颅痛宁颗粒对眶下神经缩窄环术诱导三叉神经痛大鼠的治疗作用研究.pdf

中国药物警戒 第 21 卷第 3 期 2024 年 3 月 March,2024,Vol.21,No.3257DOI:10.19803/j.1672-8629.20230591 中图分类号：R965.1；R994.11文献标志码：A 文章编号：1672-8629（2024）03-0257-06基金项目：国家自然科学基金资助项目（82304877）；中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助（ZZ15-YQ-035）；中国中医科学院科技创新项目（CI2021B015）。作者简介：李舒冉，女，博士，助理研究员，中药药理与新药研发。*通信作者：孙静，女，博士，副研究员 硕导，中药药理。E-mail:#为共同通信作者。颅痛宁颗粒对眶下神经缩窄环术诱导三叉神经痛大鼠的治疗作用研究李舒冉1，郭姗姗1，高双荣1，包蕾1，耿子涵1，赵荣华1，张敬升1，庞博1，张宇1，王雅欣1，徐英利1，曹姗1，韩冰2#，崔晓兰1，孙静1*(1中国中医科学院中药研究所，北京100029；2黑龙江省济仁药业有限公司，黑龙江 哈尔滨，150025）摘要:目的研究颅痛宁颗粒对三叉神经痛模型大鼠的治疗作用，为其临床应用提供参考资料。方法采用眶下神经缩窄环术（ION-CCI）制备大鼠三叉神经痛模型，大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、卡马西平阳性药组、颅痛宁高剂量组（2.70 g 生药 kg-1d-1）、颅痛宁低剂量组（1.35 g 生药 kg-1d-1）。Von Frey 毛刷测定大鼠触须垫机械痛阈值，生化法检测血液血流变和凝血功能，HE 染色观察眶下神经病理变化，Western blot 技术检测三叉神经内 P38和 P-P38 的蛋白水平。结果颅痛宁颗粒能提高模型大鼠的痛阈值（P 0.05，P 0.01）降低模型大鼠血浆黏度（P0.05，P0.01）和全血还原黏度（P0.05，P0.01），提高模型大鼠血流变能力；提高模型大鼠血液凝血酶原时间（prothrombintime，PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplatin time,APTT）和凝血酶时间（thrombin time，TT）水平（P 0.05，P 0.01），降低模型大鼠纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）水平（P 0.01），改善凝血功能；改善模型大鼠眶下神经的病理改变；并降低模型大鼠三叉神经内 P-P38 的表达量（P 0.01）。结论颅痛宁颗粒具有改善三叉神经痛作用，可能与其活血化瘀功能有关。关键词：三叉神经痛；眶下神经缩窄环术；颅痛宁颗粒；活血化瘀；三叉神经痛模型；大鼠；卡马西平Effect of Lutongning granulethe to trigeminal neuralgia induced by chronic constriction injury of the infraorbital nerve in ratsLI Shuran1,GUO Shanshan1,GAO Suangrong1,BAO Lei1,GENG Zihan1,ZHAO Ronghua1,ZHANG Jingsheng1,PANG Bo1,ZHANG Yu1,WANG Yaxin1,XU Yingli1,CAO Shan1,HAN Bing2#,CUI Xiaolan1,SUN Jing1*(1 Institute of Chinese Materia Medica,Beijing 100029;2 Heilongjiang Province Jiren Pharmaly CO.,LTD.,Haerbin,Heilongjiang 150025)Abstract:Objective To investigate the therapeutic effect of Lutongning granules to rat with Trigeminal neuralgia,and provide reference materials for the clinical applications.Methods Trigeminal neuralgia was made by chronic constriction injury of infraorbital nerve in rats.Rats were randomly divided into normal group,sham group,model group,carbamazepine group,Lutongning high dose group(2.70 g crude drugkg-1d-1)and Lutongning low dose group(1.35 g crude drugkg-1d-1).Von Frey Brush brush was used to detect the mechanical pain threshold