洁净室区沉降菌检测基础标准操作专项规程.docx

名称：洁净室（区）沉降菌测试标准操作规程
共 6 页
编号：SOP-QC-002
版本号：00
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实施日期：
颁发部门：质量确保部
分发部门：质量总监、质量确保部、质量控制部
目标
制订标准洁净室（区）沉降菌测试方法，指导沉降菌测试工作。
范围
适适用于洁净室（区）沉降菌测定和验证。
责任
QC微生物室检验员负责洁净室（区）沉降菌测试，QC主管和QA部门负责对测试数据进行统计分析。
程序
1. 定义
1.1. 菌落：微生物培养后，由一个或多个微生物繁殖而形成微生物集落，简称CFU。
1.2. 沉降菌：经过自然沉降原理搜集在空气中活微生物粒子，经过专用培养基，在适宜条件下让其繁殖到可见菌落数。
1.3. 动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态设备在指定方法下进行，而且有指定人员根据规范操作状态。
2. 测试方法
2.1. 测试过程
2.1.1. 设备和培养基：恒温培养箱、购置预灌装TSA平皿或自制TSA平皿。
2.2. 测试条件
2.2.1. 洁净室（区）温度和相对湿度应和其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18~26℃，相对湿度在45%~65%为宜）。
2.2.2. 风速、压差应在合格范围内。
2.2.3. 动态测试。
2.3. 测试方法
2.3.1. 将准备好培养皿按采样点要求放置或放在沉降架上（约1.0m）。将采样台面取样位置或采样辅助设施表面消毒，打开培养皿，将培养皿盖置于已消毒位置，将培养皿置于培养皿盖上，使培养基表面充足暴露后，将培养皿盖盖上后倒置。
2.3.2. 在每一只培养皿上标识好具体取样位置及取样日期，将全部培养皿在QC微生物室进行培养观察。
2.4. 培养观察计数
2.4.1. 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养，在20~25℃培养箱中培养3天，30~35℃培养箱中培养2天后观察计数。
2.4.2. 每批培养基应有阴性对照试验，检验培养基础身是否污染。可每次选定2只培养皿作对照培养。
2.5. 计算
2.5.1. 平均菌落数=
M1＝1号培养皿菌落数
M2＝2号培养皿菌落数
Mn＝n号培养皿菌落数
n＝培养皿总数
2.5.2. 结果判定
2.5.2.1. 最终止果采取平均值。但每个碟菌落数亦不得多于标准要求。
2.5.2.2. 如有一个碟菌落数超出标准要求，平均却符合要求，也以不合格论。
2.5.2.3. 静态测试时，若某洁净室（区）内平均菌落数超出评定标准，则必需对此区域优异行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。
2.6. 注意事项
2.6.1. 若培养皿上有2个或2个以上菌落重合，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。
2.6.2. 采取一切方法预防人为原因对样本污染。
2.6.3. 因为细菌种类繁多，差异甚大，计数时通常见透射光于培养皿后面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并须注意细菌菌落和培养基沉淀物区分，必需时用显微镜判别。
2.6.4. 采样前应仔细检验每个培养皿质量，如发觉变质、破损或污染应剔除。
2.6.5. 对于沉降菌测试，符合最少采样点数时，还必需符合最小培养皿数。最少采样点数和最少培养皿见附表。
2.7. 日常监控
2.7.1. 对于沉降菌监控，宜设定纠偏限和警戒限 ，以确保洁净室（区）微生物浓度受到控制。应定时检测以检验微生物负荷和消毒剂效力，并做趋势分析。静态动态监控全部能够采取此方法。
2.7.2. 对于沉降菌取样频次。假如出现下列情况应考虑修改，在评定以下情况后，也应确定其它项目标检测频次：
2.7.2.1. 连续超出纠偏限和警戒限
2.7.2.2. 停工时间比估计长
2.7.2.3. 关键区域内发觉污染存在
2.7.2.4. 在生产期间，空气净化系统进行任何重大维修
2.7.2.5. 日常操作统计反应出倾向性数据
2.7.2.6. 消毒规程改变
2.7.2.7. 引发生物污染事故等
2.7.2.8. 当生产设备有重大维修或增加设备时
2.7.2.9. 当洁净室（区）结构或区域分布有重大变动时
2.8. 洁净车间采样点分布图详见《洁净区洁净度监控管理规程》。
2.9. 微生物试验室采样点分布图详见《微生物试验室环境测试规程》。

相关文件和统计
序号
文件/统计名称
文件/统计编号
备注
1
沉降菌测试统计
SOP-QC-002a-00

2
洁净区洁净度监控管理规程
SMP-QA-015

3
微生物试验室环境测试规程
SMP-QA-031

变更 /修订统计：
原版本
生效日期
此次变更/修订原因、依据及具体变更内容

附图： 最少采样点数目
面 积
m2
洁 净 度 级 别
A级
C级
D级
< 10
2~3
2
2
≥10～< 20
4
2
2
≥20～< 40
8
2
2
≥40～< 100
16
4
2
≥100～< 200
40
10
3
≥200～< 400
80
20
6
≥400～< 1000
160
40
13
≥1000～<
400
100
32
≥
800
200
63
注：对于A级单向流洁净室（区），包含A级工作台，面积指是送风口表面积。对于C级以上非单向流洁净室（区），面积指是指房间面积。

沉降菌测试统计
编号：SOP-QC-002a-00
测试人： 测试日期： 测试时间：
测试依据： 测试等级： 级
生化培养箱型号： 编号：________________使用期至：__________________
霉菌培养箱型号：_____________编号：________________使用期至：__________________
培养基批号 ： 起源： 使用期至：__________________
培养条件：
测试标准：
标准要求
等级
标准
警戒限
纠偏限

培养结果
测试区域
培养皿号
平均
结论
1
2

阴性对照

复核人： 复核日期：