血液成分制备及保存(ppt文档).ppt
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1、血液成分制血液成分制备及其保存及其保存 国际输血协会曾经指出:国际输血协会曾经指出:“2020世纪世纪7070年代是输血史年代是输血史上发生重大变革的上发生重大变革的1010年,其中最大成就是成分输血代年,其中最大成就是成分输血代替全血输血。替全血输血。”成分输血是输血技术发展的总趋势,也是输血现代成分输血是输血技术发展的总趋势,也是输血现代化的重要标志之一。化的重要标志之一。成分输血概述一、一、成分输血的概念成分输血的概念(bloodcomponenttherapy)是用物理的或化学的方法把全血分离是用物理的或化学的方法把全血分离制备成各种较浓和较纯的制品,根据不同制备成各种较浓和较纯的制品
2、,根据不同病人的需要,输给相应制品病人的需要,输给相应制品。二二、成分输血的优点成分输血的优点1.一血多用,节省血源,一人献血,多人受益一血多用,节省血源,一人献血,多人受益2.制品的浓度和纯度高,疗效好制品的浓度和纯度高,疗效好3.最大限度地降低输血不良反应及疾病的传播最大限度地降低输血不良反应及疾病的传播4.便于保存和运输,使用方便便于保存和运输,使用方便三、血液成分制备方法三、血液成分制备方法利用离心、过滤等物理的方法来分离血液成分,最常用的利用离心、过滤等物理的方法来分离血液成分,最常用的是利用各种血液成分相对密度、体积等因素的不同,通过密度梯是利用各种血液成分相对密度、体积等因素的不
3、同,通过密度梯度离心法,离心分层而得到浓度、纯度较高的单一成分。度离心法,离心分层而得到浓度、纯度较高的单一成分。手工制备手工制备血细胞分离机制备血细胞分离机制备四、血液成分保存的原则四、血液成分保存的原则使各种血液成分在体外储存过程中看,保持使各种血液成分在体外储存过程中看,保持其最佳生理状态。在保存期内,输入受者体内后,其最佳生理状态。在保存期内,输入受者体内后,可在循环中存活并维持其正常的生理功能,以达可在循环中存活并维持其正常的生理功能,以达到有效的治疗目的。到有效的治疗目的。血液成分是在全血采集后血液成分是在全血采集后6-8h内制备的内制备的,全血全血暂时存放的最好条件是暂时存放的最
4、好条件是2h内被冷却到内被冷却到20-24,如如果无此条件果无此条件,可存放在可存放在2-6,不应在过冷或过热的不应在过冷或过热的外环境久放外环境久放,如需从中分离血小板如需从中分离血小板,则应保证采血则应保证采血后后2h内冷却到内冷却到20-24,并在此条件下运输并在此条件下运输.血液采集注意事项(1)无菌操作,有效消毒,避免污染和感染)无菌操作,有效消毒,避免污染和感染(2)无凝块、无溶血、无乳糜,采血量符合标准)无凝块、无溶血、无乳糜,采血量符合标准(3)采血速度:)采血速度:200ml采集时间小于采集时间小于3min,400ml采集时间小采集时间小于于6min(4)采集过程中出现血流不
5、畅,则不应用于制备浓缩血小板。)采集过程中出现血流不畅,则不应用于制备浓缩血小板。血液细胞成分的制备一、制备原理一、制备原理利用各种血液细胞比重、体积等因素的不同,通过离利用各种血液细胞比重、体积等因素的不同,通过离心分层而得到浓度较高的单一成分。心分层而得到浓度较高的单一成分。血液中各成分比重血液中各成分比重(g/ml)血浆血浆(1.0251.030)血小板(血小板(1.0301.060)淋巴细胞(淋巴细胞(1.0501.078)粒细胞粒细胞(1.0801.095)红细胞(红细胞(1.0901.111)二、红细胞制品二、红细胞制品红细胞制品的种类:红细胞制品的种类:悬浮红细胞悬浮红细胞浓缩红
