日立L-8900全自动氨基酸分析仪简易统一标准操作作业规程.doc
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1、日立L-8900全自动氨基酸分析仪原则操作规程一. 目为规范日立L-8900全自动氨基酸分析仪基本操作、维护保养、异常解决程序,防止人为操作失误,保证氨基酸分析仪正常运转,特制定本程序。二. 合用范畴本程序合用于日立L-8900全自动氨基酸分析仪。三 责任1. 本程序实行者为氨基酸分析仪操作者,各实验室负责人对本程序实行状况进行监督。2. 寻常运营及维护、定期维护、定期点检及保养由氨基酸分析仪操作者负责。四. 内容1联机(1) 打开电脑。(2) 打开L-8900主机电源。(3) 双击桌面图标,进入1-1画面,双击图标,进入程序。1-1(4) 在菜单栏中依次点击和,浮现1-2画面,单击联机。大概
2、两分钟,初始化完毕。中Uninitialized变成Idle,图1-2变成了图1-3,各个组件可以进行控制了。初始化完毕后,分离柱温度逐渐上升,分离柱温度会升到50。 如果打开反映柱柱温控制,则温度大概20分钟升到135。1-21-3 2、手动各组件控制操作(1) 泵1和泵2点击,浮现2-1画面。设立泵1,流量0.1ml/分钟,B6 100%。点击打开泵1。泵打开后,泵背景颜色由灰色变为黄色。2-1点击,浮现2-2画面,设立泵2,流量0.1ml/分钟,R3 100%。点击打开泵2。泵打开后,泵背景颜色由灰色变为黄色。2-2(2)自动进样器点击,浮现2-3画面,设立Sampler Wash不少于
3、3次。2-3(3)分离柱柱温箱点击,浮现2-4画面,设立柱温50,设立ON,打开柱温箱。柱温箱打开后,背景颜色由灰色变为黄色。 2-4(4)反映柱柱温箱点击,浮现2-5画面,设立柱温135,设立ON,打开柱温箱。柱温箱打开后,背景颜色由灰色变为黄色。 2-5(5)钨灯点击,浮现2-6画面,设立ON,打开钨灯。钨灯打开后,背景颜色由灰色变为黄色。 2-63、编辑办法(1)Stand By 程序(a)依次点击、浮现3-1-1画面。3-1-1(b)选中,点击。再依次点击、,浮现3-1-2画面。3-1-2(c) 在设立中选中各个柱(也可以不选),别的参数默认。(d)将办法另存为Stand-By,文献名
4、及途径均可自选。注意最佳不要覆盖本来办法,最佳另存办法。(2)再生程序犹如Stand By 程序,只是选中而已。将办法另存为RG。(3)分析程序(a) 犹如Stand By 程序,选中,参数默认,将办法另存为Analyze。4、编辑Sequence (1)依次点击、,浮现4-1画面。选中,别的参数默认。4-1(2)点击,浮现4-2画面,依照需要填写各个参数(未知样品个数、未知样品重复次数等)。4-2(3)点击,浮现4-3画面,依照需要填写各个参数(标样和未知样品第一种瓶号,增量、进样体积等)。4-3(4)点击,浮现4-4画面,依照需要填写各个参数(标样品个数、标样重复次数等)。4-4(5)点击
5、,浮现4-5画面。4-5(6)通过复制、编辑,最后将Sequence编辑如图4-6所示。注意此时第一行是升温程序(Stand-By),第二行是再生程序(RG),两行进样体积均为0,Run Type是Unknown,第三行是原则样品,四行起是未知样。(7)将Sequence另存为Test。5、采集数据点击Control、Sequence Run,运营Sequence Test。数据采集完后,机器自动进入清洗程序。清洗一种小时后,自动关泵,关灯,关柱温箱。6、关机点击断开连接,关闭程序,关闭主机电源。7、试剂准备反映液R1、R2:醋酸钠(CH3COONa2H2O)、冰醋酸(CH3COOH)、茚三酮
6、(C9H6O4)、丙二醇甲醚(CH3CH(OH)CH2OCH3)、硼氢化钠 (NaBH4)缓冲液B1到B6:柠檬酸钠(Na3C6H5O72H2O)、柠檬酸(C6H8O7H2O)、氯化钠(NaCl)、无水乙醇(C2H5OH)、氢氧化钠(NaOH)、硫代双乙醇(硫二甘醇)(S(C2H4OH)2)、苯甲醇()、brij-35(聚氧乙烯十二烷基谜)、辛酸(C7H15COOH)试剂建议用优级纯。8出峰状况Asp: 天门冬氨酸 Thr:苏氨酸 Ser: 丝氨酸 Glu:谷氨酸 Pro: 脯氨酸 Gly:甘氨酸 Ala:丙氨酸 Cys:胱氨酸Val: 缬氨酸 Met:蛋氨酸 Ile: 异亮氨酸 Leu: 亮
7、氨酸Tyr: 酪氨酸 Phe:苯基丙氨酸 Lys:赖氨酸 NH3: 氨气His: 组氨酸 Trp:色氨酸 Arg:精氨酸9. 仪器使用注意事项(1)氮气压力:仪器需要压力为0.050.1Mpa,压力过高会损坏仪器。(2)为避免堵塞,注意泵1泵2打开顺序。先开泵1,再开泵2。泵1用B6100%,0.1ml/分钟;泵2用R3100%,0.1ml/分钟。(3)电脑禁止更改设立,禁止安装其她程序,禁止上网。注意避免染上病毒。因软件需要注册,如果操作系统发生故障,请告知天美公司。 (4)进样浓度范畴:0.410 nmol, 过高浓度会影响分析成果,且容易堵塞反映柱。(5)注意检查仪器泵压力与否正常。(6
8、)筹划长期不用可以用B5清洗泵流路。但最佳只清洗泵头,即开泵时最佳将排放阀打开。10. 样品前解决准备想做测试样品,在开动氨基酸分析仪之前,需要进行适合该项检测目解决,在这上分有两大系统,一种是将氨基酸以及和它关于连化合物为对象对游离氨基酸测定法(如下称生物液分析法),另一种是由蛋白质加水分解而得到氨基酸对它分析法(如下称蛋白质加水分解物分析法)在此对其中几种作简介。此外,作为原则请用0.45um过滤器对样品过滤。(1) 生物液分析法前解决:重要目是做氨基酸成分提取(萃取),除去蛋白质以及不溶性物质。(a) 血液 把血液用7,00010,000 rpm(700010000 G)离心分离15分钟
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