临床微生物检验标本采集与运送.ppt
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1、临临床微生物床微生物检验标检验标本采集与运送本采集与运送徐州市第六人民医院检验科 许峰2024/5/26 周日1.“正确的微生物学正确的微生物学检验始于正确的始于正确的标本采集。本采集。临床医床医师、护士及士及检验技技师都必都必须通通晓其要其要领。”著名的著名的临床微生物床微生物检验专著著Manual of Clinical Microbiology 主主编 Patrick Murray2024/5/26 周日2.目录DIRECTORYDIRECTORY痰液痰液标标本采集本采集与运送与运送02PARTPART血液血液标标本采集本采集与运送与运送01PARTPART尿液尿液标标本采集本采集与运送
2、与运送03PARTPART其它其它标标本采集本采集与运送与运送04PARTPART2024/5/26 周日3.01PARTPART血液血液血液血液标标本采集本采集本采集本采集与运送与运送与运送与运送2024/5/26 周日4.血液血液血液血液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送01PARTPART(一)、血培养(一)、血培养检测采血指征采血指征临床上疑床上疑为败血症、血症、脓毒血症或其他血液感染的患者:毒血症或其他血液感染的患者:1.发热(38)或低温()或低温(36)、2.寒寒战3.白白细胞增多(胞增多(10109/L,特,特别有有“核左移核左移”未成熟的或杆状核白未成熟的或
3、杆状核白细胞增多)胞增多)4.粒粒细胞减少(成熟的多核白胞减少(成熟的多核白细胞胞1109/L)5.血小板减少血小板减少 6皮肤粘膜出血皮肤粘膜出血 7昏迷、休克昏迷、休克 8多器官衰竭多器官衰竭 9.CRP升高升高在在评估可疑新生儿估可疑新生儿败血症血症时,除,除发热或低或低烧外,很少培养出外,很少培养出细菌,菌,应该补充尿液和充尿液和脑脊液培养。脊液培养。对入院危重感染患者未入院危重感染患者未进行系行系统性抗菌性抗菌药物治物治疗之前,之前,应及及时采集血培养采集血培养。血液血液血液血液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送01PARTPART 1.皮肤消毒程序皮肤消毒程序:严
4、格格执行三步法行三步法(防止皮肤寄生菌防止皮肤寄生菌污染)染)(1)用)用75%酒精擦拭静脉穿刺部位酒精擦拭静脉穿刺部位30秒以上,待干;秒以上,待干;(2)然后)然后10%碘伏作用碘伏作用60秒,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达秒,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上,待干;以上,待干;(3)最后用)最后用75%酒精脱碘,待酒精酒精脱碘,待酒精挥发干燥后采血。干燥后采血。新生儿及新生儿及对碘碘过敏的患者,只能用敏的患者,只能用75%酒精消毒酒精消毒60秒,待穿刺部位酒精秒,待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。干燥后穿刺采血。2.血培养瓶消毒程序:血培养瓶消毒程序:(1)用)用
5、75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,作用酒精消毒血培养瓶橡皮塞,作用60秒。秒。(2)用无菌)用无菌纱布或无菌棉布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余的酒精,然后注入血液。清除橡皮塞表面剩余的酒精,然后注入血液。(二)、血培养(二)、血培养检测消毒程序消毒程序要求:要求:严格无菌操作,不允格无菌操作,不允许在皮肤消毒后用手按在皮肤消毒后用手按压静脉,除非静脉,除非带有无菌手套。有无菌手套。不推荐采血和接种血培养瓶更不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器注射器针头,采用真空采血装置能降低,采用真空采血装置能降低污染率。染率。说明:明:无无论采用何种采血方法,血培养可接受的采用何种采血方法,血培养可接受的污染率通常
