13份化橘红种质的鉴定研究_叶宾.pdf

热带作物学报 2023,44(2):289-301 Chinese Journal of Tropical Crops 收稿日期 2022-06-21；修回日期 2022-07-26 基金项目 国家重点研发计划中医药现代化研究重点专项（No.2018YFC1706700）；广州市科技计划项目对外科技合作计划项目（No.201807010018）。作者简介 叶 宾（1997），男，硕士研究生，研究方向：园艺植物种质资源利用与生物技术。*通信作者（Corresponding author）：张志珂（ZHANG Zhike），E-mail：；王艳慧（WANG Yanhui），E-mail：。13 份化橘红种质的鉴定研究 叶 宾1，黄洁文2，李 宇2，魏鸿瑶1，吴良肪1，丁 玙1，谷潇雨1，赵杰堂1，胡桂兵1，秦永华1，王艳慧2*，张志珂1*1.农业农村部华南地区园艺作物生物学和种质创制重点实验室/华南农业大学园艺学院，广东广州 510642；2.广州市香雪制药股份有限公司，广东广州 510663 摘 要：为了有效地鉴定和区分化橘红种质，改善市场上橘红产品混乱的现状。本研究以 13 份化州当地不同产区的化橘红（大合黄绒、大合密叶、平定黄绒、平定密叶、平定红肉、山车正毛、带刺正毛、山车凤尾、山车副毛、山车假西洋、山车光青、平定金钱笃、平定实生梨）作为材料，通过植物学形态分析、干品化学成分分析和分子标记分析，并对所得结果进行相关性分析。结果表明：正毛和非正毛种质在叶长、叶形指数、L*、a*和 b*及果形指数上有显著差异：正毛种质的叶形较非正毛的更细长，色差值的绝对值更大，其果型指数偏小，形状上更偏向高扁圆形，而非正毛种质更偏向球形；正毛与非正毛化橘红种质醇溶性浸出物的含量有显著差异，且绝大多数正毛化橘红的野漆树苷含量高于 5.00 mg/g，而二者的柚皮苷和水溶性浸出物均无显著差异；在遗传距离为 15 cM 时，ISSR 和 SRAP 分子标记能够将 13 份种质分成正毛 1 组和非正毛 3 组；当 P0.05 时，仅有果实形状、果型指数与野漆树苷和柚皮苷含量呈显著相关，水溶性浸出物与 L*值呈显著正相关。结合 3 种鉴定结果表明，分子标记区分化橘红种质是最为可靠的，其次利用植物形态（花瓣长度、果实形状与果型指数）或化学成分（野漆树苷和醇浸出物含量）也能在一定程度上区分正毛和非正毛种质。关键词：化橘红；种质鉴定；植物学性状；化学成分；分子标记 中图分类号：S666.3 文献标识码：A The Identification Research on 13 Germplasms of Exocarpium Citrus Grandis YE Bin1,HUANG Jiewen2,LI Yu2,WEI Hongyao1,WU Liangfang 1,DING Yu1,GU Xiaoyu1,ZHAO Jietang1,HU Guibing1,QIN Yonghua1,WANG Yanhui2*,ZHANG Zhike1*1.Key Laboratory of Biology and Germplasm Enhancement of Horticultural Crops in South China,Ministry of Agriculture and Ru-ral Affairs/College of Horticulture,South China Agricultural University,Guangzhou,Guangdong 510642,China;2.Guangzhou Xiangxue Pharmaceutical Co.,Ltd,Guangzhou,Guangdong 510663,China Abstract:Exocarpium Citrus Grandis(ECG)is a medicinal plant of Citrus in Rutaceae.It is a medicine that has great effects.To distinguish the Zhengmao and Non-zhengmao germlplasms,13 ECG germplasms were selected,including Zhengmao germplasms(Dahe huangrong,Dahe miye,Pingding huangrong,Pingding miye,Pingding hongrou,Shanche zhengmao and Shiwan zhengmao)and Non Zhengmao germplasms(Shanche fengwei,Shanche fumao,Shanche jiaxiyang,Shanche guangqing,Pingding