加入尿激酶的改良血栓弹力图用于脓毒症纤溶状态评价.pdf
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1、432D0I:10.13602/ki.jcls.2023.06.07加入尿激酶的改良血栓弹力图用于脓毒症纤溶状态评价临床检验杂志2 0 2 3年6 月第41卷第6 期ChinJClinLabSci,Jun.2023,Vol.41,No.6临床实验研究雷泽恺,白劲松,唐宁(1.华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科,武汉430 0 30;2.成都市新都区中医医院检验科,成都6 10 50 0)摘要:目的建立加入尿激酶(UK)的改良血栓弹力图(TEG)检测方法,评估其参数LY30反映脓毒症纤溶状态的应用价值。方法在TEG高岭土试剂中加入UK,提高TEG检测标本纤溶状态的敏感度。收集脓毒症患者和健
2、康人样本,检测UK-TEGLY30、D-二聚体(DD)、纤溶酶-纤溶酶抑制物复合体(PIC)等指标。根据国际指南评分,将脓毒症患者分为非脓毒症诱导凝血病(非 SIC)组、SIC 组和弥漫性血管内凝血(DIC)组,并随访 2 8 d 死亡率。结果 脓毒症组 UK-TEG LY30 低于健康人对照组,DD和PIC高于健康人对照组。DIC组LY30低于SIC组和非SIC组,DD高于SIC组。仅LY30=0%与2 8 d死亡独立相关。结论改良UK-TEG可有效评估脓毒症纤溶状态,LY30反映的低纤溶与死亡风险相关。关键词:血栓弹力图;纤溶;脓毒症中图分类号:R446脓毒症患者常出现以低纤溶状态为主要特
3、征的凝血异常 。轻度低纤溶有助于将感染灶局限在局部。然而,系统性的、过度的低纤溶状态也可能导致严重的凝血障碍,如脓毒症所致凝血病(sepsis-induced coagulopathy,SIC)或弥漫性血管内凝血(disseminated intravascular coagulation,DIC),进而影响患者预后2 。及时准确地评估脓毒症患者的纤溶状态,有助于指导临床治疗方案,改善患者结局。目前用于评价纤溶状态的常规临床指标包括D-二聚体(D-Dimer,DD)、纤溶酶-纤溶酶抑制物复合体(plasmin antiplasmin complex,PIC)及血栓弹力图(Thromboelas
4、togram,TEG)参数)。DD为凝血激活和继发纤溶亢进的共同标志物,其变化不能特异反映纤溶状态;PIC是评价纤溶亢进的特异性指标,但其评估纤溶抑制的可靠性还需进一步验证;TEG通过持续检测37 下全血标本的凝血全过程,可以动态观察反映内源凝血因子、纤维蛋白原、血小板及纤溶因子水平的一系列参数,快速评估凝血状态2 。血凝块最大振幅MA值后的30 min振幅占MA值的百分比LY30,反映了血凝块的溶解程度,健康人LY30参考区间为0%7.5%。常规TEG对纤溶状态变化的敏感性较低,难以区分正常和低纤溶状态3-4。尿激酶(urokinase,UK)可激活纤溶酶原生作者简介:雷泽恺,1990 年生
5、,男,主管技师,大学本科,主要从事临床检验工作。通信作者:唐宁,副主任技师,E-mail:。文献标志码:A成纤溶酶,促进纤维蛋白凝块溶解。向TEG试剂中加人UK,可获得正常样本更高的LY30值,提高TEG发现低纤溶的敏感性。既往研究采用加人UK的改良TEG(U K-T EG)评估脓毒症患者,发现UK-TEG的LY30与细胞损伤指标(乳酸、乳酸脱氢酶和胆红素)及患者死亡率相关4。本研究拟应用UK-TEG识别 SIC 和 DIC,并与 DD、PIC 等纤溶指标比较,评估其在脓毒症中的临床应用价值。1对象与方法1.1研究对象连续纳入2 0 2 2 年3月至6 月入住同济医院重症医学科、符合 seps
6、is 3.0 定义5 的临床诊断为脓毒症患者。根据国际血栓与止血学会(IST H)推荐的评分系统(表1)6-7 ,将纳人的脓毒症患者分为非脓毒症诱导凝血病(非 SIC)组、SIC组和DIC组。SIC评分包含了序贯器官衰竭评估(SO FA),用于描述多器官功能损害程度8 。排除标准包括:合并可显著影响纤溶功能的疾病或创伤史;已应用溶栓或抗纤溶药物;入院2 4h内死亡或出院。另选择体检健康者作为健康人对照组。最终纳人脓毒症患者 7 7 例,分为非 SIC 组 2 7 例、SIC组 2 1 例、DIC组2 9 例;健康人对照组40 例。本研究经同济医学院伦理委员会批准(批准文号:2 0 2 2伦审字
