牛大力亚慢性毒性研究.pdf
《牛大力亚慢性毒性研究.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《牛大力亚慢性毒性研究.pdf(7页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、论 著第 37 卷第 7 期医学信息Vol.37 No.72024 年 4 月Journal of Medical InformationApr.2024基金项目:广东省中医药局科研项目(编号:20221060)作者简介:汤莉(1983.10-),女,广东广州人,硕士,主管技师,主要从事食品毒理及动物病理研究牛大力亚慢性毒性研究汤 莉1袁胡帅尔1袁陈美芬1袁张紫虹1袁李文立1袁李冬利2渊1.广东省疾病预防控制中心卫生毒理所袁广东 广州511430曰2.五邑大学生物科技与大健康学院袁广东 江门529000冤摘要院目的通过开展牛大力的亚慢性毒性试验袁为其安全性评价提供试验依据遥方法80只SPF级S
2、D种大鼠渊雌雄各半冤分成4个组袁分别为低尧中尧高3个剂量组0.86尧2.58尧7.73 g/渊kg 窑 bw冤和阴性对照组袁经口灌胃分别给予相应剂量的牛大力袁阴性对照组给予纯净水袁连续灌胃90 d遥实验结束袁大鼠经腹腔麻醉后采血检测血液指标袁采集脏器称重及计算脏/体比袁并进行病理学检查遥结果各剂量组动物生长发育良好袁体重尧摄食量尧食物利用率尧血常规尧凝血尧血生化指标尧脏器重袁以及脏/体比指标与阴性对照组比较袁差异无统计学意义渊 跃0.05冤袁组织病理学观察未见与受试样品有关的病理改变遥结论在本试验条件下袁确定受试样品牛大力对雌尧雄性大鼠的未观察到有害作用剂量渊NOAEL冤均为75.00 g/渊
3、kg 窑 bw冤袁未见亚慢性毒性遥关键词院牛大力曰亚慢性毒性曰安全性评价曰有害作用剂量中图分类号院R29文献标识码院ADOI院10.3969/j.issn.1006-1959.2024.07.011文章编号院1006-1959渊2024冤07-0062-07Study on Subchronic Toxicity of Millettia SpeciosaTANG Li1,HU Shuai-er1,CHEN Mei-fen1,ZHANG Zi-hong1,LI Wen-li1,LI Dong-li2(1.Institute of Toxicology,Guangdong Provincial
4、Center for Disease Control and Prevention,Guangzhou 511430,Guangdong,China;2.School of Biotechnology and Health Sciences,Wuyi University,Jiangmen 529000,Guangdong,China)Abstract:Objective To provide experimental basis for safety evaluation of Millettia speciosa by conducting subchronic toxicity test
5、.Methods A totalof 80 SPF SD rats(sex in half)were divided into low,medium and high dose groups 0.86、2.58、7.73 g/(kg bw)and a negative control group.Rats in the dose groups were orally administered the corresponding doses of millettia speciosa,while rats in the negative control group weregiven purif
6、ied water.The oral gavage lasted for 90 days consecutively.At the end of the experiment,blood samples were collected from ratsanesthetized by intraperitoneal injection for blood indexes analyses.Major organs were harvested and weighed to calculate organ-to-body weightratios.Histopathological examina
7、tions were also performed on organ tissues.ResultsThe growth and development of the animals in each dosegroup were good.There was no significant difference in body weight,food intake,food utilization rate,blood routine,blood clotting,bloodbiochemical index,organ weight,and viscera/body ratio index b
8、etween each dose group and the negative control group(0.05).No pathologicalchanges related to the test samples were observed by histopathological observation.ConclusionUnder the conditions of this experiment,the noobserved adverse effect level(NOAEL)of the test sample Millettia speciosa on female an
