精液不液化患者精子DNA碎片与精液常规参数的相关性分析.pdf

医药前沿 2024年1月 第14卷第1期 综合医学 109精液不液化患者精子 DNA 碎片与精液常规 参数的相关性分析姚宏瑾（徐州市妇幼保健院检验科 江苏 徐州 221000）【摘要】目的：分析精液不液化患者精子 DNA 碎片（DFI）与精液常规参数的相关性。方法：采用便利抽样法，选取 2022 年 112 月徐州市妇幼保健院收治的 114 例精液不液化患者作为研究对象。采用精子染色质扩散实验（sperm chromatin dispersion,SCD）检测 DFI 值。比较不同年龄患者的精子 DFI 率，比较不同精子 DFI 率患者的精子浓度、精子前向运动率、正常形态精子率。采用 Pearson 相关分析 DFI 率与精液常规参数的相关性。结果：40 岁患者的 DFI 10%比例低于 30 岁、30 40 岁的患者，差异有统计学意义（P 0.05）；40 岁患者的 DFI 10%20%比例、DFI 20%比例高于 30 岁、30 40 岁的患者，差异有统计学意义（P 0.05）；30 40 岁患者的 DFI 10%比例低于 30 岁的患者，DFI 10%20%比例高于 30 岁，差异有统计学意义（P 0.05）。不同精子 DFI 患者的精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率比较，差异有统计学意义（P0.001）；DFI10%患者的精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率高于DFI 10%20%、DFI20%患者，差异有统计学意义（P0.05）；DFI 10%20%患者的精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率高于 DFI 20%患者，差异有统计学意义（P 0.05）。相关性分析显示，精液不液化患者的 DFI 值与精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率呈负相关性（r=0.662、0.528、0.643；P 0.001），与年龄呈正相关性（r=0.509，P 0.001）。结论：精液不液化患者的 DFI 与年龄存在正相关性，与精液常规参数存在负相关性，DFI 可作为评估精液不液化患者精液质量及生育能力的重要指标。【关键词】精液不液化；精子 DNA 碎片；精液常规参数；相关性分析【中图分类号】R322.6【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2024）01-0109-03精液不液化是指精液射出 60 min 不液化的现象，是引起男性不育症的主要原因之一，42.65%的男性不育症是由精液不液化引起，该病的发病机制及病因尚未完全明确，可能与缺乏微量元素、生殖系统感染等因素相关，其临床表现为精液黏稠、精液量少、阴部疼痛等，治愈难度较大，临床常采用药物治疗控制病情，但预后效果一般1-2。流行病学研究表明，随着环境不断恶化、人们生活习惯改变及社会压力不断增大等因素，精液不液化的发病率呈现逐年升高趋势，严重影响男性的生育功能3。目前，精液不液化的诊断手段包括体格检查、男性专科检查等，常规精液分析是临床评估精液质量的常用指标，但无法全面评估男性生育功能，同时其在辅助生殖领域筛选优质精子方面的应用效果不佳，无法满足临床要求，导致其应用受限4-5。鉴于此，本研究检测精液不液化患者的精子 DNA 碎片（DNA fragmentation index,DFI），并分析 DFI 与精液常规参数的相关性，现报道如下。1 资料与方法1.1 一般资料采用便利抽样法，选取 2022 年 112 月徐州市妇幼保健院收治的 114 例精液不液化患者作为研究对象。所有患者均自愿参与本研究并签署知情同意书，本研究符合赫尔辛基宣言要求。纳入标准：（1）均经临床表现、实验室指标检查证实，符合精液不液化的诊断标准；（2）年龄 22 岁；（3）男性生殖系统检查无异常；（4）无遗传性疾病病史；（5）夫妻正常性生活 1 年，未采取避孕措施；（6）女方无生育能力异常；（7）临床资料完整有效。排除标准：（1）存在性功能障碍；（2）诊断为无精子症；（3）生殖系统体格检查异常；（4）其他原因致不孕；（5）临床资料不完整。1.2 方法患者禁欲 2 7 d，指导患者通过手淫法采集新鲜精液，置于广口取精杯中，在 35 保温箱中液化，分为两份标本。取其中一份液化的精液标本，按照WHO人类精液检查与处理实验室手册（第 5 版）6，采用计算机辅助精液全自动分析系统（computer-aided semen analysis system,CASA），检测患者的精液常规参数，包括精子浓度、精子前向运动率、正常形态精子率。采用精子染色质扩散实验（sperm chromatin dispersion,SCD）检 测 DFI 值，DFI=存 在 DNA 碎 片 的 精 子 个数/总精子数 100%，试剂盒购自浙江博真生物科技有限公司，严格按照试剂盒说明书进行检测。