6、是染率通常是3%。血液血液血液血液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送01PARTPART(三)血培养(三)血培养标本采集和运送要求本采集和运送要求1.采集采集时间要求:要求:对怀疑菌血症、真菌血症的患者,在考疑菌血症、真菌血症的患者,在考虑使用使用抗菌抗菌药物之前,物之前,应立即采集血培养立即采集血培养标本。必本。必须同同时或或间隔短隔短时间内采集内采集2套以上血培养套以上血培养标本。本。说明:明:实验数据表明数据表明细菌入血后菌入血后约1小小时,寒,寒战和和发烧开始出开始出现2小小时内,此内,此时为采集血培养采集血培养标本本进行病原菌行病原菌培养的最佳培养的最佳时机。机。在
7、不同的在不同的时间点采血只有在以下情点采血只有在以下情况才有必要:疑似感染性心内膜炎或其他血管内(如况才有必要:疑似感染性心内膜炎或其他血管内(如导管相关性感染)感染患者的管相关性感染)感染患者的连续性菌血症。性菌血症。血液血液血液血液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送01PARTPART(三)血培养(三)血培养标本采集和运送要求本采集和运送要求2.采集部位采集部位 要求:要求:从两从两侧上肢静脉采血,上肢静脉采血,“双瓶双双瓶双侧”采血培养。必要采血培养。必要时从从下肢静脉采血做第三套血培养。下肢静脉采血做第三套血培养。说明:明:不建不建议采集:采集:(1)动脉血,因其脉血
8、,因其诊断价断价值没有比静脉血更大;没有比静脉血更大;(2)静脉留置)静脉留置导管,因其常伴有高管,因其常伴有高污染率。染率。如果必如果必须从留置从留置导管管内采血(如内采血(如怀疑疑导管相关性感染等),也管相关性感染等),也应同同时从外周静脉采集另从外周静脉采集另外一个血培养外一个血培养标本,以帮助阳性本,以帮助阳性结果的判果的判读。所所谓“双瓶双双瓶双侧”,是指从一个部位采血接种一套培养瓶,再从,是指从一个部位采血接种一套培养瓶,再从另一部位采血接种另一套培养瓶。(通常是双臂)另一部位采血接种另一套培养瓶。(通常是双臂)一次静脉采血注入到多个培养瓶中一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单个
9、血培养。个血培养。血液血液血液血液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送01PARTPART(三)血培养(三)血培养标本采集和运送要求本采集和运送要求3.采血量采血量要求:要求:成年患者推荐的采血量成年患者推荐的采血量为每瓶每瓶8-10ml,儿童患者推荐,儿童患者推荐的采血量的采血量为每瓶每瓶1-5ml,新生儿,新生儿0.5ml,但,但不不应超超过患儿患儿总血血量的量的1%。说明:明:血血标本采集的量是影响本采集的量是影响检出率的最重要的因素。成人血出率的最重要的因素。成人血培养采血量在培养采血量在230ml之之间,病原菌,病原菌检出率与采血量成正比例出率与采血量成正比例增增长。
10、每增加。每增加1ml的血液,病原菌的的血液,病原菌的检出率增加出率增加3.2%。儿童。儿童患者因患者因为血液中病原菌血液中病原菌浓度度较高,血培养量无需等同于成人。高,血培养量无需等同于成人。对血液病患者或者血容量相血液病患者或者血容量相对较低的患者建低的患者建议使用儿童瓶来减使用儿童瓶来减少血液的采集量增加病原菌的少血液的采集量增加病原菌的检出率。出率。血液血液血液血液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送01PARTPART(三)血培养(三)血培养标本采集和运送要求本采集和运送要求4.采集次数采集次数要求:要求:对怀疑菌血症、真菌血症的成人患者,推荐同疑菌血症、真菌血症的成人
11、患者,推荐同时采集采集23套(不同部位)血培养套(不同部位)血培养标本。(即双瓶双臂同本。(即双瓶双臂同时采集血培养采集血培养标本)。本)。婴幼儿患者,推荐同幼儿患者,推荐同时采集采集2次(不同部位)血培养次(不同部位)血培养标本。本。说明:明:在采集血培养后的在采集血培养后的2-5天内,无需重复采集血培养。只有在天内,无需重复采集血培养。只有在怀疑感染性心内膜炎或疑感染性心内膜炎或其它血管内感染(如其它血管内感染(如导管相关性感染)管相关性感染)时,才有必要,才有必要间隔多次采集血培养。隔多次采集血培养。5.运送要求运送要求要求:要求:(1)采集后的血培养瓶)采集后的血培养瓶应立即送往立即送
