免疫学检查.pptx

免疫学免疫学检查二、常用的免疫检查方法1.沉淀试验2.凝集试验3.补体结合试验4.中和试验5.荧光免疫技术6.酶免疫技术7.放射免疫技术8.发光免疫技术9.时间分辨荧光免疫技术 10.流式细胞仪分析技术11.分子生物学分析技术三、机体免疫功能检查(一)非特异性免疫功能测定1.血清蛋白区带电泳-+白蛋白 1、2球蛋白 1、2球蛋白 -球蛋白 血清蛋白区带电泳示意图谱2.外周血中性粒细胞计数，趋化、吞噬、杀菌功能测定 趋化功能降低：易反复感染、齿龈炎、中耳炎、Chediak-Higashi综合征、迟钝性白细胞综合征、有肌蛋白功能不全、高于IgE综合征等。吞噬功能降低：中性粒功能异常综合征、补体所致调理缺陷症、膜糖蛋白缺陷症、慢性肉芽肿、肌动蛋白功能不全等。杀菌功能降低：慢性肉芽肿、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、慢性粒白血病、糖尿病等三、机体免疫功能检查3.血清总补体、C3、C4、B因子、溶菌酶测定补体降低：自身免疫病，易反复感染等补体增高：风湿热急性期、结节性多动脉炎、皮肌炎、心梗、Reiter综合征等B因子降低：表示补体旁路途径激活溶菌酶：见于白血病、肾脏疾病；见于肿瘤患者三、机体免疫功能检查2.B淋巴细胞功能检查血清IgG含量测定特异性抗体产生能力的体内试验白喉类毒素、破伤风类毒素、肺炎球菌多糖抗原、流感嗜血杆菌多糖抗原接种后57天能检测到IgM型抗体，再次免疫后1周产生IgG型抗体。特异性抗体产生能力的体外试验 洗涤+低倍镜下计数酶点数(抗体生成细胞数)Ag吸附醋纤膜外周血单个核细胞5%CO2376h生物素 温育抗 体 洗涤酶复合物底物三、机体免疫功能检查3.淋巴结或组织活检浅皮质区B细胞的居住地深皮质区T细胞的居住地髓 质浆细胞(受抗原刺激)/髓索及髓窦(静止淋巴结)直肠粘膜固有层有丰富的浆细胞和IgA抗体分泌细胞常见与体液免疫功能缺陷的疾病1.性联无丙种球蛋白血症2.普通变异型免疫缺陷病3.高IgM综合征4.选择性IgA缺陷病5.IgG亚类缺陷症三、机体免疫功能检查(三)细胞免疫功能检查1.T细胞数量检查CD3+成熟T细胞(69.44.86%)CD4+辅助T细胞、诱导T细胞、杀伤T细胞、单核吞噬细胞(41.175.28%)CD8+抑制T细胞、毒性T细胞、反抑制T细胞(24.58 4.02%)2.T细胞功能检查T细胞转化试验(60%80%)抑制性T细胞功能检测(40%10%)T细胞介导细胞毒试验三、机体免疫功能检查3.mIL-2R细胞检测mIL-2R阳性细胞是T细胞活化的标志(正常人的PBMC静息状态为2%6%，PHA诱导培养后为22%39%)静息时过度表达提示有免疫病理损害 诱导后表达率降低提示患者细胞免疫功能不全4.婴幼儿侧位胸片若不见胸腺阴影，提示有T细胞缺陷5.淋巴结活检若皮质区和副皮质区界线不清，生发中心消失，提示有T细胞缺陷6.成人PPD 5u ,4872h后红肿、硬结或直径28%，CD4+/CD8+3.0，IgG、IgM、IgA2.血清sIL-2R，SACE3.Kveim抗原试验(90%阳性)支气管哮喘1.过敏原皮肤试验呈阳性(bronchial asthma)2.放射性过敏原吸附试验(RAST)或ELISA呈阳性3.嗜碱粒细胞脱颗粒试验(HBDT)(70%阳性)4.血浆组胺(正常:1.82.7mol/L)尿组胺(正常：15%；(idiopathic pulmonary2.血清r-球蛋白，IgA、IgM、IgG、fibrosis,IPE)RF(+)、ANA(+)外源性变应性肺泡炎1.血清特异性抗原沉淀抗体(90%(+)(extrinsis allergic alreolitis,EAA)2.BALF中淋巴细胞，肥大细胞,CD4+/CD8+,s IL-2R,透明质酸酶 3.血清sIL-2R、CRP、RF(+)、Ig3.常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标肺嗜酸粒细胞浸润症1.