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环状RNA CDC14A表达与急性缺血性脑卒中发生风险、严重程度及复发的相关性研究.pdf
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1、 50 心脑血管病防治 2024 年 2 月第 24 卷第 2 期 Cardio-Cerebrovasc Dis Prev Treat,February 2024,Vol.24,No.2环状 RNA CDC14A 表达与急性缺血性 脑卒中发生风险、严重程度及复发的相关性 研究金铁.丁继.崔凯.李敏【摘要】目的 探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清环状 RNA CDC14A(circCDC14A)表达与疾病发生风险、严重程度及复发的关系。方法 纳入国药葛洲坝中心医院 AIS 患者 114 例 作为观察组,收集其基线资料,根据患者 AIS 严重程度分为轻型组 39 例、中型组 50 例、重型组2
2、5 例;随访 6 个月,根据是否复发分为未复发组 94 例和复发组 20 例。同期纳入本院因紧张性头痛或周围性眩晕而住院观察的非 AIS 患者 126 例作为对照组。采用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)法检测血清 circCDC14A 水平;绘制受试者工作特性(ROC)曲线分析血清 circCDC14A 表达水平对 AIS 发生风险的评估价值及对 AIS 患者复发的预测价值;采用多因素 Logistic 回归分析 AIS患者复发的影响因素。结果 观察组血清 circCDC14A 表达水平高于对照组,差异有统计学意义(t=12.558,P 0.01)。观察组血清 circCDC14A 表达
3、水平评估 AIS 发生风险的曲线下面积(AUC)为 0.888,敏感度为 84.2%,特异度为 84.1%。重型组 AIS 患者血清 circCDC14A 表达水平高于轻型组和中型组,中型组血清 circCDC14A 表达水平高于轻型组,差异有统计学意义(F=14.772,P 0.01)。复发组血清 circCDC14A 表达水平及高血压、高血脂、吸烟患者比例高于未复发组(t/2=4.503、4.028、21.596、4.658,P 0.05)。血清 circCDC14A 预测 AIS 患者复发的 AUC 为 0.764,敏感度为 55.0%,特异度为 96.8%。circCDC14A、高血脂
4、是 AIS 患者复发的危险因素(OR=2.627、2.459,P 0.05)。患者及其家属对本研究知情并且签署知情同意书。本研究通过医院伦理委员会批准(批号:198315204)。1.2 方法 收集AIS患者性别、年龄、体质量指数(body mass index,BMI)、高血压、高血脂、糖尿病、冠心病、吸烟史、饮酒史、颈动脉狭窄等临床基线资料。1.2.1 血清circCDC14A表达水平检测 收集患者入院24 h内(治疗前)肘静脉血样5 mL置于干燥的离心管内,静置30 min后,4条件下以3 000 r/min转速离心10 min,收集上层血清,保存于-80冰箱内。冰上冻融后采用RNA提取
5、试剂盒(上海羽哚生物科技有限公司)分离血清标本中总RNA,反转录试剂盒(上海吉至生化科技有限公司)将总RNA反转录为cDNA,严格按照各自试剂盒说明操作。采用美国Applied Biosystems公司生产的 V115896 型实时荧光定量 PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)仪检测血清circCDC14A表达水平,内参为GAPDH。引物序列:circCDC14A:上游引物5-ATGCGCTCGTGGGAGCTATAG-3,下游引物5-GCACAGACGTGCAGTGTAGC-3;GAPDH:上 游 引 物 5-GTCACAGCACTCGA TCTCG
6、CG-3,下 游 引 物5-AGCAGGGACTGACACGTTGAC-3。qRT-PCR 反应条件设置为:95预变性5 min,95变性15 s、60退火20 s、72延伸30 s,共进行45次循环并采集荧光信号。结果采用2-Ct法对AIS患者及非AIS患者血清中circCDC14A的表达进行相对定量分析。1.2.2 AIS 患者疾病严重程度及复发评估 AIS 患者入院 24 h 内由经验丰富的神经科医师进行美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale,NIHSS)评分,以评估患者疾病严重程度7,并将其分为轻型组(NIHSS
7、15 分)25 例。AIS 患者治疗后 6 个月对其进行随访,AIS 患者复发的判断依据8:首次 AIS 发生后,原有症状痊愈或好转后出现原有症状加重或再出现新的中枢神经系统损害,头部 CT、MRI 等影像检查证实原有病灶扩大或有新的病灶。根据判断依据将患者分为未复发组94例和复发组 20例。1.3 统计学处理 应用统计软件 SPSS 25.0 版进行统计学分析。计数资料用例(%)表示,采用卡方检验比较;计量资料经正态检验后服从正态分布,用 xs表示,两组间采用 t 检验比较,三组间采用单因素方差分析,进一步两两比较采用 SNK-q 检验;绘制受试者工作特性(receiver operator
8、 characteristic,ROC)曲线分析血清 circCDC14A 表达水平对 AIS 发生风险的评估价值及对 AIS 患者复发的预测价值;采用多因素Logistic 回归分析 AIS 患者复发的影响因素。P 0.05为差异有统计学意义。2 结果2.1 对照组与观察组血清 circCDC14A 表达水平比较 观察组血清 circCDC14A 表达水平(1.470.34)高于对照组(1.010.22),差异有统计学意义(t=12.558,P 0.01)。2.2 不同严重程度 AIS 患者血清 circCDC14A 表达水平比较 重型组AIS患者血清circCDC14A表达水平高于轻型组和
9、中型组,中型组血清circCDC14A表达水平高于轻型组,差异有统计学意义(P 0.01),见表1。表 1 不同严重程度 AIS 患者血清 circCDC14A 表达水平比较(xs)组别例数circCDC14A轻型组391.280.26中型组501.460.35a重型组251.780.49abF 值14.772P 值0.01 注:AIS:急性缺血性脑卒中;circCDC14A:环状 RNA CDC14A;与轻型组比较aP 0.01,与中型组比较bP 0.05)。复发组血清 circCDC14A 表达水平及高血压、高血脂、吸烟患者比例高于未复发组(P 0.05年龄(岁)55.4710.22 55
10、.6411.030.0670.05BMI(kg/m2)23.072.7623.123.050.0720.05高血压 例(%)38(40.43)13(65.00)4.0280.05高血脂 例(%)10(10.64)11(55.00)21.596 0.05吸烟史 例(%)28(29.79)11(55.00)4.6580.05颈动脉狭窄 例(%)36(38.30)8(40.00)0.0200.05circCDC14A1.390.361.840.584.5030.01 注:BMI:体质量指数;circCDC14A 注解见表 12.5 多因素 Logistic 回归分析 AIS 患者复发的影响因素 以
11、AIS 患者治疗后 6 个月内是否复发作为因变量,以 circCDC14A、高血压、高血脂、吸烟史作为自变量进行多因素 Logistic 回归分析,结果显示,circCDC14A、高血脂是 AIS 患者复发的影响因素(P 0.01),见表 3。表 3 多因素 Logistic 回归分析 AIS 患者复发的影响因素影响因素BSEWald 2P 值OR(95%CI)circCDC14A0.9660.3099.7700.051.103(0.8451.440)高血脂0.9000.3128.3160.051.094(0.6601.814)注:AIS、circCDC14A 注解见表 12.6 血清 cir
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