6、细胞浓缩红细胞悬浮少白细胞的红细胞悬浮少白细胞的红细胞浓缩少白细胞的红细胞浓缩少白细胞的红细胞洗涤红细胞洗涤红细胞冷冻解冻去甘油红细胞冷冻解冻去甘油红细胞辐照红细胞辐照红细胞(一)悬浮红细胞(一)悬浮红细胞1.概述:概述:悬浮红细胞是目前国内外应用最广泛的一种红细胞悬浮红细胞是目前国内外应用最广泛的一种红细胞制品。悬浮红细胞是用离心的方法分出全血中大部分制品。悬浮红细胞是用离心的方法分出全血中大部分(90%)血浆后,加入各种晶体盐红细胞保存液。血浆后,加入各种晶体盐红细胞保存液。各种晶体盐红细胞保存液:各种晶体盐红细胞保存液:红细胞添加液(红细胞添加液(additivesolution)(mg
7、/100ml)保养液、添加液都是为保存红细胞而设计的保养液、添加液都是为保存红细胞而设计的,保存温度保存温度2-6也是根据红细胞而定也是根据红细胞而定,而血小板、而血小板、白细胞、凝血因子的最佳保存条件都与红细胞不白细胞、凝血因子的最佳保存条件都与红细胞不同同2.制备方法:多联袋制备血液成分为国内外推荐使用方法。制备方法:多联袋制备血液成分为国内外推荐使用方法。用三联袋(含有保存液的主袋、添加液的末袋和次空的转移袋)的主用三联袋(含有保存液的主袋、添加液的末袋和次空的转移袋)的主袋采集袋采集200ml或或400ml全血。全血。将将8小时以内的全血,用(小时以内的全血,用(42)低温离心机离心,
8、离心力为低温离心机离心,离心力为5000g,离心,离心7分钟,沉淀红细胞。分钟,沉淀红细胞。轻轻取出离心后的血袋悬挂于分离支架上或分离夹内,将上层不含轻轻取出离心后的血袋悬挂于分离支架上或分离夹内,将上层不含血细胞的血浆分入空的转移袋内。血细胞的血浆分入空的转移袋内。把三联袋末袋中的添加液加入主袋浓缩红细胞内,使红细胞与添加把三联袋末袋中的添加液加入主袋浓缩红细胞内,使红细胞与添加液充分混匀。液充分混匀。用高频热合机切断塑料袋间的连接管,制成悬浮红细胞。用高频热合机切断塑料袋间的连接管,制成悬浮红细胞。贴上标签,放入血库专用冰箱保存。贴上标签,放入血库专用冰箱保存。空转移袋 添加液 保存液 全
9、血全血血血浆(含保存液)(含保存液)添加液添加液3、注意事项(1)制备前应检查全血采血时间及血袋热合部位是否)制备前应检查全血采血时间及血袋热合部位是否漏血,各种标签是否齐全等。漏血,各种标签是否齐全等。(2)用分离支架或分浆夹将血浆分入空的转移袋时,)用分离支架或分浆夹将血浆分入空的转移袋时,不能有红细胞混入。不能有红细胞混入。(3)悬浮红细胞肉眼观察应无黄疸、气泡、重度乳糜。)悬浮红细胞肉眼观察应无黄疸、气泡、重度乳糜。(4)悬浮红细胞所贴标签的条码、血型、献血者、采)悬浮红细胞所贴标签的条码、血型、献血者、采血者、采血时间应与原采血袋一致。血者、采血时间应与原采血袋一致。4、质量标准(1
10、)含有全血中全部的红细胞、一定量白细含有全血中全部的红细胞、一定量白细胞、血小板和少量血浆。胞、血小板和少量血浆。(2)血细胞比容为血细胞比容为0.500.65。(3)容量应为容量应为200ml10%或或400ml10%。(4)血红蛋白不低于血红蛋白不低于45g/单位。单位。(5)200ml全血分离出的红细胞为全血分离出的红细胞为1单位单位(unit,U)悬浮红细胞。)悬浮红细胞。5、保存和运输、保存和运输悬浮红细胞应保存在悬浮红细胞应保存在26。红细胞添加液为。红细胞添加液为MAP、SAGM、CPDA-1的保存期为的保存期为35天;天;AS-1、AS-3、AS-5的保存的保存期为期为42天;
11、红细胞添加液为生理盐水的保存期为天;红细胞添加液为生理盐水的保存期为24小时。运输小时。运输的温度为的温度为210,最长运输时间不得超过,最长运输时间不得超过24小时。小时。(二)浓缩红细胞(二)浓缩红细胞1.制备:用离心方法将采集到二联袋内的全血分离出部分血浆制备而成的红制备:用离心方法将采集到二联袋内的全血分离出部分血浆制备而成的红细胞成分血。细胞成分血。2、质量标准(1)含有全血中全部的红细胞、白细胞、大部分血小板和部分血浆。)含有全血中全部的红细胞、白细胞、大部分血小板和部分血浆。(2)红细胞比容为)红细胞比容为0.650.80。(3)1U红细胞容量为红细胞容量为120ml10%。(4
