.The detection method of organic acids in pit mud functional bacterial liquid is a gas chromatography.Thesample was extracted by 50%vol ethanol,and then extract liquid was filtered with 0.22 m nylon microfiltration membrane and directlyiniected into the GC.Pretreatment of determination is simple and convenient,and precision and accuracy is satisfied,which is suitable tomonitoring of inoculation and culture of pit mud functional bacterial liquid.Key words:pit mud functional bacterial liquid,organic acids,Gas chromatography1前言窖泥是浓香型白酒的关键性因素之一，其己酸乙酯就是由窖泥中梭状芽孢杆菌等微生物的代谢产生的。窖泥功能菌液是将窖泥中的功能菌进行培养，产生己酸、丁酸等多种香味物质及前体物质，同时也可将窖泥中进行有效的养护1。通过检测窖泥功能菌液中有机酸的监控，可以筛选窖泥功能菌液中的功能菌、判断培养过程的速度与窖泥功能菌液的品质。所以准确测定窖泥功能菌液中的有机酸的含量是非常重要的。气相色谱法是现阶段白酒企业常用的微量分析方法，其特点受外界影响较小，分离性能高、分析速度快、灵敏度高。相比较于硫酸铜显色法、比色法、纸上层析法等2，气相色谱法能更快速准确的检测窖泥功能菌液中有机酸。本实验研究的检测方法，样品经 50%vol 乙醇溶液稀释3，甲酸酸化4，0.22 m 尼龙滤膜过滤后上机检测，方法简便适用、精确度高、重复性好。2实验部分2.1材料、试剂及仪器标准品的配制:分别准确称取色谱级乙酸、丙酸、丁酸、己酸,以体积浓度 50%vol 乙醇溶液配制成100 mL 浓度为 2 g/L 的混合标准储备液放置于4冰箱中冷藏;50%vol 乙醇溶液；甲酸（色谱纯）。仪器设备:岛津 GC-2014 气相色谱，FID 检测器。2.2实验方法2.2.1气相色谱条件色谱柱:定制专用测酸色谱柱 10%FFAP+1%H3PO4Chromosorb W-AW-DMCS 80100 目,2 m收稿日期：2022-12-12作者简介：王加彬（1978-），男，四川泸州人，酿酒高级技师、酿酒工程师，内蒙古河套酒业集团股份有限公司酿酒生产总监兼酿酒部部长，毕业于中国地质大学工商管理专业，现主要从事的技术工作：酿酒与发酵。第 50 卷 第 6 期2 0 2 3 年 11 月酿酒LIQUORMAKINGVol.50.6Nov.，2023文章编号:1002-8110（2023）06-0116-03116王加彬，等：窖泥功能菌液中 4 种有机酸的检测方法第六期20233 mm2 mm 不锈钢填充柱;进样口温度:190;检测器温度:190;柱流速:恒流 30.0 mL/min;进样量:1 L;柱温程序升温:130(保持 10 min)，以20/min 升温至 170(保持 10 min),再以 20/min升温至 180(保持 5 min)。2.2.2样品前处理吸取窖泥功能菌液 1 mL,加入甲酸 100 L 混匀后，用 50%vol 乙醇溶液定容 10 mL,用 0.22 m的膜过滤后作为待测样品。3结果与分析3.1标样和样品的检测取 2 g/L 的己酸标准溶液，用二氯甲烷稀释至2000 mg/L,进行定性检测。标准品和样品的气相色谱图见图 1，乙酸的出峰时间为 4.559 min 左右；丙酸的出峰时间为 6.652 min 左右；丁酸的出峰时间为 9.986 min 左右；己酸的出峰时间为 16.352 min左右。3.2标准曲线及线性范围取 2 g/L 的己酸标准溶液,用二氯甲烷稀释至100 mg/L、200 mg/L、500 mg/L、1000 mg/L、2000 mg/L共 5 个浓度梯度,作为定量分析校正。以峰面积 Y为纵坐标,以质量浓度(mg/L)为 X 横坐标进行线性回归。结果表明（图 2）化合物线性关系良好。乙酸，回归方程为 Y=27.5814X+1.6627,R 值为0.9999,满足分析要求。根据 3 倍信噪比计算出化合物的检测限为 10 mg/L。丙酸，回归方程为 Y=43.2660X-2.6874,R 值为0.9999,满足分析要求。根据 3 倍信噪比计算出化合物的检测限为 10 mg/L。丁酸，回归方程为 Y=47.9530X-1.9954,R 值为0.9997,满足分析要求。根据 3 倍信噪比计算出化合物的检测限为 10 mg/L。己酸，回归方程为 Y=55.0348X-0.8996,R 值为0.9986,满足分析要求。根据 3 倍信噪比计算出化合物的检测限为 10 mg/L。