淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤小鼠肿瘤生长及细胞周期的影响.pdf
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1、中西医结合研究 年月第 卷第期R e s e a r c h o fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n eA p r ,V o l ,N o d o i:/j i s s n 实 验 研 究 广东省中医药局科研项目(N o )通信作者,C o r r e s p o n d i n ga u t h o r,E m a i l:l h b c o m淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤小鼠肿瘤生长及细胞周期的影响唐荣志赖海标黄智峰刘毅豪吴惠妃中山市中医院泌尿外科,广东中
2、山 摘要目的探讨淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤S C I D小鼠肿瘤生长、细胞周期、磷酸酶及张力蛋白同源物(p h o s p h a t a s ea n dt e n s i nh o m o l o g,P T E N)基因表达的影响.方法 只雄性S C I D小鼠,根据随机数字表法随机均分为模型对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组 只.采用S C I D小鼠前列腺腺体背外侧包膜内注射人前列腺癌L N C a P细胞株悬液的方法构建前列腺癌原位移植瘤小鼠模型.造模周后,模型对照组予以 氯化钠注射液,低剂量组予以 m g/k g淫羊藿苷,中剂量组予以 m g/k g淫羊藿苷,高剂量组予
3、以 m g/k g淫羊藿苷.灌胃处理次/d,治疗时间为周.在灌胃给药治疗前及治疗周后,分别取各组小鼠只,对比各组肿瘤质量、肿瘤体积、肿瘤抑制率.采用流式细胞学方法检测L N C a P细胞周期,计算各周期比值.采用实时定量P C R检测前列腺肿瘤组织中P T E N mR NA相对含量.结果治疗后,模型对照组肿瘤质量、肿瘤体积较治疗前明显增加(P );中剂量组及高剂量组肿瘤质量、肿瘤体积较治疗前明显降低(P ),且显著低于模型对照组(P ).中剂量组及高剂量组肿瘤抑制率显著高于低剂量组(P ).中剂量组及高剂量组肿瘤细胞S期较治疗前明显增加(P ),且显著高于模型对照组(P );中剂量组及高剂
4、量组肿瘤细胞G/G期较治疗前明显减少(P ),且显著低于模型对照组(P ).中剂量组及高剂量组P T E N mR NA相对含量较治疗前明显增加(P ),且显著高于模型对照组(P ).结论淫羊藿苷可能通过上调P T E N表达、改变细胞周期分布来抑制前列腺癌L N C a P细胞增殖,从而有效抑制前列腺癌原位移植瘤S C I D小鼠肿瘤生长.关键词淫羊藿苷;前列腺癌;磷酸酶及张力蛋白同源物;细胞周期中图分类号R ;R 文献标志码AE f f e c t s o f I c a r i i no nT u m o rG r o w t ha n dC e l lC y c l e i nP r
5、o s t a t eC a n c e rO r t h o t o p i cT r a n s p l a n t a t i o nT u m o rM i c eT AN GR o n g z h i,L A IH a i b i a o,HUAN GZ h i f e n g,L I UY i h a o,WU H u i f e iD e p a r t m e n t o fU r o l o g y,Z h o n g s h a nH o s p i t a l o fT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c i n e,Z h
6、 o n g s h a n ,C h i n aA b s t r a c t O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h ee f f e c t so f i c a r i i no nt u m o rg r o w t h,c e l l c y c l ea n de x p r e s s i o no fp h o s p h a t a s ea n dt e n s i nh o m o l o g(P T E N)g e n e si nS C I D m i c ew i t hp r o s t a t ec a
7、n c e ro r t h o t o p i c t r a n s p l a n t a t i o nt u m o r M e t h o d s F o r t ym a l eS C I D m i c ew e r er a n d o m l yd i v i d e di n t om o d e lc o n t r o lg r o u p,l o w d o s eg r o u p,m e d i u m d o s eg r o u pa n dh i g h d o s eg r o u pa c c o r d i n g t o t h e r a n d
8、 o mn u m b e r t a b l em e t h o d,w i t h m i c e i ne a c hg r o u p M o u s em o d e lo fp r o s t a t e c a n c e r o r t h o t o p i c t r a n s p l a n t a t i o n t u m o rw a s c o n s t r u c t e db y i n j e c t i n gh u m a np r o s t a t e c a n c e rL N C a Pc e l ll i n es u s p e n
9、s i o n i n t ot h ed o r s a l l a t e r a l c a p s u l eo f t h ep r o s t a t eg l a n di nS C I D m i c e A f t e rw e e k so fm o d e l i n g,t h em o d e l c o n t r o l g r o u pw a sg i v e n s o d i u mc h l o r i d e i n j e c t i o n,t h e l o w d o s eg r o u pw a sg i v e n m g/k g i c
10、 a r i i n,t h em e d i u m d o s eg r o u pw a sg i v e n m g/k g i c a r i i n,a n dt h eh i g h d o s eg r o u pw a sg i v e n m g/k g i c a r i i n G a v a g e t r e a t 中西医结合研究 年月第 卷第期R e s e a r c h o fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n eA p r
