基因综合项目工程的基本操作程序习题.doc
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1、基因工程基本操作程序习题一、选取题(每小题3分,共39分)1.下列关于基因工程论述,错误是( )A目基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物B限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类惯用工具酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达胰岛素原无生物活性D载体上抗性基因有助于筛选含重组DNA细胞和增进目基因表达2.下列关于基因工程中限制性核酸内切酶描述,错误是()。A一种限制性核酸内切酶只能辨认一种特定脱氧核苷酸序列B限制性核酸内切酶活性受温度影响C限制性核酸内切酶能辨认和切割RNAD限制性核酸内切酶可从原核生物中提取3.如图是运用基因工程技术哺育转基因植物,生产可食用疫苗某些过程示意图,其中Pst 、Sma
2、 、EcoR、Apa为四种限制性核酸内切酶。下列说法错误是()。A图示过程是基因工程核心环节B表达载体构建时需要用到限制酶 SmaC抗卡那霉素基因存在有助于将具有抗原基因细胞筛选出来D除图示构成外,表达载体中还应当具有启动子和终结子等构造4.下图是获取转基因抗冻番茄植株过程示意图,关于论述对的是()A过程获取目基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序B将各种抗冻基因编码区依次相连成能表达新基因,不能得到抗冻性增强抗冻蛋白C过程构成重组质粒缺少标记基因,需要转入农杆菌才干进行筛选D应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目基因存在及其完全表达5下图为DNA分子在不同酶作用下所发生变化,图中
3、依次表达限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用对的顺序是()A B C D6下列关于基因工程论述,不对的是(多选)()A基因工程经常以抗菌素抗性基由于目基因B细菌质粒是基因工程惯用运载体C通惯用一种限制性核酸内切酶解决含目基因DNA,用另一种解决运载体DNA D为哺育成抗除草剂作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体7天然玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成基因B,而开蓝色花矮牵牛中存在序列已知基因B。现用基因工程技术哺育蓝玫瑰,下列操作对的是( )A.提取矮牵牛蓝色花mRNA,经逆转录获得互补DNA,再扩增基因BB.运用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛基因文库中获取基
4、因BC.运用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞8北极比目鱼中有抗冻基因,其编码抗冻蛋白具备11个氨基酸重复序列,该序列重复次数越多,抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株过程示意图,关于论述对的是()。A过程获取目基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序B将各种抗冻基因编码区依次相连成能表达新基因,不能得到抗冻性增强抗冻蛋白C过程构成重组质粒缺少标记基因,需要转入农杆菌才干进行筛选D应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目基因存在及其完全表达9.将ada(腺苷酸脫氨酶基因)通过质粒pET28b导人大肠杆菌并成功表达腺苷酸
5、脱氨酶。下列论述错误是()A每个大肠杆菌细胞至少含一种重组质粒B每个重组质粒至少含一种限制性核酸内切酶辨认位点C每个限制性核酸内切酶辨认位点至少插入一种adaD每个插入ada至少表达一种腺苷酸脱氨酶分子 10下列论述符合基因工程概念是()。AB淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中具有B淋巴细胞中抗体基因B将人干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素菌株C用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生变化,通过筛选获得青霉素高产菌株D自然界中天然存在噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上11在用基因工程技术构建抗除草剂转基因烟草过程中,下列操作错误是()。A用限制性核酸内切酶切割烟草花
6、叶病毒核酸B用DNA连接酶连接经切割抗除草剂基因和载体C将重组DNA分子导入烟草原生质体D用含除草剂培养基筛选转基因烟草细胞12下列关于转基因植物论述,对的是()。A转入到油菜抗除草剂基因,也许通过花粉传入环境中B转抗虫基因植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增长C动物生长激素基因转入植物后不能表达D如转基因植物外源基因来源于自然界,则不存在安全性问题13下列关于基因工程论述,错误是()。A目基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类惯用工具酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达胰岛素原无生物活性D载体上抗性基因有助于筛选含重组DNA细胞和增进目基因表达二、填空题(
