动物细胞培养.ppt
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1、专题2.2动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段动物细胞工程常用的技术手段动物细胞培养动物细胞培养基础基础动物细胞融合动物细胞融合生产单克隆抗体生产单克隆抗体 核移植核移植纳纳归归题题问问一、动物细胞培养一、动物细胞培养为什么要进行动为什么要进行动物细胞培养?物细胞培养?材料一:在治疗烧伤病人时,通常是取病人材料一:在治疗烧伤病人时,通常是取病人的健康皮肤进行自体移植。对于大面积烧伤的健康皮肤进行自体移植。对于大面积烧伤的病人,自体健康皮肤非常有限,使用他人的病人,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,且会产生排斥反应。怎样皮肤来源又不足,且会产生排斥反应。怎样才能获得大量的自体健康皮
2、肤呢?才能获得大量的自体健康皮肤呢?材料二:许多动物细胞能分泌蛋白质,如抗材料二:许多动物细胞能分泌蛋白质,如抗体等。但是,单个细胞产生的蛋白质很少,体等。但是,单个细胞产生的蛋白质很少,怎样才能获得大量的分泌蛋白呢?怎样才能获得大量的分泌蛋白呢?境境情情设设创创、什么是动物细胞培养?、什么是动物细胞培养?、具体培养过程、具体培养过程(1 1)为什么要把动物组织分散成单个细胞?)为什么要把动物组织分散成单个细胞?完成完成4444页两个问号。页两个问号。(2 2)什么叫细胞贴壁?什么叫接触抑制?)什么叫细胞贴壁?什么叫接触抑制?(3 3)什么叫原代培养?什么叫传代培养?)什么叫原代培养?什么叫传
3、代培养?(4 4)总结出具体的培养过程?)总结出具体的培养过程?习习学学主主自自任务:阅读教材第任务:阅读教材第44-4644-46页第一段页第一段时间:时间:4 4分钟分钟问题:问题:就是从动物机体中取出就是从动物机体中取出相关组织相关组织,将,将它分散成它分散成单个细胞单个细胞,然后,然后,放在放在适宜的培适宜的培养基养基中,让这些细胞中,让这些细胞生长和繁殖生长和繁殖。1 1、概念:、概念:一、动物细胞培养一、动物细胞培养纳纳归归题题问问2 2、培养过程:、培养过程:纳纳归归题题问问为什么要把动物组织分散成单为什么要把动物组织分散成单个细胞?怎样分散成单个细胞个细胞?怎样分散成单个细胞的
4、?完成的?完成4444页两个问号页两个问号成块的组织中细胞与细胞靠在成块的组织中细胞与细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长一起,彼此限制了细胞的生长和增殖。另外,单个细胞所需和增殖。另外,单个细胞所需的营养容易供应,其代谢废物的营养容易供应,其代谢废物容易排出。所以分散成单个细容易排出。所以分散成单个细胞后培养。胞后培养。用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜白质。胃蛋白酶作用的适宜pHpH约为约为2 2,当,当pHpH大于大于6 6时,胃时,胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适
5、宜环境pHpH为为7.27.28.48.4。多数动物细胞培养的适宜。多数动物细胞培养的适宜pHpH为为7.27.27.47.4,胃蛋白,胃蛋白酶在此环境中没有活性,而胰蛋白酶在此环境中活性较酶在此环境中没有活性,而胰蛋白酶在此环境中活性较高,因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。高,因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。4444页两个小问题的答案页两个小问题的答案 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外,长时间的胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外,长时间的作用也会消化细胞膜蛋白,对细胞有损伤作用,因此必作用也会消化细胞膜蛋白,对细胞有损伤作用,因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。须控制好胰蛋白酶的消
6、化时间。纳纳归归题题问问3 3、几个重要的概念、几个重要的概念l细胞贴壁细胞贴壁悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层单层)。要求:要求:培养瓶(皿)内表面光滑、无培养瓶(皿)内表面光滑、无毒、易于贴附。毒、易于贴附。纳纳归归题题问问l接触抑制接触抑制当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。制。纳纳归归题题问问l原代培养原代培养l传代培养传代培养贴满瓶壁贴满瓶壁的的细胞需要重新用细胞需要重新用胰蛋白酶胰蛋白酶等处理等处理让细胞继续培养,
7、这样的培养过程通常被称让细胞继续培养,这样的培养过程通常被称为传代培养。(即从原培养瓶内转接到新的为传代培养。(即从原培养瓶内转接到新的培养瓶内过程。)培养瓶内过程。)通常将动物组织消化后的初次培养称为通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。原代培养。纳纳归归题题问问l 细胞株细胞株 传到传到40-5040-50代后有代后有部分细胞遗传物质发生部分细胞遗传物质发生了变化了变化,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,可能在培养条件下无限制的传代下去。可能在培养条件下无限制的传代下去。从原代培养细胞群中筛选出进行传代从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞,能传到培
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