![点击分享此内容可以赚币 分享](/master/images/share_but.png)
我国传统猪丹毒疫苗及流行株灭活疫苗的免疫保护效力评估.pdf
《我国传统猪丹毒疫苗及流行株灭活疫苗的免疫保护效力评估.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《我国传统猪丹毒疫苗及流行株灭活疫苗的免疫保护效力评估.pdf(6页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、中国预防兽医学报Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine第45卷 第7期2023年7月Vol.45,No.7Jul.2023doi院10.3969/j.issn.1008-0589.202211051我国传统猪丹毒疫苗及流行株灭活疫苗的免疫保护效力评估詹鹏飞1,裴世璇1,宋吉健1,韩忆侬1,关丽君1,薛云1,司丽芳1,2,赵战勤1,2*(1.河南科技大学 动物科技学院/兽医生物制品工程实验室,河南 洛阳471003;2.河南科技大学 动物科技学院/河南省高等学校环境与畜产品安全重点学科开放实验室,河南 洛阳471003)摘要:为评估我国
2、传统猪丹毒灭活疫苗(C43-5株,2型)及其衍生的猪丹毒活疫苗(GC42株和G4T10株)对当前流行株HG-1、Er-2、Er-3和Er-4(1a型)的免疫保护效力,本研究将2种猪丹毒活疫苗(GC42株和G4T10株)分别经皮下注射免疫小鼠,14 d后采用ELISA方法检测小鼠血清中的抗体水平,免疫后15 d,以10 LD50/只分别经腹腔注射攻击传统疫苗检验株C43-6、C43-8,当前流行株HG-1、Er-2、Er-3和Er-4菌液并观察、记录各组小鼠的临床症状和死亡情况,共观察14 d。死亡小鼠立即剖检,采集心、肺、肝等组织进行细菌的分离与鉴定。结果显示,2种活疫苗均能刺激小鼠产生较高的
3、抗体水平,且极显著高于PBS对照组(0.05);攻毒结果显示,分别对应GC42株和G4T10株的6个攻毒组小鼠均无任何临床症状,且均获得100%的保护率;对照组小鼠攻毒后24 h出现相应发病症状,5 d内全部死亡;死亡小鼠各组织器官主要出现败血症的剖检病变;从死亡小鼠的心血、肺、肝等脏器均能分离到猪丹毒丝菌。将我国传统猪丹毒灭活疫苗株C43-5及其检验株C43-6和C43-8,以及当前流行株HG-1、Er-2、Er-3和Er-4分别制备灭活疫苗免疫小鼠2次(间隔21 d),于首免后20 d和35 d分别采用ELISA方法检测抗体水平;小鼠首免后35 d,按上述方法攻毒,并检测相应指标。结果显示
4、,上述7种灭活疫苗免疫小鼠20 d后,均诱导小鼠产生了极显著高于对照组的IgG抗体水平(0.05);首免后35 d与首免后20 d相比,7种灭活疫苗免疫组小鼠的IgG抗体水平虽有所升高,但均无显著差异(0.05)。攻毒结果显示,C43-5、C43-6、C43-8和HG-1株灭活疫苗免疫组小鼠均获得80%(4/5)及以上的保护率,Er-2、Er-3和Er-4株的灭活疫苗仅能对小鼠提供20%60%(1/53/5)的保护率,6个菌株攻击的对照组小鼠均于攻毒后24 h开始发病,5 d内全部死亡。本研究首次将我国3种传统猪丹毒疫苗对当前流行菌株的免疫保护效力进行综合评估,结果表明我国传统猪丹毒活疫苗(G
5、C42株和G4T10株)和灭活疫苗(C43-5株)针对当前流行的猪丹毒丝菌仍具有良好的免疫保护效力。为我国当前猪丹毒疫苗的防控应用提供了借鉴。关键词:猪丹毒丝菌;传统疫苗;小鼠;保护效力中图分类号:S852.65文献标识码:A文章编号:1008-0589(2023)07-0716-06Immune protective efficacy of Chinas traditional vaccines againstthe prevalent strains ofZHAN Peng-fei1,PEI Shi-xuan1,SONG Ji-jian1,HAN Yi-nong1,GUAN Li-jun1
6、,XUE Yun1,SI Li-fang1,2,ZHAO Zhan-qin1,2*(1.Laboratory of Veterinary biologics Engineering,College of Animal Science and Technology,Henan University of Science and Technology,收稿日期:2022-11-29基金项目:国家自然科学基金项目(31672530、U1704117)作者简介:詹鹏飞(1994-),男,河南邓州人,硕士研究生,主要从事家畜传染病及其疫苗研究.*通信作者:E-mail:*Corresponding au
7、thorLuoyang 471003,China;2.Key-Disciplines Lab of safety of environment and Animal Product,College of Animal Science and Technology,Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003,China)Abstract:To evaluate the immune protective efficacy of Chinese traditional swine erysipelas inactivated
8、vaccine(C43-5strain,type 2)and its derived live vaccines(GC42 and G4T10),against the current prevalentstrainsHG-1,Er-2,Er-3 and Er-4(type 1a).In this study,two live swine erysipelas vaccines(GC42 strain and G4T10 strain)wereinjected subcutaneously immunized mice and 14 days later,the serum antibody
