临床常用免疫学检查课件.ppt
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1、文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查l血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白(immunglobulin,Ig)测定测定l血清补体测定血清补体测定l细胞免疫检测细胞免疫检测l感染免疫检测感染免疫检测l自身免疫检查自身免疫检查l肝炎病毒标志物检测肝炎病毒标志物检测l肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清免疫球蛋白分类血清免疫球蛋白分类lIg通常是指具有抗体活性和(或)抗体样结构通常是指具有抗体活性和(或)抗体样结构的球蛋白。的球蛋白。l应用免疫电泳与超速离心
2、分析可将应用免疫电泳与超速离心分析可将Ig分分5类:类:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。lIgG:含量最多或最主要的:含量最多或最主要的Ig(75%),唯一),唯一能够通过胎盘的能够通过胎盘的Ig。主要由脾脏和淋巴结中的。主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成与分泌。浆细胞合成与分泌。lIgA:约占:约占10%,SIgA在局部免疫中起重要作在局部免疫中起重要作用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白lIgM:分子量最大,由:分子量最大,由5个个IgM单
3、体通过单体通过J链连接。是最早出现的链连接。是最早出现的Ig,是抗原刺激,是抗原刺激后最早出现的抗体,其杀菌、溶菌、溶后最早出现的抗体,其杀菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比血、促吞噬以及凝集作用比IgG高高5001000倍。倍。l测定方法:单向免疫扩散法(测定方法:单向免疫扩散法(RID)或免)或免疫比浊法。疫比浊法。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白测定参考值测定参考值l参考值:参考值:IgG:7.616.6g/L(RID法)法)IgA:7103350mg/LIgM:0.482.12g/L文档仅供参考,不能作为科学依
4、据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。.l临床意义临床意义免疫球蛋白增高免疫球蛋白增高多克隆增高多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病,如疾病,如SLE、类风湿关节炎等。、类风湿关节炎等。单克隆增高单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病,如主要见于免疫增殖性疾病,如多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。l免疫球蛋白降低:免疫球蛋白降低:常见于各类先天性免疫缺陷常见于各类先天性免疫
5、缺陷病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长期使用免疫抑制剂的病人。期使用免疫抑制剂的病人。l血清血清IgD测定测定免疫扩散法:免疫扩散法:062mg/L已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状腺抗体和抗腺抗体和抗“O”抗体等均属抗体等均属IgD,但活性甚低。,但活性甚低。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清血清IgE:主要由鼻咽部、支气管、胃肠主要由鼻咽部、支气管、胃肠道等粘膜固有层的浆细胞分泌,为亲细道等粘膜固有层的浆细胞分泌,为亲细胞抗体,能与肥大细胞、嗜碱性粒细
6、胞胞抗体,能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞膜上的膜上的FceR结合,产生结合,产生I型变态反应。型变态反应。ELASA:0.10.9mg/L临床意义:临床意义:1.I型变态反应型变态反应 2.IgE型骨髓瘤、寄生虫感染等型骨髓瘤、寄生虫感染等3.慢性肝炎、慢性肝炎、SLE、类风湿性关节炎等。、类风湿性关节炎等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。l是一种单克隆是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的淋巴细胞异常增殖时产生的IgG分子分子或片段,一般不具有抗体活性。或片段,一般不具有抗体活性。l参考值:参考值:蛋白电泳法,免疫电泳法:阴性蛋白电泳法,免疫电泳法:
7、阴性l意义:意义:1.多发性骨髓瘤(多发性骨髓瘤(MM),占),占35%65%,其,其中中IgG型占型占60%左右;左右;IgA型占型占20%左右;左右;轻链型轻链型占占15%左右;左右;IgD、IgE型罕见。型罕见。2.巨球蛋白血症。巨球蛋白血症。3.重链病(重链病(HCDs)。)。4.半分子病。半分子病。5.恶性淋巴瘤。恶性淋巴瘤。6.良性良性M蛋白血症。蛋白血症。血清血清M蛋白测定蛋白测定(M protein,monoclonal immunoglobulins)文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清补体测定血清补体测定l补体是具有酶活性的一种
8、不耐热球蛋白,分补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白,分3组:组:9种补体成分(种补体成分(C1C9););B、D、P、H、I因子;补体调节蛋白,如因子;补体调节蛋白,如C1抑制物、抑制物、C4结合结合蛋白、促衰变因子等。蛋白、促衰变因子等。l总补体溶血活性(总补体溶血活性(CH50)测定)测定l参考值参考值试管法:试管法:50000100000U/L意义:意义:增高增高见于急性炎症、急性组织损伤、恶见于急性炎症、急性组织损伤、恶性肿瘤及妊娠。性肿瘤及妊娠。降低降低见于急性肾小球肾炎、见于急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢性肝病、肝硬
