医学检验标记免疫对临床的新贡献.ppt
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1、标记免疫对临床的新贡献上海二医大瑞金医院卢湾分院南洋放免中心 许叔祥1.待测物质浓度与检测手段 临床化学分析床化学分析10-1210-910-610-310-0pg/mLng/mLm mg/mLmg/mLg/L免疫分析免疫分析Therapeutic DrugsThyroid HormoneFertility HormoneAllergyCancer MarkersInfectious DiseaseVitaminsSerum Proteins常量微量超微量2.HAPATITISCANCERFERTILITYPROTEINSTDMs/DRUGSTYROID,ANEMIAHBVHCVM107101
2、0-1510-4 g/L AFP FERCEA CA199 PRLHCG LH FSHGH MyoglobinRHF IgGC3 ASO CERTRF AAGQUI GEN AMI PHYFT3 FT4 Dig T3 T4TSH ProgImmunoassay Analyte Map3.放射免疫的创立l l1959 1959 美国美国Yalow&BersonYalow&Bersonl l1960 1960 英国英国 EkimsEkimsl l1977 1977 获诺贝尔获诺贝尔医学生物学医学生物学奖奖医学生物学超微量分析的里程碑4.放射免疫面临的挑战l l半衰期短,限制了半衰期短,限制了药药盒
3、使用寿命盒使用寿命l l由于由于标记标记物的不断物的不断变变化,化,带带来来药药盒批盒批间间、批内、批内较较大的大的差异,差异,标标准曲准曲线线无法保存无法保存备备用用l l反反应时间过长应时间过长(数小数小时时至至过过夜夜)l l结结果果测测量依靠量依靠时间时间累累计计,至少每一,至少每一样样品一分品一分钟钟其主要的缺陷是:l l理理论论和和实实践践证证明其分析的限度是明其分析的限度是1010-7-7分子分子/mLmL或或1010-12-12 g/mLg/mL,要再提高有困要再提高有困难难以上原因都造成放射免疫无法进行自动化分析5.新技术的挑战RIA面临新技术的挑战。但取代它的决不是微孔板的
4、发色酶标,因其技术指标尚不及放免。从90年代开始一些大型的实验室,标本量大的项目都已逐步应用各种非放免标记的自动化设备来取代放免分析,这是技术发展的必然规律。我们必须清醒地分析趋势,迎接新技术的挑战和带来新的曙光。6.标记免疫方法7.化学发光免疫分析仪8.不同系统的理论灵敏度l l比色法:10-10 molel lRIA:10-11 to 10-12 molel l荧光法:10-12 molel l发光法:10-15 molel lDELFIA:10-18 moleBIOTROL DIAGNOSTIC9.自动标记免疫分析的优点l l消除手工操作的消除手工操作的误误差差l l灵敏度高,灵敏度高,
5、稳稳定性好定性好l l速度快、当天速度快、当天报报告告l l特殊特殊项项目的目的测测定定 3 3rd-TSHrd-TSH、intact-HCGintact-HCG、F-PSAF-PSAl l实现实现短短时间时间反反馈馈(Short Turn-around Time)Short Turn-around Time)l l提高提高临临床床诊诊断效率和断效率和质质量,有效降低量,有效降低总总医医疗费疗费用用10.甲状腺功能测定战略l l6060年代年代 基基础础代代谢谢(BMR)BMR)蛋白蛋白结结合碘合碘(PBI)PBI)l l7070年代年代 T T3 3,T T4 4 TSH TSH 吸吸131
6、131I I试验试验l l8080年代年代 超敏超敏TSH FTTSH FT3 3,FTFT4 4 两次战略转移11.第三代超敏TSH12.TSH正常值(IU/mL)FT3,FT4正常值(pmol/L)13.14.甲状腺功能诊断新战略(Caldwell 1985)甲状腺功能检查TSH(U-S)降低升高正常降低降低正常升高正常FT4FT4FT3正常升高甲亢甲亢亚临床甲亢床甲亢继发甲减甲减正常正常亚临床甲减床甲减原原发甲减甲减15.整分子HCG16.HCG分子结构HCG系糖蛋白 M=39,000 由237个氨基酸组成 链 23,000 145 链 16,000 92链与垂体激素LH、FSH、TSH
7、相同链有91个氨基酸与LH的亚基相同,但羧基端最后的2830个氨基酸唯其独有。有生物活性的只是无裂口整分子的HCG17.18.裂口HCG和片段的代谢 裂口HCG(Nicked HCG)是由滋养层中巨噬细胞分泌的酶,裂解HCG而成;在非常妊娠时酶活性异常升高,使裂口HCG及各片段浓度增高。裂口HCG很不稳定,很快分解成游离和游离。血游离增高:滋养层细胞癌、唐氏综合征、睾丸癌 尿核心增高:唐氏综合征、先兆紫痫、卵巢癌、膀胱癌、宫颈癌、睾丸癌等19.HCG测定原理ACS 180 Dimension-HM*Anti-Anti-ACCESS DPC*Anti-2Anti-1RIA Anti-Anti-A
8、nti-*20.需要一种新的标记系统来帮助识别HCG测定的分子类型。目前,分析分析标记仅限于限于“完整完整HCG”,“总HCG”或者或者“HCG”,这是不够的,容易引起误解。缺口HCG算不算“完整HCG”呢?少了亚单位C端片段的HCG又算不算呢?非缺口HCG和游离真的就是“总HCG”吗?必必须标明我明我们真正要真正要测定的是没有缺口的整分子定的是没有缺口的整分子HCG,这是唯一具有生物活性的分子是唯一具有生物活性的分子。21.唐氏综合征的三联筛查Prenatal Screening for Downs SyndromePrenatal Screening for Downs Syndrome2
9、2.23.24.为什么要筛查唐氏征1:38001:580001:100001:70025.唐氏征患儿不仅体貌异常、智力低下,而且疾病繁多、寿命短暂。除患者自身痛苦外,给家庭和社会带来极大的精神和经济负担。目前还无法预防,更无法治疗,唯一有效的方法是进行产前筛查,明确诊断后,终止妊娠,防止唐氏儿的出生。唐氏征的唐氏征的产前前筛查不不仅是一个医学是一个医学问题,也是一个社会,也是一个社会问题;不;不仅有助于有助于家庭,也有助于国家。家庭,也有助于国家。26.AFP、HCG、uE3三联筛查的结果运算27.初始初始风险度度(年年龄特异性危特异性危险度度)LR(AFP)LR(HCG)LR(uE3)=总风
10、险度度总风险度度(合并危合并危险度度)计算算28.妊娠15-20周时抽血5mL测定AFP,HCG,uE3将孕妇的基本资料填写在申请单上OSB危险度1:1152电脑算出唐氏征的合并危险度怀疑NTD做胎儿超声波检查唐氏征儿筛查流程图待续29.唐氏征危险度1/270唐氏征危险度1/270以超声波确认孕周发阴性报告并追踪妊娠结果及由新生儿科医师来确认婴儿是否正常不符合符合发阳性报告并建议孕妇羊水穿刺,细胞染色体检查修订周数重新计算,若周数不足15周则待15周时再行检测母血重新计算正常异常追踪妊娠结果由新生儿科医师来确认婴儿是否正常遗传咨询及进一步处理30.恶性肿瘤的实验室诊断31.临床:病史、体征物理
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