of rat whisker pad,biochemical method was used to detect the coagulation and hemostream function,HE staining was used to observe the microcirculation change of the infraorbital nerve after perfusion,western blot was used to detect the p38 and p-p38 expression in the trigeminal nerve.Results Lutongning granulethe increased the pain threshold in model rats(P0.05,P0.01),reduced the plasma viscosity(P0.05,P0.01)and the whole blood reduction viscosity in model rats(P0.05,P0.01),improved the flow ability in model rats,increased PT,APTT and TT levels in model rats(P0.05,P0.01),reduced FIB levels(P0.01),improved the microcirculation on the infraorbital nerve in the model rats,reduced the p-p38 expression in the trigeminal nerve of model rats(P0.01).Conclusion Lutongning granules have the effect of improving trigeminal neuralgia,which may be related to the function of promoting blood circulation and removing blood stasis.Keywords:trigeminal neuralgia;chronic constriction injury of the infraorbital nerve;Lutongning granulethe;promoting blood circulation and removing blood stasis;trigeminal neuralgia;rat;carbamazepine三叉神经痛（trigeminal neuralgia,TN）是一种神经系统疾病，主要表现为三叉神经分布区域出现针刺样疼痛，具有自发性和阵发性，以神经脱髓鞘为主要病理改变1。TN 发病机制尚不明确，可能与血管病变有关。血管具有营养三叉神经的作用，血管气血凝滞不畅影响神经的营养、代谢和炎症免疫，引起神经脱髓鞘改变，发生神经疼痛2。目前该病的治疗以现代医学方法为主，但疗效不甚理想，不良反应较严重3。中医药在治疗三叉神经痛方面具有明显优势。三叉神经痛在中医中属于“面痛”“头风”症，中医认中国药物警戒 第 21 卷第 3 期 2024 年 3 月 March,2024,Vol.21,No.325848只大鼠进行眶下神经缩窄环术（ION-CCI）造模：用异氟烷维持大鼠麻醉，将大鼠头部及四肢固定，用 3%碘伏对术侧眶下孔区域进行消毒，经口外鼻旁沿大鼠面鼻沟（颧骨下缘前 1/3 段）向上下方向做一纵行约 1 cm 切口，向触须垫方向钝性分离皮下组织，显露颧肌下缘，钝性分离肌肉周边筋膜，暴露眶下孔，即可见从眶下孔走出的眶下神经（ION），呈扇形分布，找到眶下神经后进行结扎，然后进行缝合，造模后连续 3 d 进行肌内注射青霉素链霉素（每天每只 0.2 mL）预防感染。筛选出造模成功的大鼠随机分为模型对照组（生理盐水）、卡马西平阳性药组（60 mgkg-1d-1）、颅痛宁高剂量组（2.70 g 生药 kg-1 d-1）、颅痛宁低剂量组（1.35 g 生药 kg-1 d-1）4 组、每组 10 只。取 10 只大鼠，只进行手术不进行结扎，设为假手术组。另取 10 只大鼠设为正常对照组。所有大鼠灌胃给药，持续10 d。2.3 指标检测 2.3.1 机械痛阈值 各组大鼠均于手术前、手术当天、手术后测定痛阈值。在疼痛行为学测试前，将大鼠放置于网状金属笼子里，适应周围环境 10 min。用 Von Frey 疼痛测试棒对大鼠的手术同侧须垫部进行刺激，刺激从 0.008 g 开始逐渐增加，每侧 3 次，每次刺激连续 2 下，每次刺激至少间隔 30 s，直到出现阳性反应，记录所采用的刺激强度。大鼠在最大刺激强度 26 g 时仍未出现阳性反应，则将痛阈值记为 26 g，上述刺激连续测定 3 次，每次间隔 10 min，取 3 次测定的平均值为大鼠三叉神经痛阈值。大鼠阳性反应包括退缩反应，表现为刺激时头部退缩，有时伴有刺激同侧面部的洗脸行为；逃跑或攻击行为，表现为避免继续接触刺激物，身体移动远离刺激物或主动咬抓刺激物；非对称性的洗脸，表现为对侧面部至少大于 3 次的不间断性洗脸行为。2.3.2 血流变和凝血功能检测 给药结束后，利用眼眶取血法取血。