皮肤组织病理学常用实验诊断技术.ppt
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1、皮肤皮肤组织病理学常用病理学常用实验诊断断技技术n n(一)(一)(一)(一)皮肤组织病理检查是临床常用的诊断手段,其适皮肤组织病理检查是临床常用的诊断手段,其适皮肤组织病理检查是临床常用的诊断手段,其适皮肤组织病理检查是临床常用的诊断手段,其适应证包括:应证包括:应证包括:应证包括:n n1 1皮肤肿瘤、癌前期病变、角化性皮肤病、某些红斑性皮肤肿瘤、癌前期病变、角化性皮肤病、某些红斑性皮肤肿瘤、癌前期病变、角化性皮肤病、某些红斑性皮肤肿瘤、癌前期病变、角化性皮肤病、某些红斑性皮肤病等有高度诊断价值者。皮肤病等有高度诊断价值者。皮肤病等有高度诊断价值者。皮肤病等有高度诊断价值者。n n2 2大
2、疱性皮肤病、肉芽肿性皮肤病、等有诊断价值者。大疱性皮肤病、肉芽肿性皮肤病、等有诊断价值者。大疱性皮肤病、肉芽肿性皮肤病、等有诊断价值者。大疱性皮肤病、肉芽肿性皮肤病、等有诊断价值者。n n3 3某些深部真菌病等可找到病原体的皮肤病。某些深部真菌病等可找到病原体的皮肤病。某些深部真菌病等可找到病原体的皮肤病。某些深部真菌病等可找到病原体的皮肤病。(重点)(重点)(重点)(重点)n n(二)皮损的选择(二)皮损的选择(二)皮损的选择(二)皮损的选择 ,一般应选取未经治疗的成熟皮损。大一般应选取未经治疗的成熟皮损。大一般应选取未经治疗的成熟皮损。大一般应选取未经治疗的成熟皮损。大疱性皮肤病与感染性皮
3、肤病应选择新鲜皮损,环状损害应疱性皮肤病与感染性皮肤病应选择新鲜皮损,环状损害应疱性皮肤病与感染性皮肤病应选择新鲜皮损,环状损害应疱性皮肤病与感染性皮肤病应选择新鲜皮损,环状损害应选择活动边缘部分,结节性损害切取标本时应达到足够深选择活动边缘部分,结节性损害切取标本时应达到足够深选择活动边缘部分,结节性损害切取标本时应达到足够深选择活动边缘部分,结节性损害切取标本时应达到足够深度。取材时应包括一小部分正常组织,以便与病变组织对度。取材时应包括一小部分正常组织,以便与病变组织对度。取材时应包括一小部分正常组织,以便与病变组织对度。取材时应包括一小部分正常组织,以便与病变组织对照。应尽量避免切取腹
4、股沟、腋窝、关节和面部等部位皮照。应尽量避免切取腹股沟、腋窝、关节和面部等部位皮照。应尽量避免切取腹股沟、腋窝、关节和面部等部位皮照。应尽量避免切取腹股沟、腋窝、关节和面部等部位皮肤。肤。肤。肤。n n (重点)(重点)(重点)(重点)n n(三)取材方法(三)取材方法(三)取材方法(三)取材方法 手术切取法适用于各种要求与大小的皮手术切取法适用于各种要求与大小的皮手术切取法适用于各种要求与大小的皮手术切取法适用于各种要求与大小的皮肤标本,最为常用,应注意切缘锐利整齐,切口方向尽量肤标本,最为常用,应注意切缘锐利整齐,切口方向尽量肤标本,最为常用,应注意切缘锐利整齐,切口方向尽量肤标本,最为常
5、用,应注意切缘锐利整齐,切口方向尽量与皮纹一致,足够深、足够大,尽量夹持切下组织的两端,与皮纹一致,足够深、足够大,尽量夹持切下组织的两端,与皮纹一致,足够深、足够大,尽量夹持切下组织的两端,与皮纹一致,足够深、足够大,尽量夹持切下组织的两端,以避免夹坏组织影响观察。以避免夹坏组织影响观察。以避免夹坏组织影响观察。以避免夹坏组织影响观察。(重点)(重点)(重点)(重点)n n(四)标本处理(四)标本处理(四)标本处理(四)标本处理 切下的标本应立即放入切下的标本应立即放入切下的标本应立即放入切下的标本应立即放入9595乙醇或乙醇或乙醇或乙醇或1010甲醛液液中固定,如需做免疫病理,应立即将组织