7、S025号)。临床检验杂志2 0 2 3年6 月第41卷第6 期表 1ISTH推荐的 SIC 与 DIC 评分系统项目评分PLT(10/L)21PT(INR)21Fib(g/mL)1DD/FDP32SOFA评分21诊断标准注:PT,凝血酶原时间;INR,国际标准化比值;SOFA,序贯器官衰竭评估。1.2标本采集与处理收集入组研究对象及体检健康者入院2 4h内的枸橡酸钠抗凝全血3.0 mL,用于 UK-TEG 检测。UK-TEG 检测后的剩余全血2000 xg离心10 min,收集血浆检测DD、PIC等纤溶指标及凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)、血小板
8、计数(PLT)等常规凝血指标,用于DIC 和SIC评分。1.3主要仪器与试剂UK-TEG检测采用TEG5000分析仪(美国血液技术公司)及配套试剂,加人注射用UK(南大药业公司);DD及凝血常规指标检测采用STA-RMAX血凝仪(法国STAGO公司)及配套试剂;PIC检测采用HISCL5000化学发光仪(日本SYSMEX公司)及配套试剂。所有试剂均按照说明书要求配置、分装和保存。1.4UK-TEG检测用5mL生理盐水溶解注射用尿激酶,制备110 U尿激酶储备液,取4L尿激酶储备液加入TEG高岭土试剂管中,再加人1mL待测,全血混匀,最终尿激酶浓度为8 0 U/mL。然后从试剂管中吸取340 L
9、标本加入TEG反应杯,再加人2 0 L氯化钙,最后按照高岭土TEG操作流参数非 SIC 组(n=27)年龄(岁)54.420.7性别比(男/女)47/30SOFA评分5(3,6)28 d死亡率(%)24.7UK-TEG LY30(%)0.2(0,9.2)PIC(g/mL)1.05(0.53,1.43)DD(g/mL)4.47(2.30,8.64)PLT(10%/L)84(40,166)PT-INR1.470.55注:&,脓毒症患者组与健康人对照组比较;*,与非SIC组比较,P0.05;#,与SIC组比较,P0.05。Chin J Clin Lab Sci,Jun.2023,Vol.41,No.
10、6DICSIC5010050,100100,1.4延长3 s,1.2,1.454表3脓毒症患者与健康人对照者间基本信息及凝血参数比较脓毒症患者组全部(n=77)SIC 组(n=21)53.623.453.5 20.414/1314/74(3,5)5(3,6)11.128.6*5.6(0.7,16.6)0.2(0,10.5)1.10(0.66,1.27)0.72(0.45,1.26)5.04(2.28,7.03)2.30(1.45,4.04)129(70,214)144(95,187)1.160.111.460.28*433程,在TEG5000分析仪上完成检测。1.5UK-TEG性能评价(1)批
11、内精密度:选取健康人和脓毒症患者血浆各10 份,混合后每水平检测10次UK-TEG。(2)批间精密度:选取正常和异常TEG质控品各1份,连续10 d检测UK-TEG。(3)参考区间:选取40 份健康人样本检测UK-TEG,以中位数的95%置信区间确定LY30参考区间上下限。1.6统计学分析用SPSS21.0统计软件进行。正态分布变量采用t检验,以xs表示;非正态分布变量采用Mann-Whitney U检验,以M(P2 5,Pr s)表示。分类变量采用卡方检验。ROC曲线评估变量的判断阈值及敏感性、特异性。Logistic 回归分析变量与2 8 d死亡率的相关性。以P0.05)。3组及健康人对照
12、组间各参数比较见表3。P值&DIC 组(n=29)(n=40)55.718.943.315.319/1026/145(4,7)*031.0*00(0,0.1)*66.2(51.5,74.3)1.15(0.43,1.79)0.41(0.36,0.51)5.95(3.36,16.91)#0.22(0.22,0.24)47(29,67)*#203(190,231)1.77 0.76*0.99 0.06J基于40 例水平2(毒症标本)12.311.5健康人对照组0.0160.591一0.0020.0010.0010.0010.0010.001434图1展示并比较了3组脓毒症患者组及健康人对照组间纤溶参
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