利用真空负压肝素钠抗凝管采血4 mL，全自动血流变测试仪检测不同切变率（10.00 s-1、60.00 s-1、150.00 s-1）下血浆黏度及全血还原黏度。利用真空负压枸橼酸钠抗凝管采集全血4 mL，以离心半径为10 cm、2 500 r min-1离心15 min,取血浆测定凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplatin time,APTT）、凝血酶时间（thrombin time，TT）、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）水平。为其病机为瘀血阻窍、络脉痹阻、不通则痛。故中医治疗该疾病以化瘀通络、行气止痛为原则4。颅痛宁颗粒是由国医大师卢芳教授研发，由川芎、荜茇组成，具有温通散寒，活血化瘀作用，治疗三叉神经痛效果较好5-6。本研究利用动物实验对颅痛宁颗粒治疗三叉神经痛的效果进行研究，初步推测其可能的作用机制，以期为三叉神经痛的临床治疗提供参考。1 材料1.1 动物 SPF 级 SD 大鼠 60只，雄性，体质量 190220 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK（京）2020-0042。动物实验完全依照中国中医科学院中药研究所实验动物管理委员会的相关规定进行（动物伦理号：2023D012）。1.2 药物与试剂 颅痛宁颗粒提取膏（黑龙江省济仁药业有限公司，批号：220501）；卡马西平（北京诺华制药有限公司，批号：X1799）；组织细胞固定液、明胶（百瑞极生物科技有限公司，货号：BN20094-500 mL、BN39764-100 g）。异氟烷（常州倍弗特自动化科技有限公司，批号：20210302）；P38一抗（武汉三鹰生物技术有限公司，货号：66234-1-ig）；P-P38（CST，货号：4511T）；GAPDH（成都正能生物技术有限责任公司，货号：200306-7E4）。1.3 仪器设备 Von Frey 纤维丝（北京众实迪创科技发展有限责任公司，型号：NC-12775）；铬制羊肠线(上海浦东金环医疗用品股份有限公司，型号：4-0)；电子天平（Ohaus Corp.Brock.WJ.USA，型号：YP1002)。2 方法2.1 药物配置 颅痛宁颗粒临床成人用量 27 g 生药 60 kg-1 d-1（每1 g 提取膏相当于生药 4.085 g），根据体表面积换算法换算为大鼠给药剂量 2.70 g 生药kg-1d-1（0.66 g 提 取膏kg-1d-1）和 1.35 g 生 药kg-1d-1（0.33 g 提取膏kg-1d-1），分别相当于临床等倍剂量和 1/2 倍剂量。2.2 动物分组、造模及给药 实验前适应性训练大鼠，用 Von Frey 毛刷连续刺激大鼠两侧须垫部 6 次，每次间隔时间 30 s，直至大鼠对刺激反应转为平静状态，连续 3 d，两侧交替进行，记录每只大鼠在此期间的平均痛阈值。取中国药物警戒 第 21 卷第 3 期 2024 年 3 月 March,2024,Vol.21,No.32592.3.3 眶下神经组织病理学观察 取血后暴露心脏，用生理盐水进行心脏灌注后再灌注 4%多聚甲醛固定液，然后暴露眶下神经，切取包含缩窄环在内的约0.5 cm 的眶下神经组织，放入 4%多聚甲醛中固定。常规脱水、包埋、进行 HE 染色，观察病理学变化。2.3.4 三叉神经节中 P38 和 P-P38 蛋白水平检测 经心脏灌注后，取三叉神经节保存于-80，备用。取适量三叉神经节提取总蛋白，经上样、电泳后转移到 PVDF 膜上，室温封闭 1 h；加入 P38、P-P38 和GAPDH 一抗，4孵育过夜；再加入 HRP 标记的二抗，室温孵育 1.5 h；加入 ECL 显影剂，TANON 成像仪对条带进行拍照并进行定量分析。2.4 统计学分析 通过 SPSS 20.0 软件进行处理，计量资料以（x-s）表示，多组间比较采用单因素方差分析(one way ANOVA)，组间差异采用 LSD 检验。以 P0.05 为差异有统计学意义。3 结果3.1 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠机械痛阈值的影响造模前，各组大鼠痛阈值在正常范围内波动，各组之间无显著差异。试验期间正常对照组大鼠痛阈值在正常范围内波动；与正常对照组比较，给药第110 d 模型大鼠痛阈值持续降低，具有显著性差异（P0.01）；与模型对照组比较，颅痛宁颗粒高剂量组从给药第 2 天开始，大鼠痛阈值显著提高，具有显著性差异（P0.05，P0.01），颅痛宁颗粒低剂量组从给药第 3 天开始，大鼠痛阈值显著提高，具有显著性差异（P0.05，P0.01）（表 1）。3.2 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠血流变的影响与正常对照组比较，假手术组血浆黏度稍有增加，但无显著性差异；假手术组全血还原黏度稍有增加，其中低切（10-1）和中切（60-1）具有显著性差异（P0.05，P0.01）。