12、往实验室,室温放置不要超室,室温放置不要超过2小小时。(2)血培养瓶在接种前和接种后均)血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏和冷不得冷藏和冷冻。说明:明:血培养瓶冷藏或冷血培养瓶冷藏或冷冻会将一些微生物会将一些微生物杀灭,将装着液体的容器冰,将装着液体的容器冰冻也会使容器破裂。也会使容器破裂。02PARTPART痰液痰液痰液痰液标标本采集本采集本采集本采集与运送与运送与运送与运送2024/5/26 周日11.痰液痰液痰液痰液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送02PARTPART(一)、痰液(一)、痰液检测采集指征采集指征1.凡是凡是发热、咳嗽和咳痰,痰呈、咳嗽和咳痰,痰呈脓性、
13、粘稠或血性,并伴有胸痛、气急,性、粘稠或血性,并伴有胸痛、气急,肺部肺部闻及湿及湿罗音,外周白音,外周白细胞胞总数及中性粒数及中性粒细胞比例明胞比例明显增高,增高,X线检查提示肺部有炎性浸提示肺部有炎性浸润或胸腔或胸腔积液,甚至出液,甚至出现感染性休克和呼吸衰竭等患感染性休克和呼吸衰竭等患者,者,应采集痰液或下呼吸道采集痰液或下呼吸道标本。本。2.对可疑烈性呼吸道可疑烈性呼吸道传染病(如染病(如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等)患者采集、肺炭疽、肺鼠疫等)患者采集检验标本本时必必须注意生物安全防注意生物安全防护。痰液痰液痰液痰液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送02PARTPART
14、(二)、采集方法(二)、采集方法1.自然咳痰法自然咳痰法 以以清晨第一口痰清晨第一口痰为好。用清水反复漱口后,用力咳出呼吸道好。用清水反复漱口后,用力咳出呼吸道深部的痰深部的痰(或可(或可轻拍背部),直接置于无菌容器中(采集量拍背部),直接置于无菌容器中(采集量1ml),),尽快送尽快送检。痰量极少。痰量极少或痰或痰浓不易咳出者者可用不易咳出者者可用4510%氯化化钠液液雾化吸入化吸入导痰。不能及痰。不能及时送送检的的标本,室温保存本,室温保存2小小时。要求采到肺深部的痰液,。要求采到肺深部的痰液,切勿混入唾液及鼻咽切勿混入唾液及鼻咽分泌物分泌物。在抗生素在抗生素应用前采集痰用前采集痰标本本;
15、标本采集后本采集后12h内必内必须立即立即进行行实验室室处理;理;取取标本前本前应摘去牙托,清摘去牙托,清洁口腔如刷牙和漱口口腔如刷牙和漱口;深咳,采集深咳,采集标本本过程中要有程中要有专业的医的医务人人员指指导;对于于细菌性肺炎,痰菌性肺炎,痰标本送本送检每天每天1次,次,连续23天;不建天;不建议24小小时内多次内多次采集,除非痰液外采集,除非痰液外观性状改性状改变;怀疑分枝杆菌感染者,疑分枝杆菌感染者,应连续收集收集3天清晨痰液送天清晨痰液送检。痰液痰液痰液痰液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送02PARTPART(二)、采集方法(二)、采集方法2.小儿取痰法小儿取痰法
16、 用弯用弯压舌板向后舌板向后压舌,用棉拭子深入咽部,小舌,用棉拭子深入咽部,小儿儿经压舌刺激咳嗽舌刺激咳嗽时,可,可喷出肺部和气管分泌物,出肺部和气管分泌物,粘在棉拭子上送粘在棉拭子上送检。幼儿。幼儿还可用手指可用手指轻叩胸骨柄叩胸骨柄上方,以上方,以诱发咳痰。咳痰。3.支气管支气管镜采集法采集法 -经支气管支气管镜直接吸引直接吸引 -支气管肺泡灌洗支气管肺泡灌洗 -防防污染染样本毛刷本毛刷痰液痰液痰液痰液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送02PARTPART(三)、注意事(三)、注意事项1.痰痰标本不能及本不能及时送送检者,者,可可暂存存4冰箱冰箱。室温下耽室温下耽搁数小数