12、)血红蛋白不低于)血红蛋白不低于45g/单位。单位。(5)200ml全血分离出的红细胞为全血分离出的红细胞为1U的浓缩红细的浓缩红细胞。胞。3.保存和运输保存和运输浓缩红细胞保存在浓缩红细胞保存在2-6。含。含ACD-B、CPD保养液的浓缩红细胞保保养液的浓缩红细胞保存期为存期为21天,含天,含CPDA-1保养液的保存期为保养液的保存期为35天。运输温度天。运输温度2-10。(三)少白细胞的红细胞(三)少白细胞的红细胞1.概述:大多数患者因受血或受孕,体内产生白细胞抗概述:大多数患者因受血或受孕,体内产生白细胞抗体,这些抗体大部分属于人类白细胞抗原系统的同种体,这些抗体大部分属于人类白细胞抗原
13、系统的同种抗体,当再度输入含有白细胞的全血或其他血液成分抗体,当再度输入含有白细胞的全血或其他血液成分时,有可能产生免疫性发热输血反应。减除血液制品时,有可能产生免疫性发热输血反应。减除血液制品中的白细胞是安全输血的一种措施。少白细胞的红细中的白细胞是安全输血的一种措施。少白细胞的红细胞有少白细胞浓缩红细胞和少白细胞悬浮红细胞。胞有少白细胞浓缩红细胞和少白细胞悬浮红细胞。2.制备方法制备方法离心法(去白膜法):是一种依据红细胞与白细胞比重离心法(去白膜法):是一种依据红细胞与白细胞比重不同,简单、经济易于操作的制备少白细胞的方法。能不同,简单、经济易于操作的制备少白细胞的方法。能减除原全血中减
14、除原全血中85%的白细胞,降低发热反应率。的白细胞,降低发热反应率。将采集的全血进行强离心,将血浆分入第将采集的全血进行强离心,将血浆分入第2袋,将含有袋,将含有一定量血浆及白膜层分入第一定量血浆及白膜层分入第3袋;再将第袋;再将第4袋的红细胞添袋的红细胞添加液加入首袋与红细胞混合即为少白细胞的红细胞。加液加入首袋与红细胞混合即为少白细胞的红细胞。1.血血浆2.白膜白膜层3.添加液添加液滤器过滤法:由于医用高分子工业的发展,促进了输血器材滤器过滤法:由于医用高分子工业的发展,促进了输血器材的改革。各种不同功能的滤器相继问世。目前常用的为第三代滤的改革。各种不同功能的滤器相继问世。目前常用的为第
15、三代滤器,具有较高的减除白细胞效果,一般可使白细胞降低至器,具有较高的减除白细胞效果,一般可使白细胞降低至1.0106/L1.0105/L。避免。避免NHFTR及及HLA同种免疫的发生,同种免疫的发生,是最为有效的方法。是最为有效的方法。3、质量标准手工法:(手工法:(1)白细胞计数)白细胞计数1.2109/U。(2)血细胞比容为)血细胞比容为0.650.75。(3)1U容量应为容量应为200ml10%。(4)血红蛋白不低于)血红蛋白不低于43g/U。(5)200ml全血分离出的红细胞为全血分离出的红细胞为1U的少白细胞红细胞。的少白细胞红细胞。过滤法:(过滤法:(1)白细胞去除率高,达到)白
16、细胞去除率高,达到99%以上,即白细胞残留量以上,即白细胞残留量小于小于5106/U。(2)减少有效细胞的损失,其回收率红细胞)减少有效细胞的损失,其回收率红细胞90%,血,血小板小板85%。(3)去除白细胞过程中,有效细胞不受到损伤和不丧失其生)去除白细胞过程中,有效细胞不受到损伤和不丧失其生理活性。理活性。(四)洗涤红细胞(四)洗涤红细胞1.概述:洗涤红细胞是采用物理方式在无菌条件下将保存期内全血、概述:洗涤红细胞是采用物理方式在无菌条件下将保存期内全血、浓缩红细胞、悬浮红细胞等制品用大量静脉注射用生理盐水洗涤,浓缩红细胞、悬浮红细胞等制品用大量静脉注射用生理盐水洗涤,去除血浆和大部分白细
17、胞,并将红细胞悬浮在生理盐水中制成的去除血浆和大部分白细胞,并将红细胞悬浮在生理盐水中制成的红细胞成分。红细胞成分。2.制备方法制备方法(1)从冰箱中取出浓缩红细胞或悬浮红细胞,在室温放置)从冰箱中取出浓缩红细胞或悬浮红细胞,在室温放置3060分钟。分钟。(2)将四联盐水袋主袋上的针头插入红细胞袋的进针座内,把主袋内)将四联盐水袋主袋上的针头插入红细胞袋的进针座内,把主袋内200ml盐盐水徐徐流入红细胞袋内,边加盐水边混合,混匀后再倒流回主袋内,将中间塑水徐徐流入红细胞袋内,边加盐水边混合,混匀后再倒流回主袋内,将中间塑料管用小夹子夹住。料管用小夹子夹住。(3)5个袋装于两个离心桶中,平衡好后