110 医药前沿 2024年1月 第14卷第1期 综合医学1.3 统计学方法采用 SPSS 26.0 软件对数据进行统计分析。正态分布的计量资料采用均数 标准差（x s）表示，两组间比较采用 LSD-t 检验，组内比较采用单样本 t 检验；计数资料采用例数、构成比（%）表示，组间比较采用2检验。采用 Pearson 相关分析精液不液化患者 DFI 指数与精液常规参数的相关性。双侧检验，P 0.05 为差异有统计学意义。2 结果2.1 114 例患者的一般资料114 例患者平均年龄（32.824.59）岁，年龄 22 47 岁，其中 30 岁患者 38 例（33.33%），30 40 岁患者 52 例（45.61%），40 岁患者 24 例（21.06%）；不孕时长（6.191.72）年，最短 1 年，最长 16 年；精子浓度（38.729.43）106/mL；正常形态精子率（8.092.77）%；精子前向运动率（33.255.89）%；精子 DFI 率（14.563.41）%，其中 DFI 10%患者 69 例（60.53%），DFI 10%20%患者 32 例（28.07%），DFI 20%患者 13 例（11.40%）。2.2 不同年龄患者的精子 DFI 比较 40 岁患者 DFI 10%比例低于 30 岁、30 40 岁的患者，DFI 10%20%比例、DFI 20%比例高于30岁、3040岁患者，差异有统计学意义（P0.05）；30 40 岁患者的 DFI 10%比例低于 30 岁，DFI 10%20%比例高于30岁，差异有统计学意义（P0.05），见表 1。表 1 不同年龄精液不液化患者的精子 DFI 比较年龄例数DFI 10%DFI 10%20%DFI 20%例数构成 比/%例数构成 比/%例数构成 比/%30 岁383592.1137.890030 40 岁523261.541426.92611.54 40 岁2428.331562.5729.1724.1995.1894.192P0.0410.0230.041219.56821.2884.508P 0.001 0.0010.03428.7698.80812.494P0.0030.003 0.001注：30 岁与 30 40 岁比较；30 岁与 40 岁比较；30 40 岁与 40 岁比较。2.3 不同精子 DFI 患者的精液常规参数比较不同精子 DFI 患者的精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率比较，差异有统计学意义（F=61.700、84.985、88.319；P0.001）；DFI10%患者的精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率高于 DFI 10%20%、DFI 20%患者，差异有统计学意义（P 0.05）；DFI 10%20%患者的精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率高于 DFI 20%患者，差异有统计学意义（P 0.05），见表 2。表 2 不同精子 DFI 精液不液化患者的精液常规参数比较（x s）DFI例数精子浓度/（106mL1）正常形态 精子率/%精子前向 运动率/%10%10%20%20%69321344.735.3337.654.4731.473.159.851.776.821.423.471.0837.913.4431.423.1627.842.39FPtPtPtP67.402 0.0016.521 0.0018.662 0.0014.534 0.00180.163 0.0018.626 0.00112.526 0.0017.636 0.00193.665 0.0019.045 0.00110.081 0.0013.671 0.001注：DFI 10%与 DFI 10%20%比较；DFI 10%与 DFI 20%比较；DFI 10%20%与 20%比较。2.4 精液不液化患者精子 DFI 与年龄、精液常规参数的相关性Pearson 相关性分析显示，精液不液化患者的 DFI 值与精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率呈负相关性（P 0.001），与年龄呈正相关性（P 0.001），见表 3。表 3 精液不液化患者精子 DFI 与年龄、精液常规参数相关性分析变量精子 DFIrP年龄精子浓度正常形态精子率精子前向运动率0.5090.6620.5280.643 0.001 0.001 0.001 0.0013 讨论随着男性工作及生活压力不断增加，加之男性存在吸烟、饮酒等不良生活行为，精液不液化的发病率不断增加，高龄男性生育问题越来越严重。随着男性年龄不医药前沿 2024年1月 第14卷第1期 综合医学 111断增长，衰老会导致精子和表观遗传变化，对性器官及下丘脑-垂体-性腺轴产生不良影响，导致男性的精子质量及数量降低，生殖功能严重受损7-8。因此，积极评估精液不液化患者的精液质量，分析其生育能力，对其对症治疗具有重要意义。精液常规参数是评价男性生育功能的重要指标，但相关研究显示，约有 15%的不育男性的精液常规参数处于正常范围，无法正确判断其病情，不利于患者早期确诊并接受对症治疗9。