3.3精密度实验用上述实验方法对同一样品平行测定 6 次，得到发酵液经前处理后的待测样品中 4 中有机酸含量的检测结果的相对偏差(RSD)分别为 1.93%、3.43%、1.80%、3.09%，满足分析方法的要求。结果见表 1。3.4加标回收率实验取发酵液 4 份，其中 1 份作为空白本底值进行前处理，另外 3 份分别加入已知量的标准溶液后进行前处理,处理后的样品进行检测，用上述实验方法进行回收率实验。实验结果表明，化合物的回收率为 98.05%101.88%,满足分析要求。表 2 中数据为处理后样品及加标处理后样品的实测值。图 14 种有机酸的标准样品与样品的色谱图图 24 种有机酸的标准曲线表 1精密度实验结果（n=6）化合物样品测定值 1/mg L-1样品测定值 2/mg L-1样品测定值 3/mg L-1样品测定值 4/mg L-1样品测定值 5/mg L-1样品测定值 6/mg L-1RSD/%乙酸153.02154.32149.33156.99149.56151.661.93丙酸42.4440.3339.6638.5440.8541.613.43丁酸1472.161450.881437.211490.871421.661477.351.80己酸721.45706.33715.85728.89771.26726.513.091174结果与分析本检测方法能快速准确地分析窖泥功能菌液中的有机酸的含量。样品经过 50%vol 乙醇溶液的稀释，可以减少对色谱柱的损害；同时加入 100 L甲酸也可以将绝大部分的有机酸置换，更好的气化提高检测的加标回收率。实验的标准曲线线性值、检测的精密度、加标回收率均可以达到分析方法的要求。整个检测过程需要的时间较短，既可以满足生产试样的时效性，也满足结果的准确性。本法方法可以用于窖泥功能菌液日常检测分析，为窖泥功能菌液的生产和优化工艺提供依据。参考文献1杜礼泉,饶家权,唐聪,等.窖泥功能菌液在窖泥养护中的应用J.酿酒.2019(1):61-64.2罗维,刘永婷，石敏，等.准确测定己酸菌液中己酸含量的方法J.酿酒科技.2003(5):83.3司冠儒,汪家胜,段亮亮,等.窖泥中己酸的检测方法研究J.酿酒.2020(6):51-53.4袁华伟，杨泽刚，兰著玺,等.气相色谱法测定己酸菌发酵液中的己酸等有机酸含量J.酿酒科技.2018(3):102-105.表 2处理后样品与加标后样品实测值化合物乙酸丙酸丁酸己酸本底值/mg L-1263.31263.31263.3158.6158.6158.61761.33761.33761.33411.57411.57411.57加标量/mg L-11005001000100500100010050010001005001000本底值与实测值之差/mg L-196.21498.4963.297.22513.3981.198.66480.55953.195.41494.75996.6回收率/%96.2199.6896.3297.22102.6698.1198.6696.1195.3195.4198.9599.66一种机械化酿酒用曲粉管道输送装置的设计与实现*夏元金，张志勇，徐广波，王法利，郝标，李瑶，潘天全(安徽金种子酒业股份有限公司，安徽阜阳236023)摘要:大曲作为浓香型白酒酿造过程的糖化发酵剂，对浓香型白酒的风格、产量和品质都具有重要的影响。破碎后的大曲转运到酿酒车间供白酒发酵使用，传统条件下的曲粉转运多采用人工、推车或行车等方式实现，以至于影响车间劳动效率和酿酒工艺的执行，还存在粉尘等问题。针对上述问题，分析与探讨了一种机械化酿酒用曲粉管道输送装置设计方案的实现，该装置主要包括进料口、电机、齿轮 1、转轴 1、圆盘式刮板、链条、输送管路、齿轮 2、转轴 2、出料口等部分。该装置通过圆盘式刮板推动大曲粉在管道内输送，从而实现曲粉的混合、运输及下料。实践表明，该大曲粉管道输送装置的结构简单，可以有效解决大曲粉的管道运输问题，同时该输送装置可以有效避免曲粉运输过程中的洒落问题。关键词：曲粉；转运；装置；设计中图分类号：TS262.3；TS261.3文献标识码：B中国白酒的酿造是以高粱、大米等谷物为原料，采用大曲、小曲或麸曲等为糖化发酵剂，经过固态发酵而成的液体饮料1。大曲作为白酒酿造的糖化、发酵、酒化和生香剂，是白酒酿造微生物群的载体，也是香味及前驱物质的重要来源，其对白酒的品质具有十分重要的影响2。在酿酒过程中大曲块要粉碎成大曲粉装袋后再转运到酿酒车间使用，在转运过程中不可避免的发生曲粉散落等问题；同*基金项目：2020 年度阜阳市自筹经费科技计划项目(项目名称：酯化红曲的制备及其固态发酵产业化关键技术与应用，编号：FK2020-81136)；2021 年度安徽省“皖北产业创新团队”支持计划项目(项目名称：自酒风味特征与安全性评价及其应用，编号：FK2021-WB06)收稿日期：2023-02-24作者简介：夏元金（1976-），男，安徽怀宁人，工程师，酿酒技师，研究方向：白酒酿造生产与管理。第 50 卷 第 6 期2 0 2 3 年 11 月酿酒LIQUORMAKINGVol.50.6Nov.，2023文章编号:1002-8110（2023）06-0118-04118