11、,V o l ,N o m e n to n c ead a yf o rw e e k s B e f o r ea n da f t e rw e e k so fg a v a g et r e a t m e n t,m i c e i ne a c hg r o u pw e r et a k e na n dc o m p a r e df o r t u m o rm a s s,t u m o rv o l u m e,a n dt u m o r i n h i b i t i o nr a t e F l o wc y t o m e t r yw a su s e dt
12、od e t e c t t h ec e l l c y c l eo fL N C a Pa n dc a l c u l a t e t h er a t i oo f e a c hc y c l e R e a l t i m eq u a n t i t a t i v eP C Rw a su s e dt od e t e c t t h e r e l a t i v ec o n t e n to fP T E NmR NAi np r o s t a t e t u m o r t i s s u e R e s u l t s A f t e r t r e a t m
13、 e n t,t u m o rm a s s a n dv o l u m e i n t h em o d e l c o n t r o l g r o u pw e r es i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e dc o m p a r e dt ob e f o r et r e a t m e n t(P )T u m o rm a s sa n dv o l u m ei nt h em e d i u m d o s ea n dh i g h d o s eg r o u p sw e r es i g n i f i c a n
14、t l yr e d u c e dc o m p a r e dt ob e f o r et r e a t m e n t(P ),a n dw e r es i g n i f i c a n t l yl o w e r t h a n t h o s e i n t h em o d e l c o n t r o l g r o u p(P )T h e t u m o r i n h i b i t i o nr a t e s i n t h em e d i u m d o s ea n dh i g h d o s eg r o u p sw e r es i g n i
15、 f i c a n t l yh i g h e r t h a nt h o s e i nt h e l o w d o s eg r o u p(P )T h eSp h a s eo f t u m o rc e l l s i nt h em e d i u m d o s ea n dh i g h d o s eg r o u p sw a ss i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dc o m p a r e dt ob e f o r et r e a t m e n t(P ),a n dw a s s i g n i f i c
16、 a n t l yh i g h e r t h a n t h a t i n t h em o d e l c o n t r o l g r o u p(P )T h eG/Gp h a s eo f t u m o r c e l l si nt h em e d i u m d o s ea n dh i g h d o s eg r o u p sw a ss i g n i f i c a n t l yr e d u c e dc o m p a r e dt ob e f o r et r e a t m e n t(P ),a n dw a ss i g n i f i
17、c a n t l y l o w e r t h a nt h a t i nt h em o d e l c o n t r o lg r o u p(P )T h er e l a t i v ec o n t e n to fP T E N mR NAi nt h em e d i u m d o s ea n dh i g h d o s eg r o u p sw a ss i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dc o m p a r e dt ob e f o r et r e a t m e n t(P ),a n dw a ss i
18、g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a nt h a t i nt h em o d e l c o n t r o l g r o u p(P )C o n c l u s i o n I c a r i i nm i g h t i n h i b i t t h ep r o l i f e r a t i o no fp r o s t a t ec a n c e rL N C a Pc e l l sb yu p r e g u l a t eP T E Ne x p r e s s i o na n da l t e rc e l l c y
19、 c l ed i s t r i b u t i o n,t h e r e b ye f f e c t i v e l y i n h i b i t t h eg r o w t ho fp r o s t a t ec a n c e ro r t h o t o p i c t r a n s p l a n t a t i o nt u m o r i nS C I Dm i c e K e yw o r d s i c a r i i n;p r o s t a t ec a n c e r;p h o s p h a t a s ea n dt e n s i nh o m
20、o l o g;c e l l c y c l e在男性罹患的肿瘤中,前列腺癌(p r o s t a t i cc a n c e r,P C a)是发病率及死亡率仅次于肺癌的恶性肿瘤,对男性生命健康产生巨大威胁.通过研究前列腺癌原位移植瘤,我们发现前列腺癌细胞株的生长、迁移和侵袭会被淫羊藿苷的生物学活性影响而受到一定程度的抑制.淫羊藿又名仙灵脾、刚前,包括淫羊藿苷、淫羊藿次苷在内的一系列黄酮苷类成分为其主要活性成分,具有增加心脑血管血流量、加强人体造血功能、提升人体免疫功能、促进骨代谢的作用.淫羊藿苷及其代谢产物的细胞毒性不高,其抗肿瘤作用机制表现为通过多种信号通路抑制细胞活力、调控肿瘤细
21、胞凋亡.人第 号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(p h o s p h a t a s ea n dt e n s i nh o m o l o gd e l e t e do nc h r o m o s o m e,P T E N)基因属抑癌基因,雄激素受体(a n d r o g e nr e c e p t o r,A R)过度表达和P T E N基因缺失可导致前列腺癌的肿瘤细胞无限生长.同时通过调查研究我们发现,正常人的P T E N基因突变率明显低于P C a患者.目前针对前列腺癌裸鼠与P T E N基因相关性的研究鲜有报道,本课题组为弥补这一缺憾,特从P T E N表达等方面
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