实验一-葡萄糖一般杂质检查.doc

实验一：葡萄糖杂质检查
一、目的要求：
1、葡萄糖的鉴别试验。
2、掌握一般杂质检查的目的和原理。
3、熟悉杂质检查的操作方法。
二、实验原理
1、酸碱度检查：是用药典规定的方法对药物中的酸度、碱度及酸碱度等酸碱性杂质进行检查。检查时应以新沸并放冷至室温的水为溶剂。不溶于水的药物，可用中性乙醇等有机溶剂溶解。常用的方法有酸碱滴定法，指示剂法以及pH值测定法。
2、氯化物检查法：氯化物在硝酸溶液中与硝酸银作用，生成氯化银沉淀而显白色浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液和硝酸银在同样条件下用同法处理生成的氯化银浑浊程度相比较，测定供试品中氯化物的限量。
反应离子方程式：Cl- + Ag+ → AgCl↓（白色）
3、铁盐检查法：三价铁盐在硝酸酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色可溶性的硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。
反应离子方程式：Fe3+ + 3SCN- → Fe（SCN）3（红棕色）
4、硫酸盐检查法：药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡沉淀而显白色浑浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下，用同法处理生成的浑浊比较，判断药物中含硫酸盐的限量。 反应离子方程式：SO42- + Ba2+ → BaSO4↓(白色)
5、干燥失重：主要指水分，包括其它挥发性物质。用于受热较稳定的药物,温度一般为105℃，在烘箱内干燥至恒重。
6、亚硫酸盐与可溶性淀粉
取本品1.0g，加水10ml溶解后，加碘试液1滴，应即显黄色。
7. 蛋白质 取本品1.0g，加水10mL溶解后，加磺基水杨酸溶液（1→5）3mL，不得发生沉淀。
8.乙醇澄清度检查
取本品1.0g，加90%乙醇30mL，置水浴上加热回流约10min，溶液应澄清。
9、溶液颜色
取规定量的供试品，加水溶解，置于25mL纳氏比色管中，加水稀释至10mL，另取规定色调和色号的标准比色液10mL，置于纳氏比色管中，两管同置于白色背景上，自上向下透视，或同置于白色背景前平视观察，供试品呈现的颜色与对照管比较，不得更深。
三、试剂与仪器
1、酚酞指示液 取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，即得。
2、氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）
3、稀硝酸 取硝酸10.5 ml，加水稀释至100 ml，即得。本液含HNO3应为9.5％～10.5％
4、稀盐酸 取盐酸23.4 ml,加水稀释至100 ml，即得。本液含盐酸分数应为9.5%~10.5%
5、硝酸银溶液（0.1mol/L） 称取1.75 g硝酸银，溶于100 mL水中。
6、标准氯化钠溶液（10μgCl－/ml） 称取氯化钠0.165 g，置1000 ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10 μg的Cl-)
7、碘试液1滴 取碘13.0g，加碘化钾36g与水50ml溶解后，加盐酸3滴与水适量使成1000ml，摇匀，用垂熔玻璃器滤过。
8、硫氰酸铵溶液 取硫氰酸铵30g，加水使溶解成100ml，即得。
9、标准铁溶液2.0ml 称取硫酸铁铵[FeNH4(S04)2·12H20]0.863g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。 临用前,精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10μg的Fe）。
10、比色用原液
(1)比色用重铬酸钾液 取重铬酸钾，研细后，在120℃干燥至恒重,精密称取0.40g,置500ml量瓶中， 加适量水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。每1ml溶液中含0.800mg的K2Cr2O7。
(2)比色用硫酸铜液 取硫酸铜约32.5g,加适量的盐酸溶液(1→40)使溶解成500ml，精密量取10ml，置碘量瓶中,加水50ml、醋酸4ml与碘化钾2g,用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml,继续滴定至蓝色消失。每1ml硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于24.97mg的CuSO4•5H2O。根据上述测定结果，在剩余的原溶液中加适量的盐酸溶液(1→40)，使每1ml溶液中适含62.4mg的CuSO4•5H2O，即得。
