甲状腺癌组织中DCBLD2和MAP4K3的表达及与临床病理特征及预后的关系.pdf
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1、34现代检验医学杂志第 39 卷第 2 期2024 年 3 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.2,Mar.2024甲状腺癌组织中 DCBLD2 和 MAP4K3 的表达及与 临床病理特征及预后的关系谈玖婷,傅聿明,刘 婧,张倜然(扬州大学附属兴化市人民医院,江苏兴化 225700)摘 要:目的 探讨甲状腺癌组织中盘状蛋白含 CUB 和 LCCL 结构域 2(discoidin CUB and LCCL domain containing 2,DCBLD2)、丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶 3(mitogen-activated protein kinase kinase kin
2、ase kinase 3,MAP4K3)的表达及与临床病理特征及预后的关系。方法 选取 2016 年 1 月 2020 年 6 月在扬州大学附属兴化市人民医院诊治的92 例甲状腺癌患者。采用免疫组织化学(immunohitochemistry,IHC)检测癌组织及癌旁组织中 DCBLD2 和 MAP4K3的表达。比较不同临床病理特征甲状腺癌患者 DCBLD2 和 MAP4K3 表达差异。Kaplan-Meier 曲线分析不同 DCBLD2和 MAP4K3 表达患者无进展生存预后的差异。多因素 COX 分析影响甲状腺癌无进展生存预后的危险因素。结果 甲状腺癌组织中 DCBLD2(67.39%),
3、MAP4K3(65.22%)阳性率高于癌旁组织(5.43%,6.52%),差异具有统计学意义(2=76.262,68.894,均 P 0.05)。癌组织中 DCBLD2 与 MAP4K3 的表达呈显著正相关(r=0.742,P 0.05)。TNM 分期 III IV 期、并发淋巴结转移癌组织中 DCBLD2 的阳性率(87.18%,93.75%)和 MAP4K3 的阳性率(84.62%,90.63%)分别高于 I II 期(52.83%,50.94%)、无淋巴结转移癌组织(53.33%,51.67%),差异具有统计学意义(2=11.230 15.513,均 P0.05)。DCBLD2 阳性和阴
4、性组患者三年无进展生存率分别为 74.19%(46/62),93.33%(28/30)。MAP4K3 阳性和阴性组患者三年无进展生存率分别为 75.00%(45/60),90.63%(29/32)。DCBLD2 阳性组,MAP4K3 阳性组患者三年累积无进展生存率低于 DCBLD2 阴性组、MAP4K3 阴性组,差异具有统计学意义(2=4.533,4.138,P=0.033,0.046)。DCBLD2 阳性(OR=1.659,P=0.001)、MAP4K3 阳性(OR=1.606,P=0.001)、肿瘤 TNM分期期(OR=1.766,P=0.001)和并发淋巴结转移(OR=1.868,P=0
5、.001)是影响甲状腺癌患者无进展生存预后的独立危险因素。结论 甲状腺癌组织中 DCBLD2 和 MAP4K3 表达升高,两者均参与甲状腺癌的发生发展,有助于评估甲状腺癌患者的无进展生存预后。关键词:甲状腺癌;盘状蛋白含 CUB 和 LCCL 结构域 2;丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶 3;无进展生存预后中图分类号:R736.1;R730.43文献标识码:A文章编号:1671-7414(2024)02-034-06doi:10.3969/j.issn.1671-7414.2024.02.007Expression of DCBLD2 and MAP4K3 in Thyroid Cancer T
6、issue and Their Relationship with Clinico-pathological Features and PrognosisTAN Jiuting,FU Yuming,LIU Jing,ZHANG Tiran(Xinghua Peoples Hospital Affiliated to Yangzhou University,Jiangsu Xinghua 225700,China)Abstract:Objective To investigate the expression of discoidin CUB and LCCL domain containing
7、 2(DCBLD2)and mitogen activated protein kinase kinase kinase kinase 3(MAP4K3)in thyroid cancer and their relationship with clinico-pathological features and prognosis.Methods A total of 92 patients with thyroid cancer diagnosed and treated in Xinghua Peoples Hospital Affiliated to Yangzhou Universit
8、y from January 2016 to June 2020 were selected.Immunohistochemistry(IHC)was used to detect the expression of DCBLD2 and MAP4K3 in thyroid cancer tissues and adjacent tissues.The expression differences of DCBLD2 and MAP4K3 in thyroid cancer patients with different clinicopathological features were co