9、d male rats is determined to be 75.00 g/(kg bw),andno subchronic toxicity is observed.Key words:Millettia speciosa;Subchronic toxicity;Safety assessment;No observed adverse effect level牛大力是豆科蝶形花亚科崖豆藤属植物美丽崖豆藤(Champ.)的干燥根,又名山莲藕、猪脚笠、九龙串珠、扒山虎、大力薯等,味甘、性平,有补虚润肺,强筋活络之功效1。牛大力在国内外均有分布,国内以广东、广西、海南、福建、湖南、贵州为主,
10、是多年生草本或半灌木,高 1030 cm,根状茎短缩或稍粗,直径 25 mm,是一种药食同源植物,根部可入药,是广东、广西地区常用的补骨健筋类药材,多用于炖汤,配制药膳,药酒等2。近年来,随着对牛大力的深入研究,从中分离鉴定出其所含的多种生物活性成分,包括生物碱、黄酮类、苯丙素类、挥发油、甾醇类以及微量元素如铁、锰、锌、铜、钙、镁3,4。其中,生物碱成分具抗菌作用,黄酮类具抗炎镇痛效果,苯丙素类和挥发油具抗氧化和抑菌活性,甾醇类,具抗肿瘤功效,尤其牛大力苷和牛大力甙两个成分表现出强大的抗肿瘤潜能,可开发为抗肿瘤药物5。既往研究显示,牛大力具有广谱药理窑论著窑62论 著第 37 卷第 7 期医学
11、信息Vol.37 No.72024 年 4 月Journal of Medical InformationApr.2024活性,比如抗菌、抗炎镇痛6、抗氧化7,8、抗肿瘤、抗疲劳9、增强免疫力10,11、护肝12、降尿酸、降血糖等,可用于治疗腰肌劳损、风湿性关节炎、肺结核、慢性支气管炎、慢性肝炎、遗精、白带等症。其中,高丽槐素为特征性成分,也是检验牛大力质量的一个重要标准,并具有抗肿瘤和抗菌药效13。牛大力具有较高的药用价值与营养价值,在中草药中被广泛应用,明确其毒性特征是保障患者的用药安全的关键。但关于牛大力的毒理学研究还非常有限,有关牛大力的毒性实验报道较少。本研究依照食品安全国家标准要求
12、,进行大鼠 90 d 经口毒性试验,以确定亚慢性经口最大无作用剂量(NOAEL)参数和毒性靶器官,旨在为牛大力在食用安全性评价和开发利用提供科学依据。1材料与方法1.1 受试样品 牛大力,样品批号为 202009EP,塑料袋装,黑褐色膏体,由五邑大学提供。牛大力(提取物浓缩液)制备工艺:采集牛大力植物的新鲜根,加入 10 倍量 50%乙醇煮沸回流提取 2 h,过滤得滤液和滤渣,滤渣用相同方法再提取一次,得到的滤渣用10 倍量的水回流提取 2 h,合并 3 次的滤液,浓缩至浸膏。牛大力干品人体推荐每日服用量为 15 g,以成人体重 60 kg 计,每日服用量为 0.25 g/(kg bw),按五
13、邑大学提供的牛大力(提取浓缩液)得率 10.3%折算,则牛大力(提取浓缩液)的人体推荐每日服用量为 0.025 75 g/(kg bw)。1.2 实验动物 SPF 级 SD 种健康大白鼠 80 只,体重:7080 g 由南方医科大学实验动物中心提供,生产许可证号:SCXK(粤)2016-0041,质量合格证编号:NO.44002100026556,所有动物均采用的颗粒饲料为 SPF 级维持鼠料,由广东省医学实验动物中心提供。饲养于广东省疾病预防控制中心屏障环境动物实验室,实验动物使用许可证号:SYXK(粤)2018-0011,室温 2026 益,湿度 40%70%。1.3 仪器与试剂1.3.1
14、 主要仪器 日立 7600-020 自动生化分析仪、东亚 sysmex XT-2000i 全 自 动 血 球 计 数 仪、STACOMPACT MAX 血凝仪、迪瑞 H800 尿液分析仪。ZEISS Axioskop 40 显微镜、MICROM HM355s 切片机、Intelsint RVG-1 脱水机、MICROM AP280 包埋机、SAKURA 染片机。1.3.2 主要试剂 血液学检测、血凝检测试剂均由原仪器生产商供应,血液学生化学指标检测试剂由九强生物科技公司提供,钠、钾、氯检测试剂由日立公司提供。1.4 亚慢性毒性试验 设 3 个剂量组,剂量分别为0.86、2.58、7.73 g/
15、(kg bw)相当于人体推荐每日服用量的 33.3、100、300 倍。80 只 SD 大鼠按照体重随机分成 4个组,分别为低、中、高 3 个剂量组,以及阴性对照组。每组 20 只,雌雄各半,分笼饲养,经口灌胃给予受试物,按 1.0 ml/100 g bw 灌胃,阴性对照组按同等容量灌胃给予纯净水,每天灌胃 1 次,连续 90 d。试验结束后,计算大鼠的体重总增重、总摄食量和总食物利用率,并对其进行血液学和血清生化检查,大体解剖后进行脏器称重,计算脏器指数,最后对高剂量组和阴性对照组动物进行组织病理学检查,发现病变后再对较低剂量组相应器官及组织进行检查。检测脏器包括脑、垂体、甲状腺、胸腺、肺、
