辽宁省玉米秸秆基质栽培糙皮侧耳菌株筛选评价.pdf
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1、收稿日期:2023-03-16;修回日期:2023-11-29基金项目:揭榜挂帅科技攻关专项资助项目(2021JH1/10400035);辽宁省应用基础研究计划(2022JH2/101300160);辽宁省农村科技特派计划(2022JH5/10400057);辽宁省农业科学院院长基金(2022QN2303);国家食用菌产业技术体系(CARS-20)作者简介:刘国丽,女,助理研究员,主要从事食用菌遗传育种等研究工作。E-mail:通信作者:龚娜,女,副研究员,主要从事食药用菌育种及栽培生理等研究工作。E-mai:糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)是我国主栽食用菌种类之一,富含蛋白
2、质、矿物质、维生素及多种生物活性物质1,还具有较高的保健价值,开发前景广阔。由于糙皮侧耳生长发育快,生物学效率高,抗逆性和抗杂性强,栽培方法简单易行,深受生产者青睐。栽培基质主要为棉籽壳、玉米芯、木屑等,糙皮侧耳产业规模不断发展壮大,对传统基质的需求不断增加,导致生产成本逐年攀升,影响产业的健康发展,急需寻找新型栽培基质,就地取材,降低成本。玉米秸秆中含有丰富的纤维素、木质素、半纤维素和粗蛋白,具有较高的利用价值2。糙皮侧耳菌丝分泌多种胞外酶,包括漆酶、纤维素酶、半纤维素酶等3,能够分解利用多种富含木质纤维素的栽培基质4-5。辽宁省是我国玉米主要产区,秸秆资源丰富,尽管综合利用率在逐年提高,但
3、仍有大量秸秆被废DOI:10.16861/ki.zggc.202423.0157辽宁省玉米秸秆基质栽培糙皮侧耳菌株筛选评价刘国丽,肖军,陈珣,马晓颖,龚娜(辽宁省农业科学院食用菌研究所沈阳110161)摘要:为筛选出适宜辽宁地区以玉米秸秆为主要栽培基质的优良糙皮侧耳菌株,以 19 个糙皮侧耳菌株为试验材料,对菌丝长势、满袋时间、污染率、生物学效率及农艺性状等指标进行测定和比较分析。结果表明,C14 号菌株综合指标优于其他供试菌株,其母种和栽培种在玉米秸秆基质中菌丝长势均较好,生物学效率较高,为 105.8%,子实体菌盖颜色深灰色,菌柄 3.16.8 cm,朵大韧性好,菇型紧凑,菌盖肥厚,中等大
4、小,光泽好,可作为生产用优良菌株。C10、C2 号菌株子实体性状一般,但其母种及栽培种在玉米秸秆基质中菌丝长势强、生物学效率高,利用秸秆能力强,可作为品种选育的备选材料。关键词:糙皮侧耳;菌丝;玉米秸秆;筛选评价中图分类号:S646.1+41文献标志码:A文章编号:1673-2871(2024)02-106-06Screening and evaluation of Pleurotus ostreatus cultivars cultivated oncorn straw substrate in Liaoning provinceLIU Guoli,XIAO Jun,CHEN Xun,MAX
5、iaoying,GONG Na(Institute of Edible Fungi,Liaoning Academy of Agricultural Sciences,Shenyang 110161,Liaoning,China)Abstract:In order to screen the best strains of Pleurotus ostreatus suitable for cultivation with corn straw as the mainsubstrate in Liaoning region,19 P.ostreatus strains were used as
6、test materials in this study,the growth rate of mycelia inPDA,the time of filling the bag,the contamination rate in cultivation bag,the biological efficiency and the agronomiccharacteristics of 19 strains were compared.The results showed that the growth of mycelia of stock culture and cultivationbag
7、 were not completely corresponding to the biological efficiency of fruiting body.In production,mycelium growth,fruiting body traits,biological efficiency and other index should be comprehensively considered for the selection ofstrains.The comprehensive characteristics of strain C14 were best,althoug
8、h the mycelium growth in PDA and corn stalkmatrix were moderate,but its biological efficiency was high,its fruiting body was dark and compact,with short stalk,large and tough type,thick and medium size cap and thick edge.It can be used for the production of excellent strains.Thefruiting body charact
