选修3--专题1--1.2--基因工程的基本操作程序学案(陆德平).doc
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1、(完整版)选修3 专题1 1.2 基因工程的基本操作程序学案(陆德平)1。2 基因工程的基本操作程序学案编者:陆德平 一、目的基因的获取:1目的基因:符合人们需要的,编码蛋白质的。2获取目的基因的方法 (1)从基因文库中获取目的基因基因文库:将含有某种生物不同基因的许多,导入受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。基因组文库:含有一种生物的 基因种类cDNA文库:含有一种生物的基因目的基因的获取根据基因的有关信息:基因的序列、基因在上的位置、基因的产物mRNA、基因的产物蛋白质等特性获取目的基因。(2)利用PCR技术扩增目的基因.PCR:是一项在生物体外特定DNA片
2、段的核酸合成技术。条件:已知目的基因的序列。过程:目的基因DNA受热形成,与结合,然后在_的作用下进行延伸形成DNA。方式:指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)(3)人工合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成.例1、多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95下使模板DNA变性、解链55下复性(引物与DNA模板链结合)72下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是A变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现B复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C延伸过
3、程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸DPCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高二、基因表达载体的构建(1)表达载体的组成:目的基因+标记基因等.(2)启动子:位于基因的,它是结合的部位,驱动基因转录产生mRNA.(3)终止子:位于基因的,终止。(4)表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且给下一代;使目的基因_和发挥作用.(5)标记基因:受体细胞是否含有目的基因。(6)不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同,基因表达载体的构建上也会有所差别。例2、哪项不是基因表达载体的组成部分 A启动子 B终止密码 C标记基因 D目的基因三、将目的基因导入受体细胞(一)转
4、化:目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和的过程。(二)方法1将目的基因导入植物细胞(1)农杆菌转化法农杆菌特点:易感染植物和裸子植物,对_植物没有感染力;Ti质粒的可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上.转化:目的基因插入农杆菌导入植物细胞目的基因整合到植物细胞染色体上目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达.(2)基因枪法 基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高。(3)花粉管通道法 花粉管通道法:这是我国科学家独创的一种方法,是一种十分简便经济的方法.(我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的)2将目的基因导入动物细胞(1)方法:注射技术。(2)操作程序:目
5、的基因表达载体取卵(受精卵) 显微注射注射了目的基因的受精卵移植到_性动物的_内发育新性状动物。3将目的基因导入微生物细胞(1)原核生物特点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等.(2)转化:处理细胞细胞表达载体与感受态细胞混合 _细胞吸收DNA分子。例3、采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的做法正确的是 将毒素蛋白注射到棉受精卵中将编码毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中将编码毒素蛋白的DNA序列,与质粒重组,导入细菌,用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养将编码毒素蛋白的DNA序列,与细菌质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵 A B C D四、目的基因的检测与鉴定1检测 (
6、1)方法:标记了的、抗原抗体杂交。 (2)内容 检测转基因生物染色体的DNA是否插入。 检测目的基因是否转录。检测目的基因是否翻译成。2鉴定:鉴定、抗病鉴定等。例4、目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是检测受体细胞是否有目的基因 检测受体细胞是否有致病基因 检测目的基因是否转录信使RNA 检测目的基因是否翻译蛋白质A B C D1.2 基因工程的基本操作程序练习(1)编者:陆德平 一、单选题1下列属于获取目的基因的方法的是 利用mRNA反转录形成 从基因组文库中提取从受体细胞中提取 利用PCR技术 利用DNA转录
7、人工合成A B CD2不属于目的基因与运载体结合过程的是 A用一定的限制酶切割质粒,露出黏性末端B用同种限制酶切割目的基因,露出黏性末端 C将切下的目的基因插入到质粒的切口处D将重组DNA引入到受体细胞中进行扩增3分辨基因工程是否成功是通过 A提取目的基因 B基因表达载体的构建 C目的基因导入受体细胞 D目的基因的检测与鉴定4下列不属于获取目的基因的方法的是 A利用DNA连接酶复制目的基因 B利用DNA聚合酶复制目的基因C从基因文库中获取目的基因 D利用PCR技术扩增目的基因5下列获取目的基因的方法中需要模板链的是 从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 反转录法 通过DNA合成
8、仪利用化学方法人工合成A B C D6在胰岛素的基因与质粒形成重组DNA分子的过程中,下列哪组是所需要的 同一种限制酶切割两者;不需同一种限制酶切割两者;加入适量的DNA连接酶;不需加DNA连接酶A B C D7下列说法中正确的是 A基因表达载体的构建方法是一致的B标记基因也叫做抗生素基因C显微注射技术是最为有效的一种将目的基因导入植物细胞的方法D大肠杆菌是常用的微生物受体8下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法 A基因枪法 B显微注射法C农杆菌转化法 D花粉管通道法9基因工程中常用的受体细胞不包括A人体细胞 B动物细胞 C植物细胞 D微生物细胞10基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物
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