9、levels of the mice were detected by ELISA method.Fifteen days after immunization,the conventional vaccine test strains C43-6 and C43-8,as well as the currently prevalent strainsHG-1,Er-2,Er-3 and Er-4,were challenged intraperitoneally to immunized mice at a dose of 10LD50,respectively.The clinicalsy
10、mptoms and death of mice in each group were observed for 14 days.The dead mice were immediately dissected,and the heart,lung,liver and other tissues were collected for bacteria isolation and identification.The results showed that both kinds of livevaccines could stimulate mice to produce higher anti
11、body level,which was significantly higher than that of PBS control group(0.05).The challenge results showed thatthe 6 challenge groups of mice corresponding to GC42 strain and G4T10 strain had no clinical symptoms,and all obtained 100%protection rate.The mice in the control group began to show corre
12、sponding symptoms 24 hours after the challenge,and all diedwithin 5 days.The autopsy of the dead mice mainly showed septic pathological changes characterized by bleeding of varioustissues and organs.can be isolated from the heart,blood,lungs,liver and other organ tissues of dead mice.Theinactivated
13、Chinese traditional swine erysipelas vaccine strain C43-5,its test strains C43-6 and C43-8,and the current epidemicstrains HG-1,Er-2,Er-3 and Er-4 were prepared and immunized mice twice(at an interval of 21 days),and the antibody levelswere detected by ELISA at 20 and 35 days after the first immuniz
14、ation,respectively.35 days after the first immunization,the micewere challenged by the above methods,and the corresponding indexes were detected.The results showed that after immunizing themice with the seven inactivated vaccines for 20 days,the IgG antibody level of the mice was significantly highe
15、r than that of thecontrol group(0.05).Compared with 21days after first immunization,IgG antibody levels of mice immunized with 7 kinds of inactivated vaccines were increased at 35days after first immunization,but there was no significant difference(0.05).The results of challenge showed that the inac
16、tivatedvaccines of C43-5,C43-6,C43-8 and HG-1 strains obtained 80%(4/5)or above protection rate,while the inactivated vaccines ofEr-2,Er-3 and Er-4 strains could only provide 20%-60%(1/5-3/5)protection rate for mice.The control mice challenged by 6strains all began to develop disease 24 hours after