9、er of strain C10 and C2 were general,but their parent species and straw cultivation substrate hadexcellent characters on fast growth,biological efficiency and strong straw utilization ability,which could be used as analternative parent material for breeding.Key words:Pleurotus ostreatus;Mycelia;Corn
10、 stalk;Screening and evaluation中中 国国 瓜瓜 菜菜试验研究2024,37(2):106-111106第2期,等:辽宁省玉米秸秆基质栽培糙皮侧耳菌株筛选评价试验研究弃,尤其是作为食用菌基料化利用的占比很低。另外,由于食用菌菌株的生物学特性、农艺性状易受环境条件影响,同一菌株在不同区域、不同栽培基质情况下呈现较大差异6。因此,依据辽宁省气候特点、栽培模式及秸秆资源开展糙皮侧耳优良菌株筛选评价研究,不仅有利于农业废弃物的资源化利用,还能缓解食用菌栽培原料短缺和价格上涨的问题,促进当地食用菌产业健康可持续发展。笔者以前期初步筛选获得的 19 个糙皮侧耳菌株为试验材料,
11、通过比较分析各菌株的菌丝长势、满袋时间、污染率、生物学效率等指标,对各菌株特点进行综合评价,以期筛选出适合辽宁地区以玉米秸秆为基质的优良菌株,为新品种选育提供优异资源,为实现对辽宁地区玉米秸秆高效资源化利用奠定基础,为糙皮侧耳良种推广提供理论和技术支撑。1材料与方法1.1材料糙皮侧耳供试菌株 19 个,名称及具体编号见表 1,均保藏于辽宁省农业科学院食用菌研究所。表 1供试菌株Table 1Pleurotus ostreatus strains编号No.C1C2C3C4C5C6C7C8C9C10菌株名称Strain2008-A9408黑优抗Heiyoukang原生二号Yuansheng 2春秋
12、抗王Chunqiukangwang早秋 158Zaoqiu 158黑平王Heipingwang春秋 5 号Chunqiu 535003302编号No.C11C12C13C14C15C16C17C18C19菌株名称Strain组织分离Tissue isolate抗病 2 号Kangbing 2高产 8105Gaochan 8105特抗 650Tekang 650早秋 615Zaoqiu 615夏抗 50Xiakang 50灰美 2 号Huimei 2丰优 2010Fengyou 2010组织分离Tissue isolate1.2方法1.2.1母种制作采用加富 PDA 培养基,配方为:马铃薯 20
13、0 g,葡萄糖 20 g,MgSO41.5 g,KH2PO41.5 g,蛋白胨 3 g,琼脂粉 18 g,去离子水 1000 mL,pH 自然。马铃薯去皮、切片,加水煮微沸 30 min 左右 至 酥 而 不 烂,然 后 用 纱 布 过 滤,补 充 滤 液至 1000 mL,加热后再加入葡萄糖 20 g、MgSO41.5 g、KH2PO41.5 g、蛋白胨 3 g,琼脂 18 g,充分溶解后趁热分装到 18 mm180 mm 的试管中,每管约 10 mL,加胶塞后 121 下灭菌 30 min。无菌操作台上接种试管种,25 培养待菌丝长满管备用。1.2.2原种制作采用麦粒培养基进行原种制作,配
14、方为:麦粒 98%、石膏 2%。将无虫蛀、无霉变的小麦用沸水煮 1 h 至麦粒无白芯,沥水捞出后按比例添加石膏充分混合拌匀装入 500 mL 的罐头瓶中,封口膜封口后,在 121 下灭菌 1 h。在接种室内无菌条件下接入母种,然后放入 25 培养箱中发菌 20 d,菌丝长满瓶后待用。1.2.3栽培种制作2020 年 1 月 17 日制作菌袋。培养料配方为:玉米秸秆和玉米芯 78%、麦麸 20%、石膏 1%、石灰 1%,含水量 65%。称取原材料,加水拌匀,使料含水量为 65%。装入规格为 17 cm35 cm0.05 cm 的菌袋,每袋装料 900 g,常压灭菌10 h。待冷却至室温后,无菌条
15、件下接入麦粒原种,每个品种接种 40 袋,置于室内避光培养,2 月 26 日移至出菇大棚,不同菌株间随机区组排列,按常规方法进行出菇管理。1.3项目测定1.3.1母种菌丝长势在无菌条件下,用直径0.5 cm 的打孔器对已经活化好的菌种平板进行打孔,然后将菌饼接入到装有加富 PDA 培养基直径9 cm 平板的中央,置于 25 恒温培养箱中黑暗培养。每日观察菌丝生长情况,培养 6 d 后以“十字划线法”量取菌落直径,比较各菌株菌丝生长情况。每组设置 3 次重复。菌丝生长速率/(cmd-1)=菌落半径/菌丝生长天数。(1)1.3.2栽培种菌丝生物学性状在栽培种发菌过程中定期观察记录各个菌株的菌丝长势