18、,离心桶对称放入离心机内,以个袋装于两个离心桶中,平衡好后,离心桶对称放入离心机内,以4500r/min离心离心3分钟。分钟。(4)离心后将主袋轻轻取出,悬挂于支架上,把上清及白膜层分入曾经盛有红)离心后将主袋轻轻取出,悬挂于支架上,把上清及白膜层分入曾经盛有红细胞的袋内,然后热合并切断相连的管路,弃掉废液袋。细胞的袋内,然后热合并切断相连的管路,弃掉废液袋。(5)重复)重复24步骤,依次洗涤红细胞步骤,依次洗涤红细胞3次,用最后一袋盐水定量加入洗涤后的次,用最后一袋盐水定量加入洗涤后的红细胞内,调节体积。红细胞内,调节体积。(6)在调节好体积的第三袋中相连的塑料管内充满红细胞,分段热合留样本
19、,)在调节好体积的第三袋中相连的塑料管内充满红细胞,分段热合留样本,以供临床鉴定血型和交叉配型用。以供临床鉴定血型和交叉配型用。3.特点特点手工洗涤去除手工洗涤去除80%一一90%的白细胞和的白细胞和98%以上的血浆蛋白;以上的血浆蛋白;机器洗涤白细胞减至机器洗涤白细胞减至5108/L以下,几乎不含任何血浆蛋白。以下,几乎不含任何血浆蛋白。该制品不仅可低白细胞引起的该制品不仅可低白细胞引起的NHFTR反应,也可以减少或避免反应,也可以减少或避免血浆蛋白所致的过敏反应。血浆蛋白所致的过敏反应。适应于自身免疫性溶血性贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿需输适应于自身免疫性溶血性贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿
20、需输血的患者及对血浆蛋白、白细胞和血小板产生抗体的患者。血的患者及对血浆蛋白、白细胞和血小板产生抗体的患者。洗涤后的红细胞均应在洗涤后的红细胞均应在2424小时内输用。小时内输用。4、质量标准(1)红细胞回收率红细胞回收率70%。(2)白细胞清除率白细胞清除率80%。(3)血浆蛋白清除率血浆蛋白清除率90%。(4)1U容量容量125ml10%。(5)最后上清液血红蛋白最后上清液血红蛋白0.5g/U。(6)血细胞比容为血细胞比容为0.650.70。5.保存和运输保存和运输国国内内规规定定在在26保保存存,自自制制备备时时起起,在在24小小时时内内输输注注为为好好,运运输输时时温温度度应应在在21
21、0。总总之之,从从安安全全和和疗疗效效的的角角度度,洗洗涤涤红红细细胞胞在在洗洗涤涤后后应应尽尽快输注。快输注。(五)冰冻解冻去甘油红细胞(五)冰冻解冻去甘油红细胞1.概述:红细胞代谢速度取决于保存温度,把保存温度降至概述:红细胞代谢速度取决于保存温度,把保存温度降至红细胞代谢率几乎停止,以达到延长红细胞保存期的目的。红细胞代谢率几乎停止,以达到延长红细胞保存期的目的。在冰冻过程中,为防止血液结冰,破坏细胞内结构,可加在冰冻过程中,为防止血液结冰,破坏细胞内结构,可加入防冻剂。入防冻剂。细胞内防冻剂:甘油、二甲基亚砜细胞内防冻剂:甘油、二甲基亚砜细胞外防冻剂:羟乙基淀粉细胞外防冻剂:羟乙基淀粉
22、红细胞低温甘油保护剂甘油(红细胞低温甘油保护剂甘油(g/v)79.2%、葡萄糖、葡萄糖(g/v)8.0%、果糖(、果糖(g/v)1.0%、EDTA2Na(g/v)0.3%,用注射用生理盐水配成,用注射用生理盐水配成40%甘油应甘油应用液。用液。2.制备制备【操作步骤】(1)冻存将红细胞转移至医用聚乙烯血袋内,然后在冻存将红细胞转移至医用聚乙烯血袋内,然后在30分钟内缓慢分钟内缓慢加入加入40%甘油保护剂,振荡混匀,室温甘油保护剂,振荡混匀,室温30分钟后,直接置分钟后,直接置-80冰冰箱冷冻保存。箱冷冻保存。(2)解冻冰冻红细胞取出立即放入解冻冰冻红细胞取出立即放入37恒温水浴箱,在恒温水浴箱
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