9、化、性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。、严重烧伤等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清补体测定血清补体测定l血清血清C3:主要由巨噬细胞和肝脏合成,在经典主要由巨噬细胞和肝脏合成,在经典激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。参考值:参考值:免疫比浊法免疫比浊法0.851.70g/L增高增高作为急性时相蛋白,在急性炎症、传染病作为急性时相蛋白,在急性炎症、传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥反应时增高。反应时增高。降低降低补体合成能力降低;合成原补体合成能力
10、降低;合成原料不足;消耗或丢失太多;先天性补体缺乏。料不足;消耗或丢失太多;先天性补体缺乏。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清补体测定血清补体测定l血清血清C4测定:测定:由肝脏、吞噬细胞合成,由肝脏、吞噬细胞合成,参与补体的经典激活途径。参与补体的经典激活途径。l参考值:参考值:单向免疫扩散法:单向免疫扩散法:0.197+/-0.109/L。l临床意义临床意义基本与基本与C3相似,降低还见于多相似,降低还见于多发性骨髓瘤、发性骨髓瘤、IgA肾病、遗传性肾病、遗传性C4缺乏症缺乏症等。等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请
11、联系网站或本人删除。血清补体测定血清补体测定l补体补体C1q测定测定l参考值:参考值:0.1790.04g/Ll临床意义:临床意义:与与C3相似,降低还见于活动相似,降低还见于活动性混合性结缔组织病、重度营养不良、性混合性结缔组织病、重度营养不良、肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。lB因子测定因子测定-C3激活剂前体激活剂前体文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。细胞免疫检查细胞免疫检查l淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测lT淋巴细胞表面标志物检测:淋巴细胞表面标志物检测:E玫瑰花玫瑰花形成试验、免疫荧光法(形
12、成试验、免疫荧光法(IFA)、荧光激)、荧光激活细胞分类法(活细胞分类法(FACS)、免疫金银法以)、免疫金银法以及免疫酶染色法等。及免疫酶染色法等。lE玫瑰花形成试验玫瑰花形成试验SRBC+CD2l参考值参考值Et64.4%6.7%l免疫荧光法免疫荧光法文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。T淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l意义意义可用于可用于T淋巴细胞计数,淋巴细胞计数,T淋巴细胞亚淋巴细胞亚群的分类以及判断群的分类以及判断T淋巴细胞的活化程度。淋巴细胞的活化程度。lCD3分子表达于所有成熟分子表达于所有成熟T淋巴细胞的表面,淋巴细胞的
13、表面,是总是总T淋巴细胞的重要标志,淋巴细胞的重要标志,CD3+常见于甲状常见于甲状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力以及器官移植后排斥反应。力以及器官移植后排斥反应。CD3+主要见于主要见于免疫缺陷病,如免疫缺陷病,如AIDS、先天性胸腺发育不全、先天性胸腺发育不全综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶性综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶性肿瘤、肿瘤、SLE、免疫抑制剂治疗等。、免疫抑制剂治疗等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。T细胞分化抗原测定l白细胞分化抗原(白细胞分化抗原(clusterd
14、ifferentiation,CD)lCD3代表总代表总T淋巴细胞,淋巴细胞,CD4是是辅助、诱导辅助、诱导T细胞的标细胞的标志,志,CD8是抑制、杀伤性是抑制、杀伤性T细胞的标志。应用单抗和荧细胞的标志。应用单抗和荧光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数CD的百分率。的百分率。l参考值参考值:免疫荧光法(:免疫荧光法(IFA):):CD3为为63.1%10.8%;CD4为为42.8%9.5%;CD819.6%5.9%;CD4/CD8为(为(2.20.7)/1。流式细胞术:流式细胞术:CD361%85%;CD428%58%;CD819%48
15、%;CD4/CD80.92.0/1。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。T细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定l临床意义临床意义lCD3lCD4+T细胞下降细胞下降常见于某些病毒感染性疾病,如常见于某些病毒感染性疾病,如AIDS、MCV、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用免疫抑制剂等;免疫抑制剂等;升高升高见于类风湿性关节炎活动期。见于类风湿性关节炎活动期。lCD8+T细胞下降细胞下降常见于类风湿性关节炎、常见于类风湿性关节炎、Sjogren综合综合征、重症肌无力、征、重症肌无力、DM(II型)以及膜型肾小球肾炎等;型)以及
16、膜型肾小球肾炎等;升高升高见于传染性单核细胞增多症急性期、见于传染性单核细胞增多症急性期、MCV以及慢以及慢性乙肝。性乙肝。lCD4+/CD8+比值下降,比值下降,常见于常见于AIDS、瘤型麻风病、恶、瘤型麻风病、恶性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传染性单核细胞增多症、染性单核细胞增多症、MCV、血吸虫病等;、血吸虫病等;增高增高见于见于类风湿性关节炎活动期、类风湿性关节炎活动期、SLE、Sjogren综合征、重症综合征、重症肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。文档仅供参考,不
17、能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。淋巴细胞功能检测淋巴细胞功能检测lT细胞转化试验细胞转化试验l形态学法:形态学法:T细胞转化率细胞转化率60.1%7.6%l3H-TdR掺入法:掺入法:培养淋巴细胞用液体闪乐培养淋巴细胞用液体闪乐烁仪测量,记录每分钟脉冲数(烁仪测量,记录每分钟脉冲数(cpm)。)。lSI(刺激指数)(刺激指数)=PHA刺激管刺激管cpm均值均值/对照管对照管cpm均值均值lSI2为有意义,为有意义,2为淋巴细胞转化率降低。为淋巴细胞转化率降低。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。T细胞转化试验细胞转化试验l