DFI 是评估精液质量优劣的新指标，精子 DNA 损伤是男性生育能力降低次主要原因之一，精子细胞氧化应激反应、精子细胞异常凋亡、精子染色质组装异常时引起精子 DNA 损伤的主要原因，通过检测精子 DNA 完整性，能够更好地评估男性生育能力，也可在预测辅助生殖技术助孕技术方面发挥重要作用10-11。本研究结果显示，30 岁、30 40 岁、40 岁患者的 DFI 10%比例、DFI 10%20%比例、DFI 20%比例的差异有统计学意义，随着年龄递增其 DFI 10%比例递减，DFI 20%比例递增，结果提示随着精液不液化患者的年龄不断增大，其 DFI 值会不断增大。分析原因可能是男性年龄越大，其睾丸、附睾等器官功能逐渐下降，机体抗氧化能力降低，活性氧自由基增多导致体内活性氧聚集，诱发氧化应激损伤，会损伤其精子质膜，加之随着年龄增长导致其受外界不良环境影响的累积，使得精子 DNA 完整性降低，精子 DNA 碎片增多9-10。本研究结果显示，DFI 10%患者的精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率高于 DFI 10%20%、DFI 20%，DFI 10%20%患者的精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率高于 DFI 20%，与周明连等11研究结果一致，结果说明随着精液不液化患者的 DFI 值不断增大，其精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率均随之降低，精子 DNA 碎片率升高其精液质量会降低12。本研究结果显示，精液不液化患者的 DFI 值与精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率呈负相关性，与年龄呈正相关性，说明随着精液不液化患者的年龄增大，精子DFI率会逐渐升高，其精液常规参数会随着降低，导致患者的精液质量下降，生育能力不断降低13-14。综上所述，精液不液化患者的 DFI 与年龄存在正相关性，与精液常规参数存在负相关性，DFI 可作为评估精液不液化患者精液质量及生育能力的重要指标。【参考文献】1 刘洋精液不液化不育患者的精子 DNA 碎片指数与其精子常规参数、精子顶体酶活性的关系及其对体外受精结局的影响分析 J内科，2022,17(1):55-58,82.2 朱佳，余柯达，毛佳婷，等不育男性精子 DNA 碎片与年龄及精液常规参数的关系分析 J浙江临床医学，2020,22(2):158-160.3 吕晶，马玲，张铭，等武汉市男性精子 DNA 碎片率与年龄及精液常规参数的相关性研究 J中国生育健康杂志，2019,30(6):568-570,583.4 陈振文，谷龙杰精液分析标准化和精液质量评估：WHO人类精液检查与处理实验室手册（第 5 版）出版 J中国计划生育学杂志，2012,20(1):58-62.5 彭洁，易兵，戚青林不育患者年龄与精液常规参数及精子 DNA完整性的关系研究 J中国性科学，2021,30(2):18-21.6 PINO V,SANZ A,VALDS N,et al.The effects of aging on semen parameters and sperm DNA fragmentationJ.JBRA Assist Reprod,2020,24(1):82-86.7 陈亚强，吴成亮，邢梦雪精子 DNA 碎片率和精液常规参数与年龄的相关性研究 J中国现代医生，2020,58(25):33-36.8 王文帅，苟江，迟剑，等精子 DNA 损伤程度与精液常规参数及活性氧的相关性及对 IVF-ET 结局的影响 J检验医学与临床，2019,16(23):3520-3522.9 季兴哲，杨杰，宋娟，等334 例男性不育症患者精子 DNA 完整性与精液常规参数间的相关性分析 J生殖医学杂志，2017,26(12):1233-1237.10 李迎歌精液各项参数与精液不液化不育患者DFI的关系研究J医学理论与实践，2021,34(22):3986-3988.11 周明连，潘林清，张帅精液不液化患者精液常规参数与精子DNA 碎片相关性分析 J中国性科学，2019,28(2):33-35.12 郝白露精液浓度、正常形态率与精液不液化不育男性精子 DNA碎片的关联性研究 J首都食品与医药，2020,27(12):113.13 石国西精液浓度及正常形态率与精液不液化不育患者精子脱氧核糖核酸碎片的关联性分析 J包头医学，2019,43(4):33-35.14 MAO K,CHEN Z,LI M,et al.Clinical efficacy of prodom-assisted urokinase in the treatment of male infertility caused by impaired semen liquefactionJ/OL.Biomed Res Int,2021,2021:8862282.https:/doi.org/10.1155/2021/8862282.