17、the challenge,and all died within 5 days.In this study,for the first time,theimmune protection efficacy of three traditional Chinese swine erysipelas vaccines against the current epidemic strains wascomprehensively evaluated.The results showed that the traditional Chinese live swine erysipelas vacci
18、nes(GC42 strains andG4T10 strains)and inactivated vaccines(C43-5 strains)still had good immune protection efficacy against the current endemicswine.This study provides reference for the prevention and control of swine erysipelas in China.Key words:;traditional vaccines;mice;protective efficacy猪丹毒是猪的
19、一种急性、热性传染病,临床表现为急性败血型、亚急性疹块型和慢性心内膜型,该病在世界范围内广泛流行。在20世纪5080年代,猪丹毒曾是危害我国养猪业的三大传染病(猪瘟、猪丹毒、猪肺疫)之一1。20世纪90年代至21世纪初很少有猪丹毒病例的报道,曾一度认为该病在我国已经消失,但2010年以来,猪丹毒又在我国多个省份发生2-3。因此,该病是一种典型的“老病新发”性细菌传染病。猪丹毒丝菌(,)是丹毒丝菌科丹毒丝菌属()的一种革兰阳性的纤细小杆菌。根据菌体胞壁抗原的差异,通过琼脂扩散试验可将猪丹毒丝菌分为28个血清型(1a、1b、226及N型)。不同血清型菌株之间毒力差异较大,其中1a和1b型的毒力较强
20、4。在20世纪5080年代,我国流行的血清型主要为1a型及少量2型,但2010年以来的临床分离株均为1a型3,5。然而,我国使用的仍是20世纪中期研制的猪丹毒灭活疫苗(C43-5株,2型)及其衍生的猪丹毒活疫苗(GC42株和G4T10株)6。前者是1955年由中国兽医药品监察所研制的猪丹毒氢氧化铝菌詹鹏飞,等.我国传统猪丹毒疫苗及流行株灭活疫苗的免疫保护效力评估第7期717苗7,后者是1965年哈尔滨兽医研究所将强毒株C43-5接种豚鼠连续传370代获得G370株,再将G370株通过雏鸡传42代后获得的GC42株8;以及由江苏省农业科学院在G370株基础上,经不同浓度的吖啶黄培养基中多次传代获
21、得了G4T10株9。在我国,3种疫苗均曾得到广泛应用,且取得了较好的防疫效果。因此,客观评估其针对当前猪丹毒丝菌流行株的免疫保护效果具有重要意义。本研究以我国传统猪丹毒活疫苗(GC42株和G4T10株)及制备的7种猪丹毒灭活疫苗(传统灭活疫苗株C43-5及其检验株C43-6和C43-8,以及当前流行株HG-1、Er-2、Er-3和Er-4)分别免疫小鼠,测定各组小鼠血清抗体水平,并采用传统疫苗检验株C43-6、C43-8和当前流行株HG-1、Er-2、Er-3和Er-4经腹腔攻毒,统计并分析各疫苗对小鼠的免疫保护效果,为当前猪丹毒的防控及其疫苗的研发提供参考依据。1材料与方法1.1菌株、疫苗与
22、实验动物传统猪丹毒灭活疫苗株C43-5(2型)及疫苗检验株C43-6和C43-8由本实验室保存;猪丹毒丝菌1a型分离株HG-1、Er-2、Er-3和Er-4由河南科技大学兽医生物制品工程实验室分离、鉴定及保存10-11(表1)。2种传统猪丹毒活疫苗(GC42株和G4T10株)分别购自辽宁益康生物股份有限公司和中牧实业股份有限公司(2种活疫苗的标准检验菌株均为C43-6和C43-8);使用前,按照活疫苗对小鼠效力的检验标准,采用20%铝胶生理盐水将这两种活疫苗稀释成1/10使用剂量,使活菌含量分别为7.0伊107cfu/mL和5.0伊107cfu/mL6。6周龄7周龄、9周龄10周龄SPF级雌性
23、BALB/c小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。1.2主要试剂胰蛋白大豆琼脂(TSA)和胰蛋白大豆肉汤(TSB)培养基为美国BD公司产品;无支原体新生牛血清购自浙江天杭生物科技有限公司;氯化钠等常规化学试剂购自国药集团化学试剂有限公司;MontanideTMGEL02PR水溶性(简称GEL)佐剂购自赛彼科特殊化学品(上海)有限公司;间接酶联免疫吸附试验(ELISA)相关试剂购自生工生物工程(上海)股份有限公司。1.3灭活疫苗的制备根据参考文献10-12分别制备C43-5株(2型)及 其 疫 苗 检 验 株C43-6株(2型)、C43-8株(1a型)、1a型猪丹毒丝菌临床分离株HG-1、E
24、r-2、Er-3和Er-4灭活疫苗(MontanideTMGEL02PR佐剂),灭活前疫苗中细菌的含量均为3.0伊109cfu/mL。根据 中华人民共和国兽用生物制品规程 中猪丹毒灭活疫苗的成品检测方法进行性状、无菌和安全性检验。1.4猪丹毒活疫苗的小鼠免疫保护试验将90只9周龄10周龄BALB/c小鼠随机均分为3组。第1组和第2组小鼠分别经背部皮下注射猪丹毒活疫苗(GC42株)和G4T10株0.2 mL(0.02头份/只,即GC42株1.4伊107cfu/只、G4T10株1.0伊107cfu/只)13,第3组皮下注射无菌PBS(0.2 mL/只)作为对照组。分别于免疫前和免疫后14 d从每组
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 我国 传统 丹毒 疫苗 流行 株灭活 免疫 保护 效力 评估
![提示](https://www.zixin.com.cn/images/bang_tan.gif)
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。