6、甲醛液液中固定,如需做免疫病理,应立即将组织甲醛液液中固定,如需做免疫病理,应立即将组织甲醛液液中固定,如需做免疫病理,应立即将组织4 4保存。固定后标本应按照规定流程进行脱水、包埋、切片、保存。固定后标本应按照规定流程进行脱水、包埋、切片、保存。固定后标本应按照规定流程进行脱水、包埋、切片、保存。固定后标本应按照规定流程进行脱水、包埋、切片、染色,染色,染色,染色,(重点)(重点)(重点)(重点)n n真菌检查:真菌检查:真菌检查:真菌检查:1 1采集标本采集标本采集标本采集标本 浅部真菌的标本有毛发、皮屑、浅部真菌的标本有毛发、皮屑、浅部真菌的标本有毛发、皮屑、浅部真菌的标本有毛发、皮屑、
7、甲屑、痂等,标本在分离前常先用甲屑、痂等,标本在分离前常先用甲屑、痂等,标本在分离前常先用甲屑、痂等,标本在分离前常先用7575的乙醇消毒。深的乙醇消毒。深的乙醇消毒。深的乙醇消毒。深部真菌的标本可根据情况取痰、尿液、粪便、脓液、口腔部真菌的标本可根据情况取痰、尿液、粪便、脓液、口腔部真菌的标本可根据情况取痰、尿液、粪便、脓液、口腔部真菌的标本可根据情况取痰、尿液、粪便、脓液、口腔或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织,或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织,或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织,或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织,采集标本时应注意
8、无菌操作。采集标本时应注意无菌操作。采集标本时应注意无菌操作。采集标本时应注意无菌操作。(重点)(重点)(重点)(重点)n n2 2检查方法检查方法检查方法检查方法 方法主要有:(方法主要有:(方法主要有:(方法主要有:(1 1)直接涂片:为最简单而)直接涂片:为最简单而)直接涂片:为最简单而)直接涂片:为最简单而重要的诊断方法。取标本置玻片上,加一滴重要的诊断方法。取标本置玻片上,加一滴重要的诊断方法。取标本置玻片上,加一滴重要的诊断方法。取标本置玻片上,加一滴1010KOHKOH溶溶溶溶液,盖上盖玻片,在酒精灯火焰上稍加热,待标本溶解,液,盖上盖玻片,在酒精灯火焰上稍加热,待标本溶解,液,
9、盖上盖玻片,在酒精灯火焰上稍加热,待标本溶解,液,盖上盖玻片,在酒精灯火焰上稍加热,待标本溶解,轻轻加压盖玻片使标本透明即可镜检。可用于轻轻加压盖玻片使标本透明即可镜检。可用于轻轻加压盖玻片使标本透明即可镜检。可用于轻轻加压盖玻片使标本透明即可镜检。可用于检查有无菌检查有无菌检查有无菌检查有无菌丝或孢子,但不能确定菌种。丝或孢子,但不能确定菌种。丝或孢子,但不能确定菌种。丝或孢子,但不能确定菌种。n n(2 2)墨汁涂片:用于)墨汁涂片:用于)墨汁涂片:用于)墨汁涂片:用于检查隐球菌与其他有荚膜的孢子检查隐球菌与其他有荚膜的孢子检查隐球菌与其他有荚膜的孢子检查隐球菌与其他有荚膜的孢子。方法是取
10、一小滴墨汁与标本(如脑脊液)混合,盖上盖玻方法是取一小滴墨汁与标本(如脑脊液)混合,盖上盖玻方法是取一小滴墨汁与标本(如脑脊液)混合,盖上盖玻方法是取一小滴墨汁与标本(如脑脊液)混合,盖上盖玻片后直接镜检。片后直接镜检。片后直接镜检。片后直接镜检。n n3 3)培养检查:可)培养检查:可)培养检查:可)培养检查:可提高真菌检出率,并能确定菌种提高真菌检出率,并能确定菌种提高真菌检出率,并能确定菌种提高真菌检出率,并能确定菌种。n n变应原检测用于变应原检测用于变应原检测用于变应原检测用于确定过敏性疾病患者的致敏物质确定过敏性疾病患者的致敏物质确定过敏性疾病患者的致敏物质确定过敏性疾病患者的致敏