与正常对照组比较，模型对照组大鼠的血浆黏度增加明显，具有显著性差异（P0.01）；模型对照组大鼠的全血还原黏度增加明显，具有显著性差异（P0.01）。与模型对照组比较，各药物干预组大鼠的血浆黏度均明显降低（P0.05）；各药物干预组大鼠的全血还原黏度具有明显降低趋势，其中颅痛宁高剂量组的低切（10-1）和中切（60-1）具有显著性差异（P0.05，P0.01）（表 2）。3.3 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠凝血功能的影响与正常对照组比较，假手术组 PT、APTT、TT 水平略有降低，FIB 水平稍有增加，但无显著性差异；与正常对照组比较，模型对照组 PT（P0.05）、表 2 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠血浆黏度及全血黏度的影响（x-s，n=10）Table 2 Effect of Lutongning Granules on plasma viscosity and whole blood viscosity of rats with trigeminal neuralgia（x-s，n=10）组别剂量血浆黏度/mPa.s全血还原黏度/mPa.s低切（10-1）中切（60-1）高切（150-1）正常对照组2.440.1410.411.126.980.873.740.56假手术组2.530.2012.021.58#8.791.41#4.491.02模型对照组4.850.42#15.343.65#12.033.09#7.563.69#卡马西平阳性药组60 mgkg-1d-12.690.22*14.492.7010.461.865.581.43颅痛宁高剂量组2.70 g 生药kg-1d-12.380.18*11.881.14*8.290.83*5.271.49颅痛宁低剂量组1.35 g 生药kg-1d-13.220.21*14.762.7711.082.326.721.21注：与正常对照组比较#P0.01,#P0.05；与模型对照组比较*P0.01,*P0.05Note:Compared with the normal control group#P0.01,#P0.05;compared with the model control group*P0.01,*P0.05表1 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠的机械痛阈值的影响（x-s，n=10）Table 1 Effect of Lutongning granulethe on the mechanical pain threshold of rats with trigeminal neuralgia（x-s，n=10）组别剂量痛阈值/g给药第 1 天给药第 2 天给药第 3 天给药第 4 天给药第 5 天给药第 6 天给药第 7 天给药第 8 天给药第 9 天给药第 10 天正常对 照组19.804.4219.3011.36 19.405.87 19.305.3119.603.7219.504.43 19.404.14 19.402.07 19.303.33 19.402.41假手术组15.705.7815.8012.59 17.906.23 18.603.1719.604.3319.403.90 19.303.02 19.402.99 19.403.57 19.403.03模型对 照组12.103.29#10.101.93#8.201.03#7.801.32#6.401.26#6.101.60#4.401.43#3.551.17#3.221.18#3.001.50#卡马西平阳 性药组60 mg kg-1 d-112.204.5712.003.7411.603.69*11.002.87*10.203.08*9.703.33*8.801.55*6.302.11*6.701.64*7.401.71*颅痛宁高 剂量组2.70 g生药 kg-1 d-112.105.7212.002.67 10.603.66 9.902.56*9.402.46*8.602.80*7.701.49*6.001.83*6.601.71*7.001.70*颅痛宁低 剂量组1.35 g生药 kg-1 d-112.105.8411.903.989.301.649.102.738.402.17*7.901.20*6.301.70*5.800.92*5.301.34*6.101.45*注：与正常对照组比较#P0.01；与模型对照组比较*P0.01,*P0.05Note:Compared with the normal control group#P0.01;compared with the model control group*P0.01,*P0.05中国药物警戒 第 21 卷第 3 期 2024 年 3 月 March,2024,Vol.21,No.3260APTT（P 0.01）、TT（P 0.01）水平降低明显，FIB 水平增加明显（P0.01），具有显著性差异；与模型对照组比较，各药物干预组大鼠的 PT、APTT、TT 水平明显升高，FIB 水平明显降低，颅痛宁高剂量组和低剂量组均具有显著性差异（P 0.05，P0.01）（表 3）。