中国水产微生态第一品牌山东宝来利来生物科技股份公司研究应用报告噬菌蛭弧菌的生物学作用及应用.doc

水产微生态第一品牌——山东宝来利来生物科技股份企业研究汇报
噬菌蛭弧菌生物学特征及在养殖实践中应用

噬菌蛭弧菌（Bdellovibrio bacteriovorus）是一类专门捕食细菌寄生性细菌，含有独特裂解细菌生物学特征，能够在较短时间内裂解水体中沙门氏菌属、志贺氏菌属、变形杆菌属、埃希氏菌属、假单胞菌属、欧文氏菌属、弧菌属等属种类，可将致病菌限制在较低水平上，同时还可有效地控制养殖水体COD、硫化物和氨氮存留量，所以，利用其这一特征对水产养殖水体生物净化和水产病原菌生物防控含有广泛发展前景，对开拓水产养殖动物疾病防治新路径含相关键意义。
一、噬菌蛭弧菌生物学特征
1、噬菌蛭弧菌形态特征和分布
噬菌蛭弧菌革兰氏染色阴性，单细胞，呈弧状或杆状，大小为(0.3～0.6)um×(0.8～1.2)um。在环境中噬菌蛭弧菌菌通常不利用周围营养物质，必需依靠宿主细胞进行生长、发育和繁殖，最终使宿主菌细胞裂解。

蛭弧菌在自然界分布较广，土壤、植物根际、河水、海水、湖水、井水及下水道污水中全部有蛭弧菌分布，并能从陆生动物、水生动物或人粪便中分离到蛭弧菌。但在清洁自来水、泉水中极难检出。
2、噬菌蛭弧菌宿主范围和裂解效果
迄今为止，噬菌蛭弧菌是中国唯一国家二类兽用微生态制剂。噬菌蛭弧菌对多种弧菌、气单胞菌、沙门氏菌、志贺氏菌、埃希氏菌、假单胞菌、绿脓杆菌、变形杆菌、欧文氏菌等含有裂解作用，有些对部分革兰氏阳性菌如金色葡萄球菌也能裂解。
宝来利来生物工程研究院于对三株噬菌蛭弧菌B1b-1、B1b-2、B1b-3在不一样条件下生长情况及裂解效果进行了试验，结果表明：噬菌蛭弧菌B1b-1、B1b-2、B1b-3在0~30‰盐度范围内，生长情况良好且差异不大，而盐度35~40‰时，蛭弧菌B1b-1、B1b-2、B1b-3生长受到抑制，盐度超出45‰时3株蛭弧菌停止生长。
蛭弧菌B1b-1、B1b-2、B1b-3对弧菌属等Gˉ致病菌含有很强裂解能力，而对芽孢杆菌、乳酸菌、光合细菌等水产益生菌无裂解作用。

3、噬菌蛭弧菌作用机理
噬菌蛭弧菌为细胞内寄生物，裂解宿主菌可分为附着、侵入、增值、释放等过程。完成这一增殖全过程约需4小时～6小时，复制子代数为6～36 pfu。

4、噬菌蛭弧菌噬菌条件
蛭弧菌对pH、温度等环境因子要求并不严格，在4℃～37℃和pH3.0～9.8条件下，全部有裂解作用。
5、噬菌蛭弧菌对水体净化作用
作为水体自净生物因子之一，噬菌蛭弧菌可清除河水中大肠杆菌、沙门氏菌和不凝集弧菌等，控制或降低致病菌对环境水源污染。除此之外，噬菌蛭弧菌对水中氨氮也有一定去除作用，将噬菌蛭弧菌和光合细菌结合使用对养殖生态环境有一定改善作用，关键反应在试验组池塘中COD、硫化物和氨氮得到有效控制，但对pH没有显著影响。充足溶氧有利于噬菌蛭弧菌裂解病原菌，提升水体透明度。
二、噬菌蛭弧菌在养殖生产中应用
山东宝来利来生物工程股份生产“菌克27”是一款以噬菌蛭弧菌为关键成份复合微生物制剂，在养殖生产中得到了广泛应用，其关键功效及使用效果以下：
1、生物防病
利用噬菌蛭弧菌广谱裂解病原微生物特征，“菌克27”经过多年养殖生产上实践应用，在控制病原菌数量、预防及早期诊疗细菌性疾病方面取得了良好效果，且对养殖动物无刺激、无毒害，对养殖水体不污染、不破坏。
大连某养殖厂，利用地下井水进行室内海参越冬保苗，保苗池面积均为25m3左右，水温11℃，充氧，6-7天倒池一次，投喂海参配合饲料+马尾藻+鼠尾藻+海泥。11月份出现化皮现象，使用抗生素后不见好转，后用菌克27强化型(10ml/m3)+低聚糖863（5g/m3）泼洒，连用3天后，化皮现象完全消失。后每3-5天使用一次菌克27(5ml/m3)，每7-10天使用一次低聚糖863(0.2g/m3)，而且每半月进行一次消毒处理，饵料每次投喂前用菌克27(10ml/m3)+渔歌（0.3%添加量）浸泡4-6h再投喂，海参苗长势良好，再无发病。
潍坊泊子土池养虾15亩，每口塘4-5亩，每亩放苗5万尾，养殖50天时发觉对虾有黑鳃现象，分析是细菌性引发，使用菌克27（虾蟹专用）1瓶2亩外泼，第三天对黑鳃消失，虾恢复正常。
河北鹿泉一养鱼户有10亩鱼苗池，6月份鱼苗死亡严重，眼睛突出带血、尾部发白，使用菌克27（淡水专用）每瓶1亩，连泼3天，疾病得到控制，最终治愈。
2、净化水质
噬菌蛭弧菌对水质净化作用关键表现在裂解腐败微生物以降低浑浊度和有害物质释放，另外，对水中氨氮、亚盐、H2S等也有一定清除作用。
海参高温季节保苗期间，在附着基上轻易出现红菌圈，为致病性细菌，易引发参苗化皮或状态差如不伸展、不吃食等，使用菌克27全池泼洒，首次使用剂量为10ml，第二天为5ml，通常在24~48h红菌圈消失，避免使用化学药品而产生老头苗、畸形苗而影响产量。
青岛胶南大菱鲆、舌鳎育苗期间，出苗后使用菌克27＋光合细菌，延缓倒池3-5天左右，降低倒池过程中洗苗对苗体造成伤害，大大提升了成活率。
玉田一养鱼户100亩水面，6月份时水质浑浊，水色不清爽，使用底巧＋菌克27（常规量），使用后第2天，水色清爽，后每个月使用1次，草鱼安全度夏，未发生疾病。
3、生物消毒
噬菌蛭弧菌也可用于水产动物苗种、饵料、水体定时消毒。
胶南抓1000头左右海参苗，放入池中一周后开始出现摇头、化刺、溃烂、肿嘴等现象，使用抗生素仍然没有效果。分析原因为投喂海泥未经处理，病原微生物大量繁殖造成，后使用强化型菌克27处理海泥，每50L海泥使用10ml剂量，在充氧条件下放置5-10小时，裂解海泥中大量致病弧菌和气单胞菌，遏制纤毛虫生长，降解藻毒素，以上现象得到改善，最终逐步消失。
广东湛江很多养殖户，在对虾养殖前期，每隔5-7天用菌克27定时泼洒消毒、预防疾病，透明度一直保持在30-50公分，保苗效果良好。