jinqiandu,Pingding shishengli).The botanical morphological traits were measured,active substances were analyzed,and molecular markers were carried by the ISSR and SRAP for distinguishing analysis.There were significant differences in length of leaf,leaf shape index,L*,a*and b*.The leaves of Zhengmao germplasms were slenderer than those of Non-zhengmao,the whole leaf was whiter,greener and yel-290 热带作物学报 第 44 卷 lower.There were significant differences in fruit shape and the fruit shape index between Zhengmao germplasms and Non-Zhengmao germplasms.The content of rhubarb glycoside in most Zhengmao germplasms was higher than that of Non-zhengmao samples,except the Shanche fumao.The content of alcohol soluble extract was also significantly different between the germplasms.The clustering results of ISSR and SRAP showed that when the genetic distance of the two molecular markers was 15 cM,the 13 germplasms could be divided into one Zhengmao and three Non Zhengmao groups.The correlation analysis between germplasm botany and medicinal components showed that,when P0.05,only the fruit shape and fruit shape index were significantly correlated with the content of wild rhubarb glyco-side and naringin,the water-soluble extract was significantly positively correlated with L*.To conclude,when combined with the three identification results,the molecular marker is the most reliable to distinguish the germplasm of ECG,the plant morphology(petal length,fruit shape and fruit shape index)or medicinal components(content of wild rhubarb glycoside and alcohol extract)can also distinguish these germplasm to a certain extent.Keywords:Exocarpium Citrus Grandis;germplasm identification;btanical characters;chemical composition;molecular marker DOI:10.3969/j.issn.1000-2561.2023.02.008 化橘红为芸香科（Rutaceae）柑橘属（Citrus）化州柚（Citrus grandis Tomentosa）或柚Citrus grandis(L.)Osbeck的未成熟或近成熟的干燥外层果皮，通过清洗、杀青、烘干、修剪、陈放后得到。化橘红是一种广东省的道地药材，一般产自广东省化州市，因其含有丰富的二氢黄酮、野漆树苷、柚皮苷等成分，具有散寒燥湿、利气消疾、止咳化痰及健脾消食等功效，素有“南方人参”的美誉，随着产业的扩张，化橘红在市场上出现的问题也日益明显，以假充真、以次充好或产品标识不全的现象充斥在化橘红交易市场中。