9、mpared.Kaplan-Meier curve analysis was used to analyze differences in the progression-free survival prognosis of patients with different DCBLD2 and MAP4K3 expressions.Multivariate COX analysis was used to analyze the risk factors affecting the progression-free survival prognosis of thyroid cancer.Re
10、sults The positive rates of DCBLD2(67.39%)and MAP4K3(65.22%)in thyroid cancer tissues were higher than those in adjacent tissues(5.43%,6.52%),and the differences were statistically significant(2=76.262,68.894,all P 0.05).The expression of DCBLD2 was positively correlated with MAP4K3(r=0.742,P 0.001)
11、.The positive rates of 基金项目:江苏省非编码 RNA 基础与临床转化重点实验室课题项目(202113):miR-451a 通过 PI3K/AKI/VEGF 信号通路参与调控甲状腺细胞增殖的分子机制研究。作者简介:谈玖婷(1988-),女,硕士,主治医师,研究方向:垂体疾病、糖尿病、甲状腺疾病的诊疗,E-mail:。35现代检验医学杂志第 39 卷第 2 期2024 年 3 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.2,Mar.2024DCBLD2 and MAP4K3 in stage IIIIV(87.18%,84.62%)and lymph node met
12、astatic cancer tissues(93.75%,90.63%)were higher than those in stage III(52.83%,50.94%)and non lymph node metastatic cancer tissues(53.33%,51.67%),with statistically significant differences(2=11.230 15.513,all P0.05).The 3-year progression-free survival rates of DCBLD2-positive and DCBLD2-negative p
13、atients were 74.19%(46/62)and 93.33%(28/30),respectively.The 3-year progression-free survival rates of MAP4K3 positive and negative patients were 75.00%(45/60)and 90.63%(29/32),respectively.The 3-year cumulative progression-free survival rate of DCBLD2 positive group and MAP4K3 positive group was lo
14、wer than that of DCBLD2 negative group and MAP4K3 negative group,and the differences were statistically significant(2=4.533,4.138,P=0.033,0.046).DCBLD2 positive(OR=1.659,P=0.001),MAP4K3 positive(OR=1.606,P=0.001),tumor TNM stage IIIIV(OR=1.766,P=0.001)and combined lymph node metastasis(OR=1.868,P=0.
15、001)were independent risk factors for the progression-free survival prognosis of thyroid cancer patients.Conclusion The expressions of DCBLD2 and MAP4K3 were increased in thyroid cancer tissue.They are involved in the occurrence and development of thyroid cancer,which may help evaluate the progressi
16、on-free survival prognosis of thyroid cancer patients.Keywords:thyroid cancer;discoidin CUB and LCCL domain containing 2;mitogen activated protein kinase kinase kinase kinase 3;progression-free survival prognosis甲状腺癌(thyroid cancer)是头颈部常见的恶性肿瘤,全球每年新发病例约 58.6 万例,占所有癌症发病例数的 3%1。甲状腺癌的治疗包括手术治疗、内分泌治疗,但术后
17、部分患者仍会出现肿瘤复发2。探索能用于评估甲状腺癌患者预后的标志物,对于个体化治疗具有重要意义。盘状蛋白含CUB 和 LCCL 结构域 2(discoidin CUB and LCCL domain containing 2,DCBLD2)是一种I型跨膜蛋白,结构上包括信号序列和盘状蛋白结构域,参与血管生成、葡萄糖摄取和血栓形成等过程。研究发现,DCBLD2 在肺癌3、结直肠癌4中表达增加,活化表皮生长因子受体通路,诱导肿瘤无限增殖。丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶 3(mitogen-activated protein kinase kinase kinase kinase 3,MAP4K3)