11、物质。(重点)(重点)(重点)(重点)n n(一)斑贴试验(一)斑贴试验(一)斑贴试验(一)斑贴试验(patch testpatch test)n n1 1适应证适应证适应证适应证 接触性皮炎、职业性皮炎、手部湿疹、化妆接触性皮炎、职业性皮炎、手部湿疹、化妆接触性皮炎、职业性皮炎、手部湿疹、化妆接触性皮炎、职业性皮炎、手部湿疹、化妆品皮炎品皮炎品皮炎品皮炎等。等。等。等。n n2 2方法方法方法方法 目前多用市售的铝制小室斑试器进行斑贴试验。目前多用市售的铝制小室斑试器进行斑贴试验。目前多用市售的铝制小室斑试器进行斑贴试验。目前多用市售的铝制小室斑试器进行斑贴试验。(重点)(重点)(重点)(重
12、点)n n3 3结果与意义结果与意义结果与意义结果与意义 n n 24244848小时后观察。小时后观察。小时后观察。小时后观察。阳性反应说明患者对受试物过阳性反应说明患者对受试物过阳性反应说明患者对受试物过阳性反应说明患者对受试物过敏,但应排除原发性刺激或其他因素所致的假阳性反应,敏,但应排除原发性刺激或其他因素所致的假阳性反应,敏,但应排除原发性刺激或其他因素所致的假阳性反应,敏,但应排除原发性刺激或其他因素所致的假阳性反应,假阳性反应者将受试物除去后,皮肤表现很快消失,而假阳性反应者将受试物除去后,皮肤表现很快消失,而假阳性反应者将受试物除去后,皮肤表现很快消失,而假阳性反应者将受试物除
13、去后,皮肤表现很快消失,而真真真真阳性反应除去受试物后阳性反应除去受试物后阳性反应除去受试物后阳性反应除去受试物后24244848小时内皮肤表现往往可增小时内皮肤表现往往可增小时内皮肤表现往往可增小时内皮肤表现往往可增强。强。强。强。n n阴性反应则表示患者对试验物无敏感性。阴性反应则表示患者对试验物无敏感性。阴性反应则表示患者对试验物无敏感性。阴性反应则表示患者对试验物无敏感性。(重点)(重点)(重点)(重点)n n异常组织病理变化按其层次可分为表皮病变、真皮病异常组织病理变化按其层次可分为表皮病变、真皮病异常组织病理变化按其层次可分为表皮病变、真皮病异常组织病理变化按其层次可分为表皮病变、
14、真皮病变和皮下组织病变等。变和皮下组织病变等。变和皮下组织病变等。变和皮下组织病变等。(了解)(了解)(了解)(了解)n n(一)表皮病变:(一)表皮病变:(一)表皮病变:(一)表皮病变:n n1 1角化过度(角化过度(角化过度(角化过度(hyperkeratosishyperkeratosis)角质层异常过角质层异常过角质层异常过角质层异常过度增厚度增厚度增厚度增厚。可以是绝对的,也可以是相对的。可以是绝对的,也可以是相对的。可以是绝对的,也可以是相对的。可以是绝对的,也可以是相对的。见于扁平见于扁平见于扁平见于扁平苔藓、掌跖角化病、鱼鳞病等。苔藓、掌跖角化病、鱼鳞病等。苔藓、掌跖角化病、鱼
15、鳞病等。苔藓、掌跖角化病、鱼鳞病等。n n皮肤性病常用实验室技术:皮肤性病常用实验室技术:皮肤性病常用实验室技术:皮肤性病常用实验室技术:(了解)(了解)(了解)(了解)n n免疫病理检查免疫病理检查免疫病理检查免疫病理检查n n1 1适应证适应证适应证适应证 大疱性皮肤病、结缔组织病等自身免疫性皮大疱性皮肤病、结缔组织病等自身免疫性皮大疱性皮肤病、结缔组织病等自身免疫性皮大疱性皮肤病、结缔组织病等自身免疫性皮肤病、某些感染性皮肤病与皮肤肿瘤的诊断和鉴别诊断。肤病、某些感染性皮肤病与皮肤肿瘤的诊断和鉴别诊断。肤病、某些感染性皮肤病与皮肤肿瘤的诊断和鉴别诊断。肤病、某些感染性皮肤病与皮肤肿瘤的诊