以化州当地果农的习惯，根据果实表面绒毛多少，可将化橘红品系分为 6 类：正毛、黄龙正毛、密叶正毛、副毛、假西洋、光青1。正毛化橘红与非正毛化橘红的种苗在外观形态上非常相似，运用传统的形态学方法很难加以区分。有研究证明毛橘红的药用价值更高2，其售价也会更高，由于市场的不规范导致利用光橘红冒充毛橘红的现象出现。因此，如何对不同种质的化橘红进行辨别和分类，对于农户和市场来说都是一个亟需解决的问题3。能否通过多种手段对化州当地不同产区的正毛化橘红和非正毛化橘红进行鉴定和区分，相关文献中大多采用一种方法（如分子标记或形态学分析）进行鉴定。因此，本研究通过植物性状观察、结合化学分析成分以及利用分子标记技术对化州不同产地的 13 份化橘红材料进行种质鉴别，为更好地对不同种类的化橘红进行有效辨别和鉴定提供参考。1 材料与方法 1.1 材料 以化州当地传统分类的正毛化橘红（大合黄绒、大合密叶、平定黄绒、平定密叶、平定红肉、山车正毛、带刺正毛）和非正毛化橘红（山车凤尾、山车副毛、山车假西洋、山车光青、平定金钱笃、平定实生梨）共 13 份化橘红种质作为供试材料，每种化橘红共收集健康且生长状况相近的花 30 朵、叶 15 片及大小相近的果实 10 个用作植物学性状特征的测定和分析，其中叶片采自树体上方每个春梢的前 15 片新叶，花主要采自树体上方每个春梢的前 110 朵花，果实主要采自树体下方生长较密集的区域；以其果实干品为材料进行药用成分的提取；以叶片作为材料提取 DNA，以供后续分子标记实验使用。1.2 方法 1.2.1 化橘红种质植物学特征性状的测定 本研究对化橘红种质植物学特征的测定主要参照柑橘种质资源描述规范（NY/T 29302016），对叶片进行叶形、叶长、叶宽、叶型指数、叶缘形状、翼叶长、翼叶宽、叶尖形状、翼叶形状、叶基形状和 L*、a*、b*等植物学特征性状进行测定。以叶型指数=叶长/叶宽的计算公式对叶型指数进行计算；用色差仪测定每片叶片的颜色；肉眼观察叶缘形状、叶基形状等其他植物学性状并记录；每个种质随机取其中 2 片叶片，拍摄其正反面。对化橘红种质的花瓣颜色、花瓣数量、花瓣长度、花瓣宽度、花形指数、花粉数量、花柱及雄蕊数这 8 项植物学特征性状进行测定和数据记录。花型指数=花瓣长/花瓣宽；每个种质随机取出其中 2第 2 期 叶 宾等：13 份化橘红种质的鉴定研究 291 朵花，拍摄其正侧面。对化橘红种质的单果重、果面颜色、中果皮颜色、果实纵横径、果型指数、果基形状、有无果颈、果基凹陷、果顶形状、果顶印圈等植物学特征性状进行测定和数据记录；每个种质取出其中 3 个果实，拍摄其正面、侧面、背面、横切面和纵切面的照片。1.2.2 化橘红种质的化学成分检测分析 本研究主要对化橘红化学成分中的总黄酮（柚皮苷）、野漆树苷、水溶性浸出物（包含多糖物质、水溶果胶、水溶性维生素、水溶蛋白和无机盐等）和醇溶性浸出物（包括皂苷类成分等）4 项指标进行提取和检测，每种指标测定重复 5 次。依据地理标志保护产品 化橘红4所提供的方法，测定化橘红种质的总黄酮（柚皮苷）含量；依据中华人民共和国药典2015 年版5，利用 HPLC 测定化橘红种质的野漆树苷含量；参照中华人民共和国药典四部 20206的方法，测定水溶性浸出物和醇溶性浸出物。1.2.3 分子标记鉴定化橘红种质 采用 CTAB 法提取叶片 DNA，参照张静芳等7的方法，确定用于 ISSR 的单引物共 14 个（表 1）和 SRAP 的引物共 20 对（表 2）。参照赵依杰等8的方法确定 ISSR 的反应体系，PCR 扩增程序：94预变性 3 min；94变 表 1 本研究 ISSR 分子标记引物 Tab.1 Primers of ISSR molecular marker used in this study 引物 Primer 序列（53）Sequence（53）引物 Primer 序列（53）Sequence（53）Z807 AGAGAGAGAGAGAGAGT Z842 GAGAGAGAGAGAGAGAYG Z809 AGAGAGAGAGAGAGAGG Z847 CACACACACACACACAYC Z810 GAGAGAGAGAGAGAGAT Z848 CACACACACACACACARG Z825 ACACACACACACACACT Z855 ACACACACACACACACYT Z826 ACACACACACACACACC Z867 GGCGGCGGCGGCGGCGGC Z834 AGAGAGAGAGAGAGAGYT Z873 GACAGACAGACAGACA Z840 GAGAGAGAGAGAGAGAYT Z881 GGGTGGGGTGGGGTG 表 2 本研究 SRAP 分子标记引物组合 Tab.2 Primers of SRAP molecular marker used in this study 序号 No.