18、属于丝裂原活化蛋白激酶家族成员,能够磷酸化激活细胞信号传导中细胞分裂周期蛋白 42 等关键效应子,促进肺癌等肿瘤细胞的增殖及迁移,促进肿瘤进展5-6。目前 DCBLD2 和 MAP4K3 在甲状腺癌中的表达及临床意义尚不清楚。本研究通过检测甲状腺癌中 DCBLD2 和 MAP4K3 表达,研究两者的临床预后价值。1 材料与方法1.1 研究对象 选取 2016 年 1 月 2020 年 6 月扬州大学附属兴化市人民医院诊治的 92 例甲状腺癌患者。纳入标准:均接受甲状腺全切手术治疗,经术后组织病理检查确诊为甲状腺癌;原发、初治患者;对本研究知情同意;术后均接受甲状腺激素抑制治疗。排除标准:妊娠期
19、或哺乳期女性;伴有严重肝肾等脏器功能障碍;并发其它恶性肿瘤;并发甲状腺功能亢进、甲状腺功能低下及结节性甲状腺肿等甲状腺疾病。其中,男性 37例,女性 55 例;年龄 33 73(53.129.28)岁;肿瘤直径:4 cm 44例,4 cm 48例;病理类型:乳头状癌 62 例,滤泡状癌 30 例;临床 TNM 分期I II 期 53 例,III IV 期 39 例;并发淋巴结转移 32 例;肿瘤分化程度:高分化 28 例,中分化 31例,低分化 33 例。本研究符合医院伦理相关要求并批准通过。1.2 仪器与试剂 石蜡切片机(德国徕卡公司,型号 RM2125);免疫组织化学染色试剂盒(北京中杉金
20、桥公司,型号 PV9001);DCBLD2,MAP4K3兔单克隆抗体(美国 Abcam 公司,货号 ab115451,ab303612);倒置显微镜(日本奥林巴斯公司,型号 CX31)。1.3 方法1.3.1 免疫组织化学法检测 DCBLD2,MAP4K3 的表达:将术中获得的部分甲状腺癌和癌旁组织用甲醛固定,石蜡包埋。常规脱蜡,水化,抗原修复,DCBLD2,MAP4K3 一抗(浓度 1200)4孵育16h,二抗 37孵育 1h,DAB 显色 10min,苏木素染色 5min,分化反蓝后脱水透明,中性树胶封片。结果由专业的病理科医生判定,高倍镜(200)随机确定 5 个区域并计算染色细胞数。染
21、色程度计分:棕黄色 2 分,淡黄色 1 分,无色 0 分;阳性细胞数计分:50%4 分,25%49%3 分,10%24%2 分,0%9%1 分。阳性细胞数与染色程度计分相乘结果 3 分为阳性,2 分为阴性。1.3.2 随访:采用电话、微信和门诊方式对患者进行三年随访,随访截止至 2023 年 5 月。术后第 1年每 3 个月 1 次,第 2 至 3 年每 6 个月 1 次。随访内容为患者无进展生存情况。肿瘤进展定义为随访过程中患者出现肿瘤复发、转移或肿瘤相关死亡。随访终点为出现肿瘤进展或随访结束。1.4 统计学分析 所有数据采用 SPSS26.0 软件分析。计数资料以率(%)描述,组间比较采用
22、2检验。Spearman 秩相关分析 DCBLD2 与 MAP4K3 表达的36现代检验医学杂志第 39 卷第 2 期2024 年 3 月J Mod Lab Med,Vol.39,No.2,Mar.2024相关性。绘制 Kaplan-Meier 曲线,Log-Rank 检验比较不同 DCBLD2,MAP4K3 表达曲线间无进展生存预后的差异。COX 比例风险模型分析影响甲状腺癌无进展生存预后的因素。P0.05 为差异有统计学意义。2 结果2.1 DCBLD2,MAP4K3 蛋白在甲状腺癌和癌旁组织中的表达 DCBLD2,MAP4K3 蛋白棕褐色阳性染色主要位于细胞浆和细胞膜,见图 1。癌组织中
23、 DCBLD2 和 MAP4K3 阳性率分别为 67.39%(62/92),65.22%(60/92),高 于 癌 旁 组 织 的5.43%(5/92),6.52%(6/92),差 异 具 有 统 计学意义(2=76.262,68.894,均 P=0.001)。癌组织中 DCBLD2 与 MAP4K3 的表达呈显著正相关(r=0.742,P 0.001)。图 1 癌组织和癌旁组织中 DCBLD2,MAP4K3 表达(免疫组化,200)2.2 DCBLD2,MAP4K3 表达与临床病理特征的关系 见表 1。TNM 分期 III IV 期、并发淋巴结转移癌组织中 DCBLD2,MAP4K3 阳性率
24、高于 I II期、无淋巴结转移癌组织,差异具有统计学意义(均P0.05)。表 1 DCBLD2,MAP4K3 表达与甲状腺癌临床病理特征的关系 n(%)类别nDCBLD2 阳性2PMAP4K3 阳性2P性别男3724(64.87)0.1800.67223(62.16)0.2550.614女5538(69.09)37(67.27)年龄(岁)604729(61.70)1.4150.23429(61.70)0.5230.469 604533(73.33)31(68.89)肿瘤直径(cm)44426(59.09)2.6440.10426(59.09)1.3950.238 44836(75.00)34(
25、70.83)病理类型乳头状癌6239(62.90)1.7430.18739(62.90)0.4490.503滤泡状癌3023(76.67)21(70.00)分化程度高分化2818(64.29)0.6670.71616(57.14)2.6320.268中分化3120(64.52)19(61.29)低分化3324(72.73)25(75.76)TNM 分期I II5328(52.83)12.0630.00127(50.94)11.2300.001III IV3934(87.18)33(84.62)淋巴结转移有3230(93.75)15.5130.00129(90.63)13.9630.001无60
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