16、断和鉴别诊断。n n2 2方法与原理方法与原理方法与原理方法与原理 主要有直接免疫荧光法、间接免疫荧光主要有直接免疫荧光法、间接免疫荧光主要有直接免疫荧光法、间接免疫荧光主要有直接免疫荧光法、间接免疫荧光法和免疫酶标法。法和免疫酶标法。法和免疫酶标法。法和免疫酶标法。n n(1 1)直接免疫荧光法()直接免疫荧光法()直接免疫荧光法()直接免疫荧光法(direct direct immunofluorescenceimmunofluorescence,DIFDIF):):):):主要用于检测病变主要用于检测病变主要用于检测病变主要用于检测病变组织中存在的抗体或补体组织中存在的抗体或补体组织中存
17、在的抗体或补体组织中存在的抗体或补体。n n(2 2)间接免疫荧光法()间接免疫荧光法()间接免疫荧光法()间接免疫荧光法(indirect indirect immunofluorescenceimmunofluorescence,IIFIIF):):):):主要用于检测血清主要用于检测血清主要用于检测血清主要用于检测血清中存在循环的自身抗体,并可作抗体滴度测定。中存在循环的自身抗体,并可作抗体滴度测定。中存在循环的自身抗体,并可作抗体滴度测定。中存在循环的自身抗体,并可作抗体滴度测定。n n(3 3)免疫酶标记法:有多种不同的检测系统和方法,机)免疫酶标记法:有多种不同的检测系统和方法,机
18、)免疫酶标记法:有多种不同的检测系统和方法,机)免疫酶标记法:有多种不同的检测系统和方法,机制与间接免疫荧光法类似,制与间接免疫荧光法类似,制与间接免疫荧光法类似,制与间接免疫荧光法类似,主要标记细胞的某种特异性成主要标记细胞的某种特异性成主要标记细胞的某种特异性成主要标记细胞的某种特异性成分,用于肿瘤的鉴别诊断分,用于肿瘤的鉴别诊断分,用于肿瘤的鉴别诊断分,用于肿瘤的鉴别诊断。n n3 3结果分析:(结果分析:(结果分析:(结果分析:(1 1)直接免疫荧光:)直接免疫荧光:)直接免疫荧光:)直接免疫荧光:天疱疮皮损棘细胞天疱疮皮损棘细胞天疱疮皮损棘细胞天疱疮皮损棘细胞间间间间IgGIgG、I
19、gAIgA、IgMIgM或或或或C3C3呈网状沉积,皮肤基底膜带阳呈网状沉积,皮肤基底膜带阳呈网状沉积,皮肤基底膜带阳呈网状沉积,皮肤基底膜带阳性可见于红斑狼疮、大疱性类天疱疮,血管壁内免疫球蛋性可见于红斑狼疮、大疱性类天疱疮,血管壁内免疫球蛋性可见于红斑狼疮、大疱性类天疱疮,血管壁内免疫球蛋性可见于红斑狼疮、大疱性类天疱疮,血管壁内免疫球蛋白或补体沉积可见于血管炎和红斑狼疮等白或补体沉积可见于血管炎和红斑狼疮等白或补体沉积可见于血管炎和红斑狼疮等白或补体沉积可见于血管炎和红斑狼疮等。n n(2 2)间接免疫荧光:如)间接免疫荧光:如)间接免疫荧光:如)间接免疫荧光:如结缔组织病中抗核抗体的类
20、型可结缔组织病中抗核抗体的类型可结缔组织病中抗核抗体的类型可结缔组织病中抗核抗体的类型可分为周边型、均质型、斑点型与核仁型,不同型各有其分为周边型、均质型、斑点型与核仁型,不同型各有其分为周边型、均质型、斑点型与核仁型,不同型各有其分为周边型、均质型、斑点型与核仁型,不同型各有其特殊意义。红斑狼疮中的抗特殊意义。红斑狼疮中的抗特殊意义。红斑狼疮中的抗特殊意义。红斑狼疮中的抗dsDNAdsDNA抗体、天疱疮中的抗抗体、天疱疮中的抗抗体、天疱疮中的抗抗体、天疱疮中的抗棘细胞抗体棘细胞抗体棘细胞抗体棘细胞抗体等对疾病活动情况具有重要参考意义。等对疾病活动情况具有重要参考意义。等对疾病活动情况具有重要
