仪器分析答案省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx
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1、第三章思索题解答第三章思索题解答1.从分离原理、仪器结构及应用范围上简明比较气相色谱及液从分离原理、仪器结构及应用范围上简明比较气相色谱及液相色谱异同点。相色谱异同点。解:二者都是依据样品组分与流动相和固定相相互作用力差解:二者都是依据样品组分与流动相和固定相相互作用力差异进行分离。异进行分离。从仪器结构上看,液相色谱需要增加高压泵以提升流动相流从仪器结构上看,液相色谱需要增加高压泵以提升流动相流动速度,克服阻力。同时液相色谱所采取固定相种类要比气动速度,克服阻力。同时液相色谱所采取固定相种类要比气相色谱丰富多,分离方式也比较多样。气相色谱检测器主要相色谱丰富多,分离方式也比较多样。气相色谱检
2、测器主要采取热导检测器、氢焰检测器和火焰光度检测器等。而液相采取热导检测器、氢焰检测器和火焰光度检测器等。而液相色谱则多使用紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等。色谱则多使用紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等。不过二者均可与不过二者均可与MS等联用。等联用。二者均具分离能力高、灵敏度高、分析速度快,操作方便等二者均具分离能力高、灵敏度高、分析速度快,操作方便等优点,但沸点太高物质或热稳定性差物质难以用气相色谱进优点,但沸点太高物质或热稳定性差物质难以用气相色谱进行分析。而只要试样能够制成溶液,既可用于行分析。而只要试样能够制成溶液,既可用于HPLC分析,而分析,而不受沸点高、热稳定性差、
3、相对分子量大限制。不受沸点高、热稳定性差、相对分子量大限制。第1页2.液相色谱中影响色谱峰展宽原因有哪些液相色谱中影响色谱峰展宽原因有哪些?与气相色谱相比较与气相色谱相比较,有哪些主要不一样之处有哪些主要不一样之处?解解:液相色谱中引发色谱峰扩展主要原因为涡液相色谱中引发色谱峰扩展主要原因为涡流扩散、流动流动相传质、滞留流动相传质以流扩散、流动流动相传质、滞留流动相传质以及柱外效应。及柱外效应。在气相色谱中径向扩散往往比较显著,而液相在气相色谱中径向扩散往往比较显著,而液相色谱中径向扩散影响较弱,往往能够忽略。另色谱中径向扩散影响较弱,往往能够忽略。另外,在液相色谱中还存在比较显著滞留流动相外
4、,在液相色谱中还存在比较显著滞留流动相传质及柱外效应。传质及柱外效应。第2页3.在液相色谱中在液相色谱中,提升柱效路径有哪些提升柱效路径有哪些?其中最有效路径是什么其中最有效路径是什么?解解:液相色谱中提升柱效路径主要有液相色谱中提升柱效路径主要有:1.提升柱内填料装填均匀性提升柱内填料装填均匀性;2.改进固定相改进固定相 减小粒度减小粒度;选择薄壳形担体选择薄壳形担体;选取低粘度流动相选取低粘度流动相;适当提升柱温适当提升柱温其中其中,减小粒度是最有效路径减小粒度是最有效路径.第3页4.液相色谱有几个类型液相色谱有几个类型?它们保留机理是什么它们保留机理是什么?在这些类型应在这些类型应用中用
5、中,最适宜分离物质是什么最适宜分离物质是什么?解解:液相色谱有以下几个类型液相色谱有以下几个类型:液液-液分配色谱液分配色谱;液液-固吸附色固吸附色谱谱;化学键合色谱化学键合色谱;离子交换色谱离子交换色谱;离子对色谱离子对色谱;空间排阻色空间排阻色谱等谱等.液液-固吸附色谱是经过组分在两相间屡次吸附与解吸平衡实现固吸附色谱是经过组分在两相间屡次吸附与解吸平衡实现分离分离.最适宜分离物质为中等相对分子质量油溶性试样,凡是最适宜分离物质为中等相对分子质量油溶性试样,凡是能够用薄层色谱分离物质均可用此法分离。能够用薄层色谱分离物质均可用此法分离。其中其中;液液-液分配色谱保留机理是经过组分在固定相和
6、流动相间液分配色谱保留机理是经过组分在固定相和流动相间屡次分配进行分离。能够分离各种无机、有机化合物。屡次分配进行分离。能够分离各种无机、有机化合物。第4页化学键合色谱中因为键合基团不能全部覆盖含有吸附能力化学键合色谱中因为键合基团不能全部覆盖含有吸附能力载体载体,所以同时遵照吸附和分配机理所以同时遵照吸附和分配机理,最适宜分离物质为与最适宜分离物质为与液液-液色谱相同。液色谱相同。离子交换色谱和离子色谱是经过组分与固定相间亲协力离子交换色谱和离子色谱是经过组分与固定相间亲协力差异而实现分离差异而实现分离.各种离子及在溶液中能够离解物质均可各种离子及在溶液中能够离解物质均可实现分离,包含无机化
7、合物、有机物及生物分子,如氨实现分离,包含无机化合物、有机物及生物分子,如氨基酸、核酸及蛋白质等。基酸、核酸及蛋白质等。第5页在离子对色谱色谱中在离子对色谱色谱中,样品组分进入色谱柱后样品组分进入色谱柱后,组分离子与组分离子与对离子相互作用生成中性化合物对离子相互作用生成中性化合物,从而被固定相分配或吸附从而被固定相分配或吸附进而实现分离进而实现分离.各种有机酸碱尤其是核酸、核苷、生物碱等各种有机酸碱尤其是核酸、核苷、生物碱等分离是离子对色谱特点。分离是离子对色谱特点。空间排阻色谱是利用凝胶固定相孔径与被分离组分分子间相空间排阻色谱是利用凝胶固定相孔径与被分离组分分子间相对大小关系对大小关系,
8、而分离、分析方法。最适宜分离物质是:另外而分离、分析方法。最适宜分离物质是:另外还有手性色谱、胶束色谱、环糊精色谱及亲合色谱等机理。还有手性色谱、胶束色谱、环糊精色谱及亲合色谱等机理。第6页5.在液在液-液分配色谱中,为何可分为正相色谱及反相色谱?液分配色谱中,为何可分为正相色谱及反相色谱?解:采取正相及反相色谱是为了降低固定液在流动解:采取正相及反相色谱是为了降低固定液在流动相中溶解度从而防止固定液流失。相中溶解度从而防止固定液流失。第7页6.何谓化学键合固定相何谓化学键合固定相?它有什么突出优点它有什么突出优点?解解:利用化学反应将固定液官能团键合在载体表面形成固定相利用化学反应将固定液官
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