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车前草中多糖的提取与含量的测定论文--学位论文.doc
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1、学 士 学 位 论 文BACHELOR S THESIS分类号 密级 U D C 编号 学士学位论文车前草中多糖的提取与含量的测定 目 录摘要1关键词:1引言21.仪器和材料41.1仪器:41.2试剂:41.3材料:42.实验方法和步聚42.1糖类的定性分析42.1.1制备车前草的样品溶液42.1.2糖类的鉴定方法42.2车前草中多糖的提取52.3标准曲线的绘制52.3.1标准溶液的准备52.3.2标准曲线的绘制52.4样品内多糖含量的测定62.5回收率的测定73.结果与讨论8参考文献9致谢10摘要目的是对车前草不同部位中多糖进行提取和含量分析。方法是首先利用显色反应鉴定了车前草中的多糖。然后
2、利用索氏提取法提取了车前草中多糖。采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖作为标准品,光密度于490nm波长处测定吸光度。结果:回归方程为A=20.928X,相关系数为R2 =0.9918。通过试验结果表明:车前草中多糖含量分别为,叶含量可达5.3mg/g,根含量为4.3mg/g,种子含量为2.4mg/g。RSD分别为3.5,6.8,1.7。:关键词:车前草,多糖,苯酚-硫酸法 引言多糖类物质是生命代谢不可缺少的重要物质,是由多个单糖或其衍生物聚合而成的大分子活性化合物,在20世纪60年代,人们就发现多糖复杂的生物活性和功能。多糖具有许多生物活性,与生物机能的维持密切相关,与蛋白质,脂类生成的糖蛋白,脂多糖
3、在细胞识别,分泌以及在蛋白质的加工,转移方面起着不要忽视的作用。它可以调节免疫功能,促进蛋白质和和核酸的生物合成,调节细胞的生长,提高生物体的免疫力,具有抗肿瘤,抗病毒和各种感染,抗辐射,抗癌,延迟衰老等功效,又因多糖毒性极小,所以对多糖类物质的研究将成为继蛋白和核酸之后的探索生命奥妙的第三理程碑6。车前草的学名:plantago asiatica,别名:车前菜,牛甜菜,甜菠菜。车前草属于车前草科,车前属,它是多年生草本植物。植株高约为1050cm叶片从基部生长,叶柄较长。根丛生,须壮。叶片皱缩,展平后呈卵状椭圆形或宽卵形,表面灰绿色或污绿色,具明显弧形脉57条,先端钝或短尖,基部宽楔形,全缘
4、或不规则波状浅齿。穗状花序数条,花茎长。蒴果盖裂,萼宿存,气微香,味微苦。5车前草是常用的维药草和中药草,用于车前草治疗腹泻,痢疾,牙疼,耳朵疼,女性月经多等疾病,它有能解毒,解热。出了这些以外,车前草清热利尿,可治湿热所致的小便不利尿多原因,如湿热所致的车前草可以用,如菲湿热。它又有利于高血压,发胖等疾病1,2。 因此,车前草中多糖含量的测定具有重要的药用价值。1.仪器和材料1.1仪器:S22PC型分光光度计,离心机,索氏提取器,浓缩器,分析天平,分液漏斗,容量瓶等。1.2试剂:葡萄糖,6%苯酚,浓硫酸,95%乙醇,乙醚,盐酸,斐林试剂,本尼迪克特试剂,莫氏试剂,赛氏试剂。1.3材料:车前草
5、的根,种子,叶(采集于上阿图什乡)2.实验方法和步聚2.1糖类的定性分析2.1.1制备车前草的样品溶液称取5g样品的干叶置于研钵中研磨细,将研碎的干叶样品中加入100毫升蒸馏水浸泡,保持2天。然后过滤。同样的方法分别制备车前草种子,根的样品溶液。2.1.2糖类的鉴定方法取1支试管加入1ml车前草样品溶液,再向试管中分别加入莫氏试剂,斐林试剂,本尼迪克特试剂,赛氏试剂。观察颜色变化10,11。结果见表1表1 糖类的定性分析 试剂样品溶液莫氏试剂赛氏试剂斐林试剂本尼迪克特试剂结果叶紫红色环红色红色沉淀黄色沉淀有糖类种子紫红色环红色红色沉淀黄色沉淀有糖类根紫红色环红色红色沉淀黄色沉淀有糖类2.2车前
6、草中多糖的提取精密称取5克样品,置索氏提取器中,到圆底烧瓶的1/2加入石油醚,约800C 回流5个小时脱脂,脱叶绿素。残渣挥干溶剂后,置锥形瓶中,用85%的乙醇浸泡24小时后进行分离提取。然后这个残渣中的乙醇通过蒸馏放弃。加水浸泡12个小时,过滤,提取滤液。这个滤液就是多糖。按这个方法分别提取车前草根,种子,叶的多糖9。2.3标准曲线的绘制2.3.1标准溶液的准备 精密称取干燥恒重的葡萄糖10mg,加适量的水溶解,稀释至100ml,准备浓度为0.1mg/ml葡萄糖标准溶液。2.3.2标准曲线的绘制 精确吸取葡萄糖标准溶液0.5ml,1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml,7ml,8ml
7、在容量瓶稀释至100ml。取9支试管,分别加入1ml标准溶液,分别加入1ml,6%苯酚,再加入5ml浓硫酸。另取一个试管加入1ml蒸馏水方法上述一样,做一空白。这些溶液在400C水浴中加热,取出冷至15分钟。利用分光光度计,在490nm处测定时,吸光度为0.013,0.035,0.046,0.063,0.087,0.105,0.122,0.145,0.167。回归方程A=20.928C,R2=0.9918。具有良好的线性关系。表2 葡萄糖不同浓度的吸光度浓度(mg/ml)00.00050.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0070.008吸光度00.0130.0350
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