7、共51分)1.科学家将动物体内可以合成胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组,并且在大肠杆菌体内表达到功。请依照图回答问题:(1)此图表达是采用 合成基因办法获取 基因过程。 (2)图中DNA是以 为模板, 形成单链DNA,在酶作用下合成双链DNA,从而获得了所需要基因。 (3)图中代表 DNA,含 基因。 (4)图中表达 。2.下图表达运用基因工程哺育抗虫棉过程,请据图回答下列关于问题。(1)若限制酶辨认序列和切点是GATC,限制酶辨认序列和切点是GGATCC,那么在过程中,应用限制酶_切割质粒,用限制酶_切割抗虫基因。(2)将通过过程得到大肠杆菌涂布在具有_培养基上,若可以生长阐明已导入了普通
8、质粒或重组质粒,反之则阐明没有导入。(3)要拟定抗虫基因导入后,与否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作,则在个体水平上鉴定过程可简述为:_。经筛选分析,该植株细胞中具有一种携带抗虫基因DNA片段,因而可以把它看作是杂合子。理论上,该转基因植株自交产生F1代中,仍具备抗虫特性植株占总数_。(4)过程所用当代生物技术称为_,从遗传学角度来看,据细胞通过过程,能形成棉植株主线因素是细胞具备_。3干扰素是病毒侵入人体后由淋巴细胞产生一种免疫活性物质,它具备广谱抗病毒作用。运用当代生物技术生产干扰素流程如下:(1)过程产生物质A是_,cDNA文库_(不不大于/不大于)人基因组文库。(2)过程用到工具
9、酶是_,过程需先用_解决受体细胞,过程普通采用_技术。(3)过程和核心技术分别是_、_。(4)基因工程核心环节是图中_(填标号)。4.(安徽理综31)家蚕细胞具备高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可提取干扰素用于制药。(1)进行转基因操作前,需用_酶短时解决幼蚕组织,以便获得单个细胞。(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库干扰素基因片段对的插入表达载体_和_之间。(3)采用PCR技术可验证干扰素基因与否已经导入家蚕细胞。该PCR反映体系重要成分应包括:扩增缓冲液(含Mg2)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、_和_。(4)运用生物反映器培
10、养家蚕细胞时,贴壁生长细胞会产生接触抑制。普通将多孔中空薄壁小玻璃珠放入反映器中,这样可以_,增长培养细胞数量,也有助于空气互换。5(天津理综,7)下图是哺育表达人乳铁蛋白乳腺生物反映器技术路线。图中tetR表达四环素抗性基因,ampR表达氨苄青霉素抗性基因,BamH、Hind、Sma直线所示为三种限制酶酶切位点。据图回答问题。(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用_限制酶同步酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选具有重组载体大肠杆菌一方面需要在含_培养基上进行。(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达调控序列是_(填字母代号)。A启动子 BtetR C复制原点 DampR(3)过程可采用操作
11、办法是_(填字母代号)。A农杆菌转化 B大肠杆菌转化C显微注射 D细胞融合(4)过程采用生物技术是_。(5)对初期胚胎进行切割,通过程可获得各种新个体。这运用了细胞_性。(6)为检测人乳铁蛋白与否成功表达,可采用_(填字母代号)技术。A核酸分子杂交 B基因序列分析C抗原抗体杂交 DPCR6(上海卷)人体细胞内具有抑制癌症发生P53基因,生物技术可对此类基因变化进行检测。(1)目基因获取办法普通涉及_和_。(2)上图表达从正常人和患者体内获取P53基因某些区域。与正常人相比,患者在该区域碱基会发生变化,在上图中用方框圈出发生变化碱基对,这种变异被称为_。(3)已知限制酶E辨认序列为CCGG,若用
12、限制酶E分别完全切割正常人和患者P53基因某些区域(见上图),那么正常人会被切成_个片段,而患者则被切割成长度为_对碱基和_对碱基两种片段。(4)如果某人P53基因某些区域经限制酶E完全切割后,共浮现170、220、290和460个碱基对四种片段,那么该人基因型是_(以P表达正常基因,P表达异常基因)。7(福建卷)转基因抗病香蕉哺育过程如图所示。质粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四种限制酶切割位点。请回答下列问题。(1)构建含抗病基因表达载体A时,应选用限制酶_,对_进行切割。(2)培养板中卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞生长,欲运用该培养基筛选已导入抗病基因香蕉细胞,应使基因表达载体A