3.4 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠眶下神经组织病理学的影响正常对照组和假手术组大鼠眶下神经纤维分布均匀、排列规则，施万细胞核呈紫色，细胞形态正常未见变性、坏死或增生；模型对照组大鼠眶下神经纤维排列紊乱，施万细胞变细、扭曲增生，间质可见轻度淋巴细胞浸润；颅痛宁高剂量组与卡马西平阳性药组施万细胞增生改善，神经纤维排列较规则，间质淋巴细胞浸润程度减轻；颅痛宁低剂量组与模型对照组比较，差异不明显（图1）。3.5 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠三叉神经节（TG）中 P-P38、P38 蛋白水平的影响造模前后三叉神经节中P38含量变化不大，各组之间无显著差异。与正常对照组比较，假手术组大鼠三叉神经节中P-P38水平稍有升高（P0.05），模型组大鼠三叉神经节中P-P38水平明显升高（P0.05）；与模型对照组比较，阳性药组大鼠三叉神经节中P-P38水平略有降低，但无显著性差异，颅痛宁高剂量组和低剂量组大鼠三叉神经节中 P-P38 水平均明显降低（P0.01）。与模型对照组比较，假手术组大鼠三叉神经节中 P-P38/P38比值稍有升高（P0.05），模型对照组大鼠三叉神经节中 P-P38/P38比值明显升高（P0.01）；与模型对照组比较，阳性药组大鼠三叉神经节中P-P38/P38比值略有降低，但无显著性差异，颅痛宁高剂量组和低剂量组大鼠三叉神经节中P-P38/P38比值均明显降低（P0.01）（图 2，表 4）。表 3 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠凝血功能的影响（x-s，n=10）Table 3 Effect of Lutongning granules on coagulation function in trigeminal neuralgia rats（x-s，n=10）组别剂量凝血四项PT/SECAPTT/SECTT/SECFIB/mgdL-1正常对照组26.8314.2123.995.3340.164.00122.4143.95假手术组24.482.0122.913.5239.258.29156.5719.52模型对照组12.621.92#14.224.44#24.424.49#241.5844.49#卡马西平阳性药组60 mgkg-1d-122.765.23*22.114.31*34.306.66*181.2721.94*颅痛宁高剂量组 2.70 g 生药kg-1d-124.283.11*26.113.39*37.473.93*17521.04*颅痛宁低剂量组 1.35 g 生药kg-1d-115.742.41*18.287.89*32.866.68*205.2718.58*注：与正常对照组比较#P0.01,#P0.05；与模型对照组比较*P0.01,*P0.05Note:Compared with the normal control group#P0.01,#P0.05;compared with the model control group*P0.01,*P0.05图1 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠眶下神经病理组织学的影响（HE,100）Figure 1 Effect of Lutongning Granules on the histopathology of infraorbital neuropathology in rats with trigeminal neuralgia（HE,100）正常对照组卡马西平阳性药组颅痛宁高剂量组颅痛宁低剂量组假手术组模型对照组中国药物警戒 第 21 卷第 3 期 2024 年 3 月 March,2024,Vol.21,No.32614 讨论三叉神经痛是面部神经系统的一种慢性难治性疾病，病程较长且反复发作，严重影响患者的生活质量，多发于 40 岁以后，女性患者较多7。三叉神经痛的发病机制尚未完全阐明可能与血管压迫三叉神经导致局部产生脱髓鞘变化有关。血管硬化、微循环障碍等血管病变可能是疼痛发作的主要原因8-9。神经阻滞、半月神经节射频热凝治疗和手术治疗等西医疗法虽可以缓解疼痛，但局部治疗手段不易持久，易反复发作10，急需寻找新的治疗方法。三叉神经痛在传统医学中属于“面痛”“头风痛”的范畴。黄帝内经中很早就有“颔痛”“颊痛”“目外眦痛”“齿唇寒痛”等与三叉神经痛相似的描述。张氏医通中记载“面痛不能开口言语，手触之即痛”，与现代医学的三叉神经痛近似。中医认为三叉神经痛多为风邪上犯，脉络受阻，气滞血瘀，不通则痛。早在 医林改错头痛 中王清任就大力倡导瘀血头痛之说，提出了外感、内伤、瘀血 3 大致病主因11-12。相关专家认为血瘀导致神经受到血管压迫出现炎性损伤，进而导致神经脱髓鞘诱发神经痛13。活血化瘀是中医内科常用疗法，可疏通经络、改善气血，有效解决因经络受阻、气滞血瘀造成的“不通则痛”问题，将其应用于三叉神经痛患者，可从根本上减轻患者的疼痛14。