上/下游 Forward/Reserve 引物组合Primer pair 序列（53）Sequence(53)序号No.上/下游 Forward/Reserve引物组合 Primer pair 序列（53）Sequence(53)上游引物 Me1 TGAGTCCAAACCGGATA 上游引物 Me4 TGAGTCCAAACCGGACC1 下游引物 Em1 GACTGCGTACGAATTAAT11下游引物 Em3 GACTGCGTACGAATTGAC上游引物 Me1 TGAGTCCAAACCGGATA 上游引物 Me4 TGAGTCCAAACCGGACC2 下游引物 Em2 GACTGCGTACGAATTTGC12下游引物 Em4 GACTGCGTACGAATTTGA上游引物 Me2 TGAGTCCAAACCGGAGC上游引物 Me4 TGAGTCCAAACCGGACC3 下游引物 Em1 GACTGCGTACGAATTAAT13下游引物 Em5 GACTGCGTACGAATTAAC上游引物 Me2 TGAGTCCAAACCGGAGC上游引物 Me5 TGAGTCCAAACCGGAAG4 下游引物 Em3 GACTGCGTACGAATTGAC14下游引物 Em3 GACTGCGTACGAATTGAC上游引物 Me2 TGAGTCCAAACCGGAGC上游引物 Me6 TGAGTCCAAACCGGTAG 5 下游引物 Em4 GACTGCGTACGAATTTGA15下游引物 Em2 GACTGCGTACGAATTTGC上游引物 Me2 TGAGTCCAAACCGGAGC上游引物 Me7 TGAGTCCAAACCGGTTG 6 下游引物 Em5 GACTGCGTACGAATTAAC16下游引物 Em2 GACTGCGTACGAATTTGC上游引物 Me3 TGAGTCCAAACCGGAAT上游引物 Me9 TGAGTCCAAACCGGTCA 7 下游引物 Em1 GACTGCGTACGAATTAAT17下游引物 Em5 GACTGCGTACGAATTAAC上游引物 Me3 TGAGTCCAAACCGGAAT上游引物 Me18 TGAGTCCAAACCGGAAG8 下游引物 Em2 GACTGCGTACGAATTTGC18下游引物 Em2 GACTGCGTACGAATTTGC上游引物 Me3 TGAGTCCAAACCGGAAT上游引物 Me19 TGAGTCCAAACCGGTAA 9 下游引物 Em5 GACTGCGTACGAATTAAC19下游引物 Em1 GACTGCGTACGAATTAAT上游引物 Me4 TGAGTCCAAACCGGACC上游引物 Me20 TGAGTCCAAACCGGTCC 10 下游引物 Em1 GACTGCGTACGAATTAAT20下游引物 Em1 GACTGCGTACGAATTAAT292 热带作物学报 第 44 卷 性 30 s，根据不同的引物调整最适退火温度，退火 1 min，72延伸 1 min，35 个循环；72延伸10 min。参照燕佳文等9的方法确定 SRAP 的总反应体系，PCR 扩增程序：94预变性 5 min；94变性 1 min，根据不同的引物调整最适的退火温度，退火 1 min，72延伸 1 min，共 5 个循环；紧接以上反应条件后 94变性 1 min，最适温度下退火 1 min，72下延伸 1 min，35 个循环；72延伸 10 min。PCR 产物均由 2%的琼脂糖凝胶检测，130 V 下电泳 60 min，所得产物于凝胶成像系统下观察。1.3 数据处理 采用 SPSS 23.0 软件对所测定每份种质的叶、花、果等数量性状进行平均值和标准差的计算，并以平均值标准差的形式表示各项数据；计算每份种质中各项化学成分指标的平均值和标准差。根据 Neis 遗传一致度，采用 SPSS 23.0 软件将化学成分含量的测定结果结合性状的测定结果利用非加权配对算数平均法（unweighted pair group method using arithmetic average，UPGMA）对其进行相关性聚类分析。利用 Popgen 32 软件对 ISSR 和 SRAP 条带进行观察和记录，无特异性条带的地方记为“0”，有则记为“1”，采用 SPSS 23.0 软件根据 Neis 遗传一致度，用 UPGMA 将 ISSR 和 SRAP 分子标记结果进行整合，对 13 份化橘红种质进行遗传聚类分析。2 结果与分析 2.1 植物学特征性状数据的整理和分析 13 份化橘红种质的性状测定结果见表 3。