13、中具有_,作为标记基因。(3)香蕉组织细胞具备_,因而,可以运用组织培养技术将导入抗病基因香蕉组织细胞哺育成植株。图中、依次表达组织培养过程中香蕉组织细胞_。8 (高考全国新课标卷40)依照基因工程关于知识,回答下列问题:(1)限制性内切酶切割分子后产生片段,其末端类型有和。(2)质粒运载体用EcoR切割后产生片段如下:为使运载体与目基因相连,具有目基因DNA除可用EcoR切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必要具备特点是。(3)按其来源不同,基因工程中所使用DNA连接酶有两类,即DNA连接酶和DNA连接酶。(4)反转录作用模板是,产物是。若要在体外获得大量反转录产物,常采用技术。(5)
14、基因工程中除质粒外,和也可作为运载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,普通状况下,不能直接用未解决大肠杆菌作为受体细胞,因素是。9.(福建高考)当代生物科技专项。肺细胞中let-7基因表达削弱,癌基因RAS表达增强,会引起肺癌。研究人员运用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达,发现肺癌细胞增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图。请回答:()进行过程时,需用 酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶辨认和结合部位,以驱动let-7基因转录,该部位称为 。()进行过程时,需用 酶解决贴附在培养皿壁上细胞,以利于传代培养。()研究发现,let-7基因能影响RAS表达,其影响
15、机理如图。据图分析,可从细胞提取 进行分子杂交,以直接检测let-7基因与否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,也许是由于细胞中 (RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起。10. (天津高考7)生物分子间特异性结合性质广泛用于生命科学研究。如下实例为体外解决“蛋白质-DNA复合体”获得DNA片段信息过程图。据图回答:(1)过程酶作用部位是 键,此过程只发生在非结合区DNA,过程酶作用部位是 键。(2)、两过程运用了酶 特性。(3)若将得到DNA片段用于构建重组质粒,需要过程测序成果与 酶辨认序列进行对比,以拟定选用何种酶。(4)如果复合体中蛋白质为RNA酶聚合,则其辨认、结合DNA序列位基因 。(5
16、)如下研究运用了生物分子间特异性结合有 (多选)A.分离得到核糖体,用蛋白酶酶解后提取rRNA B.用无水乙醇解决菠菜叶片,提取叶绿体基粒膜上光合色素C通过度子杂交手段,用荧光物质标记目基因进行染色体定位D将抑制成熟基因导入番茄,其mRNA与催化成熟酶基因mRNA互补结合,终结后者翻译,延迟果实成熟。11. (江苏高考32)图1表达具有目基因DDNA片段长度(bp即碱基对)和某些碱基序列,图2表达一种质粒构造和某些碱基序列。既有Msp I、BamH I、Mbo I、Sma I4种限制性核酸内切酶,它们辨认碱基序列和酶切位点分别为CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。请回答下列问题 (
17、1)图1一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 连接。(2)若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段,产生末端是 末端,其产物长度为 。(3)若图1中虚线方框内碱基对被T-A碱基对替代,那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其相应DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,产物中共有 种不同长度DNA片段。(4)若将图2中质粒和目基因D通过同种限制酶解决后进行连接,形成重组质粒,那么应选用限制酶是 。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒大肠杆菌,普通需要用添加 培养基进行培养。经检测,某些具有重组质粒大肠杆菌菌株中目基因D不能对的表达,其最也许因素是 。答案1.【解析】基因工程中有
18、3种工具,但工具酶只有2种。工具酶本质为蛋白质,载体本质为小型DNA分子,但不一定是环状。标记基因作用筛选、检测目基因与否导入受体细胞,常用有抗生素抗性基因、发光基因,表达产物为带颜色物质等。受体细胞中惯用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(普通不用体细胞)、微生物大肠杆菌、酵母菌等。普通不用支原体,因素是它营寄生生活;一定能用哺乳动物成熟红细胞,因素是它无细胞核,不能合成蛋白质。【答案】D2.解析考查基因工程中工具酶关于知识。限制性核酸内切酶化学成分是蛋白质,它活性受到温度和pH影响;限制性核酸内切酶特点是能辨认双链DNA中特定核苷酸序列,可在特定位点进行切割,但不能辨认和切割RN
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