颅痛宁颗粒由川芎、荜茇 2 味药材组成，温通散寒、活血止痛，临床用于三叉神经痛的治疗，效果显著。在本研究中，采用眶下神经缩窄环术（ION-CCI）建立大鼠三叉神经痛模型，对颅痛宁颗粒治疗三叉神经痛的药效作用进行评价，并从活血化瘀方面开展了机制研究。研究结果显示，颅痛宁的治疗可以提高模型大鼠的痛阈值（P0.05，P0.01），改善模型大鼠的眶下神经的病理损伤，并降低三叉神经节中 P-P38 蛋白水平（P0.01），提示颅痛宁可以有效改善三叉神经痛。P38（protein 38,p38）是丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases,MAPK）家族的一员，是 1 种具有控制炎症反应的蛋白激酶，激活后的 P38 具有磷酸化作用，P-P38 可以诱导多种细胞内反应，参与炎症反应，造成神经细胞死亡，参与神经性疼痛和其他慢性疼痛15-16。多项研究证实，P38 信号通路参与神经脱髓鞘病变，并影响脑原型神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）分泌及神经细胞死亡16-17。建模后的大鼠三叉神经节中 P-P38 蛋白水平增加，产生疼痛反应，而颅痛宁颗粒可以有效减少三叉神经节中的P-P38 蛋白水平，进而减少神经脱髓鞘病变，并增加BDNF 分泌，减少神经细胞死亡，减少疼痛。此外，对模型大鼠的血流变及凝血功能进行了检测。结果显示，颅痛宁颗粒可以有效降低血浆黏度（P0.01）及全血还原黏度（P0.05，P0.01），降低血液黏度改善血流变功能；同时，颅痛宁颗粒可以提高 PT、APTT 和 TT 水平（P0.05，P0.01）并降低 FIB水平（P0.05，P0.01），改善凝血功能。以上血流变及凝血功能结果提示，颅痛宁颗粒具有较好的活血化瘀功效。颅痛宁颗粒可能通过活血化瘀改善神经周围血管微循环，减少血管对神经的压迫，调控P38 信号通路发挥改善三叉神经痛作用。参考文献1 XU D,LIU QW,AI XG,et al.Effect of penetration acupuncture combined with Chuanxiong Chatiao San on pain and sleep of patients with trigeminal neuralgia(exterior wind-cold syndrome)J.Journal of Grassroots Chinese Medicine(基层中医药),2023,2(1):58-63.2 JI Y,DONG YF,ZHOU H.Pathogenesis and treatment of primary trigeminal neuralgiaJ.Chinese Journal of Stereotactic and Functional Neurosurgery(立体定向和功能性神经外科杂志),2019,32(3):182-186.3 YANG XF,QIN XG.Progress in pathogenesis and treatment of trigeminal neuralgiaJ.Journal of Neurology and Neurorehabilitation(神经病学与神图 2 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠三叉神经节中 P-P38、P38 蛋白条带的影响Figure 2 Effect of Lutongning granules on P-P38 and P38 protein bands in trigeminal ganglia in rats with trigeminal neuralgia表 4 颅痛宁颗粒对三叉神经痛大鼠三叉神经节中 P-P38、P38 蛋白水平的影响（x-s，n=4）Table 4 Effect of Lutongning Granules on the levels of P-P38 and P38 proteins in the trigeminal ganglia of rats with trigeminal neuralgia（x-s，n=4）组别剂量P38P-P38P-P38/P38正常对照组0.870.060.040.010.040.01假手术组0.840.060.050.01#0.060.01#模型对照组0.880.050.070.01#0.080.01#卡马西平 阳性药组60 mgkg-1d-10.810.050.060.010.080.01颅痛宁高 剂量组 2.70 g 生药kg-1d-10.830.240.020.01*0.020.02*颅痛宁低 剂量组 1.35 g 生药kg-1d-10.850.080.020.01*0.030.02*注：与正常对照组比较#P0.01以，#P0.05；与模型对照组比较*P0.01，*P0.05Note:Compared with the normol control group#P0.01,#P0.05;compared with the model control group*P0.01,*P0.05381034210337103中国药物警戒 