外周血及痰中嗜酸粒细胞计数(pulmonary infiltration 2.血清及BALF中IgE，Igwith eosinophilia,PIE)3.过敏原皮肤试验呈阳性慢性浅表性胃炎(chronic surface 血及胃液中胃壁细胞抗体(PCA)gastritis,CSG)(23.6%67.5%(+)慢性萎缩性胃炎内因子抗体(IFA)(53%(+)(chronic atrophic gastritis,CAG)溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)血清ANCA(+)(UC可达48%88%),克罗恩病(Crohn disease)Crohn病为7%25%)3.常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标自身免疫性肝炎1.血清ANA(74%(+)，SMA（86%91%(autoimmune (+)），肝肾微粒体(LRM)-1抗体(+)，Ig hepatitis)2.抗细胞色素P450D6抗体(+)IgA肾病1.血清IgA-FN聚合物，IgA，IgA(IgA nephropathy)型RF(30%以上(+)，IgA-CIC(33%(+)2.肾活检组织冰冻切片有IgA沉积3.尿Tamm-Horsfall(TH)蛋白包裹红细胞60%新月体性肾小球肾炎1.血清抗肾小球基底膜(GBM)抗体(+)，(crecentic glomeru-ANCA(+)，CIClonephritis)2.肾活检显示新月体内有大量纤维蛋白沉积3.常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标膜性增生性肾小球肾炎1.血清CIC，CH50,C3,C1q，(membranopnoliferativeC4Glomerulonephritis,MPGN）2.尿液免疫复合物(UIC)3.肾活检显示肾小囊腔和肾小管基底膜有C3沉积肾小管间质性肾炎1.血清抗肾小管基底膜(TBM)抗体(+)，(tubwlointerstitial抗TH抗体(+)，抗集合管抗体(+)nephritis,TIN)2.尿TH蛋白1.血NK细胞活力,CD3+、CD4+、心肌炎(myocarditis)CD8+，C3，T细胞转化率2.血清ANA(+)、抗心肌抗体(+)、RF(+)心肌病(myocardial diseases)血清抗ADP/ATP载体(ANT)抗体(+)急性炎性脱髓鞘性多发性神经病(acute inflammatory demyelinatingCSF中抗病原体抗体(+)，糖脂抗体(+),硫Polyneuropathy,AIDP or Guillain-脂抗体(+)，蛋白，细胞数正常。Barre syndrome,GBS)3.常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标重症肌无力血清抗AchR抗体(+)，抗横纹-银环蛇(myasthenia gravis,MG)毒、川楝毒、-蝮毒素抗体(+)，IL-2,C3全植物神经功能不全血清抗交感神经组织抗体(+)(pandysautonomia)毒性弥漫性甲状腺肿血清甲状腺球蛋白抗体(TGA)(30%(+)(Graves disease)甲状腺微粒体抗体(TMA)(1:80，d1:160，或1周后抗体有4倍增高，可诊断为伤寒感染。若O121:80，a/b/c1:80，或1周后抗体有4倍增高，可诊断甲/乙/丙型副伤寒感染。Vi抗原有阳性反应，提示病人为伤寒带菌者。若O12 对照血清查30%为阳性3、HLAA、B、C、PK、PQ抗原分型被检淋巴细胞+已知HLA分型血清仓+补体死细胞%50%为阳性，80%为强阳性术前组织配型：1、外周血T细胞亚群：CD4+/CD8+2.5，提示发生急排斥反应比临床症状早15天2、血清IL-2、SIL-2R水平 术后12周，可稍升高或下降（ISD作用），第3周恢复正常，再度升高提示有排斥反应比临床症状早15天。术后排斥反应监测：谢 谢！谢谢