16、心脏、肝、脾、肾、肾上腺、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胰、肠系膜淋巴结、卵巢、子宫、睾丸、附睾、前列腺、膀胱。1.5 统计学方法采用 SPSS 13.0 统计软件进行分析。计量资料使用(依)表示,采用检验或方差分析,进行一个或多个实验组与阴性对照组之间均数比较。分类资料采用 Fisher 精确分布检验、2检验、秩和检验;等级资料采用 Ridit 分析、秩和检验等,约0.05 为差异有统计学意义。2结果2.1 动物一般临床状况 各试验组大鼠一般生理体征、行为表现、外观、皮毛、黏膜、分泌物、大小便等均未见异常,试验期间动物无死亡。2.2 试验期间大鼠体重、饲料摄食量和食物利用率的变化 各
17、剂量组大鼠体质量总增重、总摄食量和总食物利用率指标与阴性对照组比较,差异无统计学意义(跃0.05),见表 1。2.3 血常规、凝血指标 雌性高剂量组凝血酶原时间与阴性对照组比较,差异有统计学意义(约0.05),但在本实验室检测正常值范围内,无生物学意义。其余各剂量组各血液学指标与阴性对照组比较,差异无统计学意义(跃0.05),见表 2。63论 著第 37 卷第 7 期医学信息Vol.37 No.72024 年 4 月Journal of Medical InformationApr.2024组别阴性对照组低剂量组中剂量组高剂量组体质量总增重(g)490.20依49.10516.30依71.70
18、493.90依39.80499.90依70.30总摄食量(g)2352.00依190.802448.40依209.302312.30依166.002343.20依161.10总食物利用率(%)21.01依2.9721.24依3.4921.41依1.7921.55依4.16体质量总增重(g)247.00依24.80244.20依42.90224.90依20.50233.80依21.90总摄食量(g)1688.10依139.201714.40依148.001641.80依119.201574.90依108.10总食物利用率(%)14.67依1.4514.25依2.1713.74依1.4514.87
19、依1.33雄性雌性表1牛大力慢性经口染毒大鼠体质量尧摄食量及总食物利用率的变化渊=10袁 依 冤雄性雌性阴性对照组低剂量组中剂量组高剂量组阴性对照组低剂量组中剂量组高剂量组红细胞数(伊1012/L)7.93依0.487.99依0.267.99依0.337.94依0.287.57依0.367.25依0.337.31依0.407.12依0.40血红蛋白浓度(g/L)150.20依10.80149.90依7.10150.10依6.10150.10依7.80145.90依6.50142.10依6.50143.70依6.20140.10依5.20红细胞压积(%)39.00依2.5039.40依2.003
20、9.40依1.4039.70依1.3038.90依1.5038.00依1.3038.40依1.6037.60依1.30白细胞数(伊109/L)8.31依2.159.03依2.889.08依2.409.16依1.723.91依1.175.14依1.584.12依1.763.72依1.54组别表2牛大力90 d经口毒性试验血常规尧凝血指标渊=10袁 依 冤注:与同性别阴性对照组比较,a约0.05。嗜中性粒细胞数(%)19.82依10.6017.40依5.8517.16依3.7120.06依8.8614.41依5.7418.89依10.1716.09依6.4314.20依5.43单核细胞数(%)4.
21、35依1.174.61依1.325.36依1.244.70依1.303.99依0.873.33依0.644.16依1.544.36依1.02嗜酸性粒细胞数(%)1.39依0.601.35依0.441.46依0.531.04依0.530.87依0.420.64依0.421.54依0.441.02依0.78嗜碱性粒细胞数(%)0.19依0.150.18依0.100.24依0.120.23依0.160.25依0.160.14依0.130.07依0.120.14依0.25阴性对照组低剂量组中剂量组高剂量组阴性对照组低剂量组中剂量组高剂量组组别阴性对照组低剂量组中剂量组高剂量组阴性对照组低剂量组中剂量组
22、高剂量组血小板数(伊109/L)804.20依102.00872.00依98.20892.60依80.70911.80依96.20881.70依117.90869.40依125.10860.80依78.60894.50依136.60凝血酶原时间(s)16.00依0.6015.70依0.7015.80依0.5015.60依0.7016.70依0.7016.50依0.5016.10依0.6015.60依0.60a活化部分凝血活酶时间(s)20.20依1.5019.90依1.0019.80依0.7019.80依1.3019.80依0.9019.30依1.2019.20依1.4019.10依0.60组
23、别淋巴细胞数(%)74.25依10.2076.46依6.1975.78依4.1973.97依8.3180.01依6.0876.55依10.9777.93依6.8079.79依6.04雄性雌性雄性雌性2.4 血液生化指标 雌性高剂量组谷氨酰转肽酶与阴性对照组比较,差异有统计学意义(约0.05),其余各剂量组各项生化指标与阴性对照组比较,差异无统计学意义(跃0.05),见表 3。2.5 脏器重量、脏/体比值 各剂量组脏器指标与阴性对照组比较,差异无统计学意义(跃0.05),表明该受试样品 90 d 经口毒性试验脏器重量、脏/体比值指标正常,见表 4、表 5。64论 著第 37 卷第 7 期医学信息
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 大力 慢性 毒性 研究
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。