某校大学生梭状芽孢杆菌携带情况调查.pdf
《某校大学生梭状芽孢杆菌携带情况调查.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《某校大学生梭状芽孢杆菌携带情况调查.pdf(3页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、28 医药前沿 2024年3月 第14卷第9期 论著某校大学生梭状芽孢杆菌携带情况调查刘梦昭1,苏诗洁1,黄贞维1,苏嘉雯1,容 欣1,王岐本2,谢 群1(通信作者)(1 湘南学院公共卫生学院 湖南 郴州 423000)(2 湘南学院基础医学院 湖南 郴州 423000)【摘要】目的:通过对湘南学院大学生粪便中梭状芽孢杆菌的分离培养及鉴定,了解大学生梭状芽孢杆菌的携带情况。方法:2022 年 36 月收集湘南学院大学生粪便样本 180 份,厌氧培养法分离艰难梭菌、产气荚膜梭菌和丁酸梭菌,血平板纯化菌株,通过聚合酶链式反应(PCR)法鉴定梭状芽孢杆菌,对可疑艰难梭菌进行毒素基因 A/B 检测。采
2、用16SrDNA 技术对分离的菌株进行鉴定。结果:艰难梭菌 A/B 毒素基因检出 13 份阳性,均为+/+,30 份可疑菌株 16 S rDNA确认:11份产气荚膜梭菌、2份丁酸梭菌、2份艰难梭菌。结论:湘南学院大学生人群中,产气荚膜梭菌携带率较高,艰难梭菌感染率较高,需加强食品安全健康教育,避免食源性疾病发生。【关键词】大学生;梭状芽孢杆菌;艰难梭菌;产气荚膜梭菌;丁酸梭菌【中图分类号】R378.8【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2024)09-0028-03Investigation on Clostridium carrying of college students i
3、n A UniversityLIU Mengzhao1,SU Shijie1,HUANG Zhenwei1,SU JiaWen 1,RONG Xin1,WANG Qiben2,XIE Qun1(Corresponding author)1 School of Public Health,Xiangnan University,Chenzhou,Hunan 423000,China2 School of basic Medical Sciences,Xiangnan University,Chenzhou,Hunan 423000,China【Abstract】Objective To unde
4、rstand the carriage situation of Clostridium difficile among college students through isolation,culture,and identification of Clostridium difficile in fecal samples from Xiangnan University.Methods From March to June 2022,180 fecal samples were collected from Xiangnan University students.Anaerobic c
5、ulture method was used to isolate Clostridium difficile,Clostridium perfringens,and Clostridium butyricum.The strains were purified on blood agar plates,identified using polymerase chain reaction(PCR),and suspected Clostridium difficile were tested for toxin genes A/b.16 S rDNA technology was used f
6、or strain identification.Results 13 samples were positive for toxin genes A/b of Clostridium difficile,all of which were+/+.16 S rDNA confirmed 30 suspected strains:11 were Clostridium perfringens,2 were Clostridium butyricum,and 2 were Clostridium difficile.Conclusions The carriage rate of Clostrid