第 21 卷第 3 期 2024 年 3 月 March,2024,Vol.21,No.3262经康复学杂志),2021,17(3):130-134.4 LI WY,DAI EL.Examples of professor DAI Enlai s application of tongqiao huoxue decoctionin the treatment of trigeminal neuralgiaJ.Journal of Practical Traditional Chinese Internal Medicine(实用中医内科杂志),2022,36(5):115-118.5 XUE SM,GE YJ,ZHANG X.Observation of the effect of cranial pain granules combined with flunarizine in the treatment of patients with cold coagulation and blood stasis migraineJ.The Journal of Medical Theory and Practice(医学理论与实践),2022,35(5):770-772.6 LI T,GUO SP,ZHANG JG,et al.Analysis of the clinical value of Cranial Pain Nin Granules in the treatment of migraineJ.Acta Chinese Medicine and Pharmacology(中医药学报),2019,47(4):74-76.7 YANG J,YANG YS.Therapeutic effect of carbamazepine on trigeminal neuralgiaJ China&Foreign Medical Treatment(中外医疗),2019,38(26):34-36.8 WU J,JIA JP.Neurology(神经学)M.3rd Ed,Beijing:People s Medical Publishing House,2015:130-1329 ZHANG JS,NIU HE,ZHANG B.An examination of blood pressure，serum lipids and whole blood voscosity in the patients with trgeminal neuralgiaJ.Journal of Clinical Stomatology(临床口腔医学杂志),2000,16(2):79-8010 WU YP,WANG J,ZHAO X,et al.Professor Li Jun analyzed the case of phlegm,turbidity and stasis in the treatment of trigeminal neuralgiaJ.Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine(四川中医),2021,39(12):13-15.11 YI TD,LI YL,LIANG Y,et al.Textual research on ancient and modern literature analysis and research of classical prescriptions for shentong zhuyutangJ.Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae(中国实验方剂学杂志),2021,27(2):28-3612 CHEN YL.Clinical analysis of promoting blood circulation and removing blood stasis in the treatment of trigeminal neuralgiaJ.China&Foreign Medical Treatment(中外医疗),2022,41(30):191-194.13 MA TF,WANG WL,HUANG SS,et al.Experimental study on the production of a rat trigeminal neuralgia model by injecting relevant inflammatory factors through the infraorbital foramenJ.Acta Universitatis Medicinalis Anhui(安徽医科大学学报),2015,50(6):753-756.14 WEI HL,SONG SQ,WANG JJ.Effect of warm acupuncture combined with modified chaihu shugan powder on serum-endorphin，substance p and oxidative stress for patients with trigeminal neuralgiaJ.Journal o