(3)比色用氯化钴液 取氯化钴约32.5g，加适量的盐酸溶液(1→40)使溶解成500ml,精密量取2ml，置锥形瓶中，加水200ml，摇匀，加氨试液至溶液由浅红色转变至绿色后，加醋酸-醋酸钠缓冲液(pH6.0)10ml，加热至60℃，再加二甲酚橙指示液5滴,用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显黄色.每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于11.90mg的CoCl2•6H2O。根据上述测定结果，在剩余的原溶液中加适量的盐酸溶液(1→40)，使每1ml溶液中适含59.5mgCoCl2•6H2O，即得。
四、操作步骤
1. 酸度
取本品2.0g，加水20ml溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）0.20ml，应显粉红色。
2.乙醇溶液的澄清度 取本品1.0g，加90%乙醇30mL，置水浴上加热回流约10min，溶液应澄清。
3.氯化物
取本品0.60g，加水溶解使成25ml（如显碱性可滴加硝酸使遇石蕊试纸显中性反应），再加稀硝酸10ml，溶液如不澄清，虑过。置50ml纳氏比色管中，加水适量使成约40ml，摇匀，即得供试液。另取与标准氯化钠溶液一定量制成得对照液【取标准氯化钠溶液（10μgCl－/ml）6.0ml置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，用水稀释使成约40ml】。向供试液与对照液中分别加入硝酸银试液1ml，再加水适量使成50ml，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，比较浑浊，不得更浓（0.010％）
4. 亚硫酸盐与可溶性淀粉
取本品1.0g，加水10ml溶解后，加碘试液1滴，应即显黄色（2）。
5.硫酸盐的检查
取本品2.0g，加水溶解使成约40mL；溶液如不澄清，应滤过；置50mL纳氏比色管中，加稀盐酸2mL，摇匀，即得供试溶液。另取标准硫酸钾溶液2.0mL，置50mL纳氏比色管中，加水使成约40mL，加稀盐酸2mL，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液5mL，用水稀释至50mL，充分摇匀，放置10分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较。供试溶液所显浑浊度不得较对照液更浓（0.01%）。
6. 干燥失重 取本品1.0g，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过9.5%
7. 蛋白质 取本品1.0g，加水10mL溶解后，加磺基水杨酸溶液（1→5）3mL，不得发生沉淀。
8. 铁盐 取本品2.0g，加水20mL溶解后，加硝酸3滴，缓缓煮沸5分钟，放冷，加水稀释使成45mL，加硫氰酸铵溶液（30→100）3mL，摇匀，如显色，与标准铁溶液2.0mL用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.001%）。
9. 溶液颜色
取本品5.0g，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10mL，溶液应澄清无色；如显色，与对照液（P6：取比色用氯化钴液3.0mL、比色用铬酸钾液3.0mL与比色用硫酸铜液6.0mL，加水稀释成 50mL）1.0mL加水稀释至10mL比较，不得更深。
五、实验现象记录
项目
执行标准
依据
结果
结论
酸度
Chp2010
粉红色

溶液颜色
Chp2010
如显色，不得深于对照管

氯化物
Chp2010
如浑浊，不得深于对照管

亚硫酸盐与淀粉
Chp2010
黄色

铁盐
Chp2010
如显色，不得深于对照管

硫酸盐
Chp2010
如浑浊，不得深于对照管

蛋白质
Chp2010
不得发生沉淀

干燥失重
Chp2010
减失重量不得过9.5%

乙醇澄清度
Chp2010
澄清

八、实验讨论
1、试验比浊方法是将两管同置于黑色背景上，从上向下垂直观察；比色方法是将两管同置于白色背景上，从侧面或自上而下观察；而且所用比色管刻度高度应一致。
2、亚硫酸盐与可溶性淀粉项，如存在亚硫酸盐时碘试液褪色，存在可溶性淀粉时溶液呈蓝色。
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