18、临床意义临床意义l判断机体细胞免疫功能水平,降低判断机体细胞免疫功能水平,降低常见常见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者,于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者,如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬化等。化等。增高增高常见于常见于Down综合征。综合征。l估计疾病的疗效与预后估计疾病的疗效与预后文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l表面抗原:表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22和和CD40等等l表面受体:表面受体:B细胞抗原受体(细胞抗原受体(BCR)、细胞因)、细胞
19、因子受体(子受体(CKR)、补体受体()、补体受体(CR)与)与Fc受体受体等。等。lB细胞表面免疫球蛋白(细胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是)是B细细胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类型型Ig的单克隆抗体进行检测,可将的单克隆抗体进行检测,可将B细胞分为细胞分为SmIgG、SmIgM、SmIgA、SmIgD、SmIgE。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l参考值:参考值:免疫荧光法(羊抗人)(以携带该标免疫荧光法(羊抗人)(以携带该标志的细胞百分数表示
20、)志的细胞百分数表示)lSmIg+细胞总数:均值细胞总数:均值21%(16%28%)lSmIgG+细胞:均值细胞:均值7.1%(4%13%)lSmIgM+细胞:均值细胞:均值8.9%(7%13%)lSmIgA+细胞:细胞:均值均值2.2%(1%4%)lSmIgD+细胞:细胞:均值均值6.2%(5%8%)lSmIgE+细胞:细胞:均值均值0.9%(0%1.5%)文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l临床意义临床意义lSmIg+细胞增高细胞增高:常与常与B细胞恶性增殖有细胞恶性增殖有关,主要见于慢淋、毛细胞白血
21、病以及关,主要见于慢淋、毛细胞白血病以及巨球蛋白血症等。巨球蛋白血症等。lSmIg+细胞减低:细胞减低:主要与体液免疫缺陷有主要与体液免疫缺陷有关,常见于性联丙种球蛋白缺乏症、严关,常见于性联丙种球蛋白缺乏症、严重联合免疫缺陷病等。重联合免疫缺陷病等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测lB细胞分化抗原细胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22测定测定l参考值:参考值:FACS:CD19+细胞细胞11.74%3.73%l临床意义临床意义CD19为全部为全部B细胞共有的表面细胞共有的表面标志,标志,增
22、高增高见于见于B细胞系统的恶性种瘤,细胞系统的恶性种瘤,减低减低见于体液免疫缺陷病。见于体液免疫缺陷病。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。NK细胞活性测定细胞活性测定lNK细胞细胞能直接杀伤效应细胞,具有抗肿瘤、能直接杀伤效应细胞,具有抗肿瘤、抗感染和和免疫调节等功能,亦参与移植物排抗感染和和免疫调节等功能,亦参与移植物排斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。lLDH释放法释放法l参考值参考值细胞毒指数:细胞毒指数:27.5%52.5%l51Cr释放法释放法l参考值参考值NK细胞活性(自然杀伤率):细胞活性(自然杀伤
23、率):47.6%76.8%文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。NK细胞活性测定细胞活性测定l临床意义临床意义l活性升高活性升高常见于病毒感染的早期,常见于病毒感染的早期,Down综合征,接综合征,接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患者。者。l活性降低活性降低常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病,常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制剂治疗者等。和免疫抑制剂治疗者等。l肿瘤疗效观察及预后评价肿瘤疗效观察及预后评价l免疫调节功能免疫调节功能NK细胞可释放细胞可释放INF-、INF-和和
24、GM-CSF等细胞因子。等细胞因子。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。病毒性肝炎的实验诊断病毒性肝炎的实验诊断我国属病毒性肝炎高发区,全国有肝炎病人我国属病毒性肝炎高发区,全国有肝炎病人2700万万人,每年新发病例人,每年新发病例900万人,万人,HBsAg携带者达一亿二千携带者达一亿二千万人。慢性肝炎中有万人。慢性肝炎中有5070有活性性病毒复制,有活性性病毒复制,30发展为肝硬化,发展为肝硬化,510发展为肝癌,故我国又是原发展为肝癌,故我国又是原发性肝细胞癌的高发国家,慢性发性肝细胞癌的高发国家,慢性HBV携带者患肝癌危携带者患肝癌危险性较非携
25、带者高险性较非携带者高100倍。倍。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。HBV的形态结构的形态结构形态:形态:球形颗粒,直径约球形颗粒,直径约42nm外膜:外膜:厚约厚约7nm,HBsAg+脂类脂类内核(核衣壳):内核(核衣壳):直径直径27nm,HBcAg、DNAP、病毒病毒DNA、少量来源于宿主的磷酸激酶、少量来源于宿主的磷酸激酶文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。HBV在血清中的存在形式在血清中的存在形式完整的病毒颗粒完整的病毒颗粒(Dane颗粒颗粒),如前述,能复制,有传染,如前述,能复制,有传染 性;
- 配套讲稿:
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