21、参考意义。等对疾病活动情况具有重要参考意义。n n 滤过紫外线检查:滤过紫外线(滤过紫外线检查:滤过紫外线(滤过紫外线检查:滤过紫外线(滤过紫外线检查:滤过紫外线(WoodWood灯)是高压汞灯灯)是高压汞灯灯)是高压汞灯灯)是高压汞灯发射出的发射出的发射出的发射出的波长为波长为波长为波长为320320400nm400nm的光波,可用于色素异常的光波,可用于色素异常的光波,可用于色素异常的光波,可用于色素异常性皮肤病、皮肤感染与卟啉病的辅助诊断,也可观察疗效性皮肤病、皮肤感染与卟啉病的辅助诊断,也可观察疗效性皮肤病、皮肤感染与卟啉病的辅助诊断,也可观察疗效性皮肤病、皮肤感染与卟啉病的辅助诊断,
22、也可观察疗效。1 1方法方法方法方法 在暗室内将患处置于在暗室内将患处置于在暗室内将患处置于在暗室内将患处置于WoodWood灯下直接照射,观灯下直接照射,观灯下直接照射,观灯下直接照射,观察荧光类型。察荧光类型。察荧光类型。察荧光类型。n n2 2临床意义临床意义临床意义临床意义 假单胞菌属感染发出绿色荧光,铁锈色小假单胞菌属感染发出绿色荧光,铁锈色小假单胞菌属感染发出绿色荧光,铁锈色小假单胞菌属感染发出绿色荧光,铁锈色小孢子菌、羊毛状小孢子菌等感染为亮绿色荧光,黄癣菌感孢子菌、羊毛状小孢子菌等感染为亮绿色荧光,黄癣菌感孢子菌、羊毛状小孢子菌等感染为亮绿色荧光,黄癣菌感孢子菌、羊毛状小孢子菌
23、等感染为亮绿色荧光,黄癣菌感染为暗绿色荧光,马拉色菌感染为棕色荧光,紫色毛癣菌染为暗绿色荧光,马拉色菌感染为棕色荧光,紫色毛癣菌染为暗绿色荧光,马拉色菌感染为棕色荧光,紫色毛癣菌染为暗绿色荧光,马拉色菌感染为棕色荧光,紫色毛癣菌和断发毛癣菌感染无荧光。皮肤迟发性卟啉病患者尿液为和断发毛癣菌感染无荧光。皮肤迟发性卟啉病患者尿液为和断发毛癣菌感染无荧光。皮肤迟发性卟啉病患者尿液为和断发毛癣菌感染无荧光。皮肤迟发性卟啉病患者尿液为明亮的粉红橙黄色荧光,先天性卟啉病患者牙、尿、骨明亮的粉红橙黄色荧光,先天性卟啉病患者牙、尿、骨明亮的粉红橙黄色荧光,先天性卟啉病患者牙、尿、骨明亮的粉红橙黄色荧光,先天性
24、卟啉病患者牙、尿、骨髓发出红色荧光,红细胞生成性原卟啉病患者可见强红色髓发出红色荧光,红细胞生成性原卟啉病患者可见强红色髓发出红色荧光,红细胞生成性原卟啉病患者可见强红色髓发出红色荧光,红细胞生成性原卟啉病患者可见强红色荧光。荧光。荧光。荧光。性 病 检 查第四章第四章 皮肤性病常用实验诊断技术皮肤性病常用实验诊断技术n n性病检查:性病检查:n n(一)淋球菌检查;(一)淋球菌检查;n n(二)衣原体(沙眼)检查;(二)衣原体(沙眼)检查;n n(三)支原体(解脲)检查;(三)支原体(解脲)检查;n n(四)梅毒螺旋体检查;暗视野显微镜,快速血浆反应素(四)梅毒螺旋体检查;暗视野显微镜,快速
25、血浆反应素环状卡片试验(环状卡片试验(RPR)RPR),梅毒螺旋体颗粒凝集试验,梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)TPPA);(重点)(重点)n n(五)杜克雷嗜血杆菌;镜下鱼群状排列;(五)杜克雷嗜血杆菌;镜下鱼群状排列;n n(六)醋酸白试验:(六)醋酸白试验:HPVHPV感染上皮细胞产生角蛋白;感染上皮细胞产生角蛋白;n n(七)疥螨的检查:刮取物镜检;(七)疥螨的检查:刮取物镜检;n n(八)阴虱的检查:剪下阴毛用(八)阴虱的检查:剪下阴毛用75%75%酒精固定镜检。酒精固定镜检。醋酸白试验醋酸白试验第四章第四章 皮肤性病常用实验诊断技术皮肤性病常用实验诊断技术蠕形螨、疥螨、阴虱检查蠕
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