16、、颜色、满袋时间,统计污染率。污染率/%=污染菌包数量/总菌包数100。(2)1.3.3子实体生物学性状及产量当子实体长至七八分熟时进行采收,观察测量子实体生物学性状及产量。每个菌株随机选择子实体 5 个,进行生物学性状测定,包括各菌株子实体的颜色、菌柄长度、韧性、菌盖形状,统计单袋产量,并计算生物学效率。生物学效率/%=子实体鲜质量培养料干质量100。(3)刘国丽,等:辽宁省玉米秸秆基质栽培糙皮侧耳菌株筛选评价107中国瓜菜第37卷试验研究1.4数据统计分析采用 Microsoft Excel 2010 进行试验数据整理,采用 SPSS19.0 进行差异显著性分析。2结果与分析2.1不同糙皮
17、侧耳菌株在母种培养基上长势情况不同糙皮侧耳菌株在 PDA 培养基上菌丝生长情况差异显著。由表 2 可知,母种菌丝颜色分为白色和洁白 2 种,其中 C1、C2、C4、C5、C6、C7、C8、C10、C15、C18 号菌株菌丝为洁白,其余均为白色。从菌丝密度和均匀度来看,C1、C2、C5、C6、C10、C18 号菌株菌丝浓密,其中 C2、C6、C10、C18 号菌丝均匀;C4、C11、C13 号菌丝较均匀且稀疏。参试菌株平均生长速率和菌落直径差异显表 2不同糙皮侧耳菌株在母种培养基上长势比较Table 2Comparison of growth of different Pleurotus ost
18、reatus strains on PDA medium编号No.C1C2C3C4C5C6C7C8C9C10C11C12C13C14C15C16C17C18C19菌丝颜色Mycelia colour洁白Pure white洁白Pure white白White洁白Pure white洁白Pure white洁白Pure white洁白Pure white洁白Pure white白White洁白Pure white白White白White白White白White洁白Pure white白White白White洁白Pure white白White菌丝密度Mycelia density+均匀度Unif
19、ormity较均匀Less uniform mycelium均匀Uniform mycelium较均匀Less uniform mycelium较均匀Less uniform mycelium较均匀Less uniform mycelium均匀Uniform mycelium较均匀Less uniform mycelium较均匀Less uniform mycelium均匀Uniform mycelium均匀Uniform mycelium较均匀Less uniform mycelium较均匀Less uniform mycelium较均匀Less uniform mycelium较均匀Les
20、s uniform mycelium较均匀Less uniform mycelium不均匀Unevenness mycelium较均匀Less uniform mycelium均匀Uniform mycelium均匀Uniform mycelium生长速率Growth rate/(cmd-1)0.57 cde0.78 a0.64 bcd0.49 e0.53 de0.74 ab0.59 cd0.59 cd0.62 cd0.81 a0.64 bcd0.67 bc0.59 cd0.60 cd0.64 bc0.34 f0.40 f0.65 bc0.62 cd菌落直径Diameter of colony
21、/cm6.15 cde7.25 b5.83 cdef4.78 g5.30 fg6.90 b5.75 cdef6.50 cde5.55 def8.25 a6.25 c5.80 cdef5.47 ef5.67 cdef5.77 cdef3.62 h4.08 h6.20 cd5.62 cdef注:+表示菌丝稀疏;+表示菌丝较浓密;+表示菌丝浓密。不同小写字母表示处理间在 0.05 水平差异显著。下同。Note:+means mycelium density is sparse;+means mycelium density is medium;+means mycelium density is t
22、hick.Different small lettersindicate significant difference among treatments at 0.05 level.The same below.108第2期,等:辽宁省玉米秸秆基质栽培糙皮侧耳菌株筛选评价试验研究著。C10 号菌株具有最快的菌丝生长速率和最大的菌落直径,分别为 0.81 cmd-1和 8.25 cm,其中菌落直径显著大于其他菌株。其次为 C2 号菌株,菌丝生长速度和菌落直径分别为 0.78 cmd-1和 7.25 cm。C16 号菌株菌丝生长速率最慢,菌落直径最小。综合菌丝颜色、密度、均匀度及生长速率和菌落直径
23、可以看出,菌丝生长速率最快的 C10、C2、C6 号菌种,其菌丝也最浓密,菌丝洁白均匀。菌株菌丝生长速率和菌丝密度在母种培养基上并不完全一致,比如 C5 号菌丝浓密洁白,但生长速率较慢,为0.53 cmd-1;C11号菌株生长速率较快,为0.62cmd-1,但是菌丝稀疏。2.2不同糙皮侧耳菌株在玉米秸秆基质上生长情况由表 3 可知,各个菌株菌丝在栽培基质中均粗壮,满袋时间为 3038 d。C10、C11、C17 号菌株满袋时间最短,为 30 d,菌丝浓密洁白。C13号菌株满袋时间最长,为 38 d。C11、C19 号菌株菌丝长满袋后,放置时间长会产生较厚的菌皮。从菌包污染率来看,C1、C2、C
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