17、小时,定植于口咽部的非致病菌,定植于口咽部的非致病菌过度生度生长而肺炎而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌检出率出率则明明显降低。降低。2.在在临床上咳痰仍是床上咳痰仍是诊断肺部感染最常用的断肺部感染最常用的标本,但本,但咳痰也最易被口咽部正常菌群咳痰也最易被口咽部正常菌群污染。染。痰液痰液标本的本的细菌学菌学检验,必,必须区分是病原菌区分是病原菌还是来自上呼吸道的正常菌群。是来自上呼吸道的正常菌群。经过洗洗涤处理的痰液或理的痰液或自气管自气管镜采集及气管穿刺所采集及气管穿刺所获标本,本,结果比果比较可靠。可靠。3.由于口腔和咽部存在大量的革由于口腔和咽部存在大量的
18、革兰阳性和革阳性和革兰阴性阴性厌氧氧细菌,而且缺乏可靠的方法区分它菌,而且缺乏可靠的方法区分它们究究竟是致病菌竟是致病菌还是定植菌,因此是定植菌,因此不主不主张对痰液痰液标本本进行行厌氧菌培养氧菌培养。4.约有有1/41/2肺部感染患者可能肺部感染患者可能发生菌血症,建生菌血症,建议同同时做血培养。做血培养。03PARTPART尿液尿液尿液尿液标标本采集本采集本采集本采集与运送与运送与运送与运送2024/5/26 周日16.尿液尿液尿液尿液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送03PARTPART(一)、尿培养(一)、尿培养标本送本送检指征指征1.有典型的尿路感染症状;有典型的尿
19、路感染症状;2.有肉眼有肉眼脓尿或血尿;尿或血尿;3.尿常尿常规检查白白细胞或胞或亚硝酸硝酸盐阳性;阳性;4.有不明原因的有不明原因的发热,无其他局部症状;,无其他局部症状;5.留置留置导尿管的患者出尿管的患者出现发热;6.膀胱排空功能受膀胱排空功能受损;7.泌尿系泌尿系统疾病手疾病手术前;前;8.有尿路感染症状者,前次培养有尿路感染症状者,前次培养结果阴性或抗菌治果阴性或抗菌治疗48h后仍持后仍持续发热。9.抗生素停抗生素停药后,感染症状再次出后,感染症状再次出现。尿液尿液尿液尿液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送03PARTPART(二)、采集方法(二)、采集方法标本采集
20、本采集应在使用抗生素之前,避免消毒在使用抗生素之前,避免消毒剂污染染标本。本。1清清洁中段尿中段尿 留取清晨清留取清晨清洁中段尿中段尿标本,先用肥本,先用肥皂水皂水仔仔细清洗会阴部及尿道口周清洗会阴部及尿道口周围,再用清水冲洗;,再用清水冲洗;将前段尿弃去,留取中段尿将前段尿弃去,留取中段尿10ml左右于无菌容器内,左右于无菌容器内,立即加盖送立即加盖送检,2h内接种内接种。该方法方法简单、易行,是、易行,是最常用最常用的尿的尿标本收集方法。本收集方法。2.直接直接导尿尿 按常按常规方法方法对会阴局部会阴局部进行消毒后,用行消毒后,用导尿管直接尿管直接经尿道插入膀胱,尿道插入膀胱,获取膀胱尿液
21、,取膀胱尿液,可减少尿液可减少尿液标本本污染,准确地反映膀胱感染情况。但有可能下尿道染,准确地反映膀胱感染情况。但有可能下尿道细菌菌进入膀胱,入膀胱,导致致继发感染,感染,一般不提倡使用一般不提倡使用。尿液尿液尿液尿液标标本采集与运送本采集与运送本采集与运送本采集与运送03PARTPART(二)、采集方法(二)、采集方法3耻骨上膀胱穿刺耻骨上膀胱穿刺 无菌操作,无菌取尿,使用无菌注射器直接从耻骨上无菌操作,无菌取尿,使用无菌注射器直接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液,皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液,是是评估膀胱内估膀胱内细菌感染的菌感染的“金金标准准”方法,方法,主主要用于要用于厌氧菌培养或留取氧
22、菌培养或留取标本困本困难的的婴儿尿儿尿标本的采集本的采集。4小儿收集包小儿收集包 无自控能力的小儿可用收集包收集尿液,无自控能力的小儿可用收集包收集尿液,这种装置由于很种装置由于很难避免会阴部菌群避免会阴部菌群污染染产生假阳性,所以生假阳性,所以只有在只有在检验结果果为阴性阴性时才有意才有意义。如果如果检验结果果为阳性,阳性,应结合合临床床进行分析,必要行分析,必要时可使用膀胱上穿刺或可使用膀胱上穿刺或导尿法留取尿法留取标本本进行复行复检。5留置留置导尿管收集尿液尿管收集尿液 用用导尿管尿管导取取10-15ml尿液置尿液置灭菌容器内送菌容器内送检。长期留置期留置导尿管者,尿管者,应在更在更换新
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