7、ium perfringens is high among Xiangnan University students,and the infection rate of Clostridium difficile is also high.It is necessary to strengthen food safety and health education to prevent foodborne illness.【Key words】College students;Clostridium;Clostridium difficile;Clostridium perfringens;Cl
8、ostridium butyricum梭状芽孢杆菌是一群厌氧或微需氧的革兰阳性粗大芽孢杆菌的总称。人体肠道中常见的致病菌有艰难梭菌、产气夹膜梭菌等,而也有同属的丁酸梭菌是有益菌,艰难梭菌是一种革兰阳性粗大杆菌,是引起院内肠道感染的主要致病菌之一,艰难梭菌感染通常发生于长期接受抗菌药物治疗后引起肠道菌群失调的患者1,它不仅能产生引起机体免疫反应的表面层蛋白和鞭毛蛋白,还可以产生免疫原性的肠毒素 A(tcdA)和细胞毒素 B(tcdB)2,艰难梭菌给人类带来的危害在近些年来日益严重,是引起医院相关性腹泻的原因之一,占医院腹泻病例的 15%25%3。产气荚膜梭菌(clostridium perfri
9、ngens,Cp)是条件致病菌,容易引起免疫力低下及易感人群致病,Cp 感染机体后迅速侵入局部组织,细菌迅速繁殖产生多种毒素和侵袭酶,机体出现溶血性贫血、多脏器功能损伤、循环衰竭等症状,诊断不及时,病死率高达 70%100%4。丁酸梭菌是革兰阳性专性厌氧芽孢杆菌,在肠道代谢的过程中可以产生丁酸、细菌素以及一些维生素等物质调节肠道菌群,促进肠道微生态平衡,同时在调节机体的炎症反应和免疫功能中也发挥着重要的作用。有研究表明,丁酸梭菌抑制艰难梭菌、大肠杆菌、肠道沙门菌等致病菌的生长5-6,但也有丁酸梭菌携带毒素基因引起食物中毒的报道7-8。为了解大学生人群中梭状芽孢杆菌携带情况,本研究采集湘南学院大
10、学生粪便,根据 16 S rDNA 测序进行梭状芽孢杆菌的鉴定。1 资料与方法1.1 材料1.1.1 标本来源 于 2022 年 36 月收集 2018 2021 级湘南学院大学生粪便标本 180 份。纳入标准:健康体检合格,且粪便采集当日未出现腹痛、腹泻等疾病症状。1.1.2 主要仪器与试剂 生物安全柜(型号 BSC-1604)、高压蒸汽灭菌器(型号 yyXQ-50A)、高速冷冻离心机(型号3-18KS)、聚合酶链式反应(polymerase 基金项目:国家级大学生创新训练项目(202210545003);2021 年度郴州市技术研发中心(郴科发202157 号)。医药前沿 2024年3月
11、第14卷第9期 论著 29chain reaction,PCR)仪(型号 QuanStudi)、厌氧产气袋(Thermo)、环丝氨酸-头孢西丁-果糖琼脂(cycloserine-cefoxitin-fructose agar,CCFA)培养基、强化梭菌培养基(reinforced clostridium medium,RCM)、胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础(tryptose sulfite cycloserine agar base,TSC)培养基、哥伦比亚血平皿(贝瑞特生物技术公司),产毒艰难梭菌核酸检测试剂盒PCR-荧光探针法(圣湘生物公司)。1.2 方法(1)艰难梭菌的分离培养:取粪
12、便样本与无水乙醇混合,震荡摇匀后,静置 60 min,3 000 rpm/min 离心 10 min,取沉淀全部倒入已烘干的 CCFA 艰难梭菌选择培养基上,均匀涂布,厌氧环境 37 培养 48 h9。(2)Cp 的分离培养:取粪便样本接种到 RCM 培养基中,37 温箱培养 24 h,三区划线接种在 TSC 培养基上,37 温箱厌氧培养 24 h10。(3)丁酸梭菌的分离培养:取粪便样本与磷酸盐缓冲液混合摇匀后,80 水浴 10 min,取稀释液于 RCM 中,并在 37 条件下厌氧培养 48 h,然后将培养后样品进行梯度稀释,涂布于琼脂梭菌选择性培养基中,并在 37 条件下厌氧培养 48
13、h11-12。(4)分纯培养物分离鉴定:先用无菌接种环挑取以上种可疑菌株分别接种至哥伦比亚血琼脂平板内,37 厌氧培养 48 h。然后挑取可疑单个梭状芽孢杆菌菌落,再次接种血平板分纯,37 厌氧培养 48 h,观察菌落形态特点及溶血情况;同时挑取可疑菌落革兰染色,显微镜观察染色颜色、形态和是否形成芽胞及芽孢位置。(5)菌株 16 S rRNA 基因序列测定和分析:PCR 模板 DNA 的制备。选取单一纯培养菌落悬浮于 50 L 无菌蒸馏水中,置于 100 水浴中加热 5 10 min,然后进行离心处理,并取上清液作为 PCR 模板 DNA。16 S rRNA 基因序列的 PCR 扩增与测序对挑
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 大学生 芽孢 杆菌 携带 情况 调查
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。