Qubit统一标准操作作业规程.docx

Qubit® 3.0荧光定量仪操作和维护规程
一、目标
使Qubit® 3.0荧光定量仪能够正确和正常使用，确保系统正常运行正确性和精密度，以取得正确可靠检验结果。
二、适用范围
可用于定量DNA,RNA, micro RNA和蛋白质,使用高度敏感和正确荧光技术量子位定量分析
三、工作原理
Qubit®荧光定量仪采取荧光染料和特异性靶分子结合。这些荧光染料只有和这些靶分子结合时才会发射荧光信号，即使在浓度很低时。Qubit®3.0荧光定量仪比传统紫外吸光法愈加正确。以往紫光吸光法不具选择性，测量260nm全部分子吸光值——包含DNA，RNA，蛋白质，游离核苷酸或多出盐离子。另外，紫外分光光度计灵敏度不足，无法完成低浓度DNA和RNA正确定量。使用Qubit®荧光定量仪，将大大提升正确性。因为Qubit®分析试剂盒里荧光染料只和样品中特异分子结合——DNA,RNA或蛋白，避免不正确测量带来反复工作
四、职责
试验室负责该系统日常维护保养，包含每七天保养，和需要时保养工作。
1.确保仪器设备在计量使用期内使用，并配合完成计量相关工作。
2.负责仪器设备正确使用、妥善保管和精心维护。
3.负责仪器设备日常保养、定时校准。
五、仪器特点
1.快速和高度正确定量 DNA，RNA 和蛋白质样品少于 5 秒。
2.高水平正确性只有 1 — — 20 μ L 样品，甚至用很稀样品
3.使用染料选择性双链 Dna、 RNA 或蛋白质样品中污染物影响降至最低。
4.大型、 优异彩色触摸屏为简单工作流导航。
5.以图形方法显示达 20 数据点
6. 能够个性化仪器用户界面将显示只有常见化验
六、使用要求
1.不要在阳光直射下操作仪器
2.样品处理过程中需带无粉橡胶手套
3. 在室温使用仪器(22-28ºC)
4.测量之前已经进行校准
七、操作指南
仪器外观
触摸屏
USB 驱动器端口
电源插口
USB电缆接口
样品室

7.1仪器开启和关闭
1. 该仪器在平坦地方,水平,干燥表面
2. 将提供电源线一端插入Qubit® 3.0荧光计
3. 电源线另一端附加合适插头适配器，插在适宜电源上
4. 仪器自动开启,首先显示闪屏,然后主屏幕
5. 要关闭Qubit® 3.0荧光计，直接拔下电源
7.2仪器开机后，主屏幕自动显示，能够在屏幕上选择以下功效：
1.选择一个定量测定：dsDNA, RNA, oligo (ssDNA), 蛋白质,或离子球
2.选择荧光计模式
3.访问以前保留数据
4.系统设置

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7.3屏幕设置（Instrument settings）
1.睡眠模式
2.亮度设置
3.日期时间设置
4.恢复设置
5.语言设置

7.3.1设置睡眠模式：
a.系统默认为10分钟进入睡眠模式，如要调整该项，在屏幕上点击“Sleep mode”
b.点击文本框中得数字，然后更改，仪器设置范围为1~60分钟
c.设置好后点击保留返回设置界面

7.3.2设置亮度
a.屏幕上点击“Brightness”
b. 移动滑块按钮向上或向下调整显示器亮度
c. 设置好后点击保留返回设置界面

7.3.3设置时间日期
a.屏幕上点击“Date/Time”
b.选着日期时间格式然后进入下一步
c.点击对应文本框进行设置
d.设置完成后点击保留返回设置界面

7.3.4恢复设置：恢复出厂设置，删除全部保留数据,用户定义仪器设置和定制化验，该选项请慎重选择
7.3.5语言设置
a.屏幕上点击“Language”
b. 选择对应选项
c.点击保留返回设置界面

7.4校准
仪器工作原理是先使用标准浓度试剂生成荧光值和浓度二维坐标轴，检测时测出溶液荧光值，然后依据荧光值来换算浓度，所以进行测验时需要选择新校准或使用以前保留校准（如该功效第一次使用或更换检测试剂盒就需重新校准）
7.4.1点选需要检测项目，进入下一级目录

7.4.2点选试验，如第一次选择会直接提醒进行校准，如以前进行过校准，则会提醒使用以前或新进行校准，这里选择进行校准

7.4.3出现下面界面，将试剂盒中用于校准标准品1#放入样品室，点击“Read standard”，大约3秒，读取完成进入到下一步，放入标准品2#，点击“Read standard”（蛋白质校准还需放入标准品3#）。

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7.4.4校准完成后能够不将标准品2#取出直接检测浓度，查看校准是否成功。假如校准成功,软件显示读取标准屏幕,显示荧光和浓度图。

在荧光和浓度图:标准数据点被一条线连接。（圆圈表示正确标准）假如校验不成功,软件显示“校准误差”消息，需重新进行校准
7.5样品检测
7.5.1将样品和反应液混合（混合方案具体见试剂盒）孵化一段时间（DNA和RNA为2分钟，蛋白质需要15分钟）
7.5.2在阅读标准屏幕,点击运行样本

7.5.3在样本体积屏幕,选择样本体积和单位
a. 触摸+和-按钮在方向盘上选择样本体积添加到试验管(1 - 20µL)。
b. 从下拉菜单中,选择单位输出样本浓度

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7.5.4将样品管插入到样品室,关上盖子,然后点击读取管。大约需要3秒

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7.5.5在屏幕上就会显示所需检测浓度

7.5.6多个样品检测：
a.相同体积和浓度单位：只需更换样品室中样品管，点击读取管
b.不一样体积和浓度单位：反复上诉步骤更改体积和浓度单位
7.5.7检测浓度存在一定范围，如超出检测范围会显示“超出范围”

7.5.7能够点击屏幕上左右箭头进入体积浓度设置界面和荧光和浓度图
1.空心圆表示进行校准标准品
2.大灰色圆圈代表最新样品
3.蓝色圆圈代表在检测范围内
4.黄色圆圈代表在拓展范围内
5.红色圆圈代表在仪器检测范围外

7.6荧光模式
能够选择荧光模式来作为mini荧光计使用（光源通道蓝色 (470 nm) 或红色 (635 nm) ）
7.6.1主界面点击“Fluorometer”，进入下一级，选择对应选项

7.6.2放入样品，点击读取管

7.6.3选择蓝光时，显示结果有蓝光和红光检测数值，选择红光时，只显示红光检测数值

7.7数据管理
Qubit® 3.0机子本身能够存放1000样本数据，对保留数据，能够进行以下操作：
a.针对每个样本查看具体数据
b.重命名数据文件
c.能够保留数据，导出到USB存放器或电脑中
d.删除数据文件
7.7.1从浓度检测界面、荧光和浓度图界面、主屏幕点击“Data”

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7.7.2出现数据屏幕,点击想查看数据集
7.7.3点击想要查看数据，就会出现以下具体数据列表
7.7.4如需更改数据显示名称，在具体数据界面点击数据名（上图红色框），在弹出界面输入想要更改即可
7.7.5如需导出数据，将USB存放器插入Qubit® 3.0USB接口上，假如想导出是数据集，则勾选该数据集；如需导出是单个数据，则点击数据集进入再勾选需要导出数据
7.7.6点击导出数据，数据就会以.CSV格式保留到USB存放器