13份种质在叶缘形状、翼叶形状和叶基形状上无显著差异；大部分正毛种质的叶显著比非正毛更长；正毛的叶宽与非正毛的无显著差异；叶型指数上，若以 1.90 为阈值，非正毛种质中山车凤尾、山车假西洋、山车光青、山车副毛、平定金钱笃和实生梨形皆小于 1.90，正毛中除平定红肉和带刺正毛外皆大于 1.90，说明大部分正毛种质的叶要比非正毛更细长；在色差测定中，若以 L*值 42.00为阈值，所有非正毛种质均小于 42.00，正毛中仅有平定红肉和带刺正毛小于 42.00，说明正毛种质的叶总体上比非正毛更偏白；从所测 a*值可知所 表 3 化橘红种质的叶性状测定结果 Tab.3 Results of leaf characters about 13 ECG germplasms 种质 Germplasm 叶长 Leaf length/mm 叶宽 Leaf width/mm 叶型指数 Leaf shape index 翼叶长 Length of winged peti-ole/mm 翼叶宽 Width of winged peti-ole/mm 叶尖形状Shape of leaf tipL*a*b*山车凤尾 106.7127.29a 50.304.68b 1.830.46 11.281.92b 19.124.93b短尖 39.081.72b 14.440.88a 20.141.70b山车正毛 100.6610.61a 51.396.37b 1.970.20a 14.132.29a 19.803.41b短尖 43.222.86a 17.511.85a 28.633.45a山车假西洋 83.347.25b 48.813.86b 1.730.16 10.492.62 15.243.42b短尖 41.011.61b 15.740.90a 22.571.99山车光青 89.8821.35b 64.493.28a 1.390.33b 9.402.54b 16.123.45b钝尖 40.482.14b 16.342.29a 23.864.01b山车副毛 104.946.90a 61.095.82a 1.730.18b 14.331.51a 25.915.05a钝尖 38.223.40b 14.113.46a 20.085.70b平定金钱笃 97.2610.04b 52.645.66b 1.860.20b 14.852.40a 27.073.96a短尖 35.435.03b 11.991.43b 17.726.10b平定黄绒 110.728.82a 52.934.75b 2.100.21a 17.375.20a 23.408.11b短尖 44.746.41a 17.163.23a 28.879.09a平定密叶 111.966.10a 57.734.41a 1.950.12a 12.511.88b 19.282.49短尖 51.013.19a 20.360.35a 36.572.75a平定红肉 119.1210.12a 65.857.96a 1.820.13b 15.462.34a 27.255.79a短尖 31.868.50b 11.450.93b 18.397.36b实生梨形 92.4710.36b 58.854.11a 1.570.21b 9.882.23b 15.933.35b钝尖 39.494.17b 15.711.52a 22.663.98b大合黄绒 109.6227.00a 54.596.75b 2.040.52a 17.571.71a 32.9713.19a短尖 48.627.72a 17.983.70a 32.939.75a大合密叶 100.0510.79a 53.165.12b 2.080.15a 13.422.65b 23.522.71b短尖 51.597.31a 19.042.83a 35.747.89a带刺正毛 63.056.65b 44.915.54b 1.410.12b 10.132.86b 18.994.87b钝尖 36.191.16 10.140.97b 14.762.05b注：同列不同小写字母表示差异显著（P0.05）；表中未列举出的叶片性状为 13 份种质的观测结果相同的性状，分别为叶形（均为卵圆形）、叶缘形状（均为波状缘）、翼叶形状（均为倒卵形）、叶基形状（均为广楔形）。Note:Different lowercase letters in the same column indicate significant difference(P0.05);The leaf characters not listed in the Tab.3 are the same as the observed results of 13 germplasms,which are the leaf shape(all oval),the blade edge shape(all undulate margin),the wing shape(all obovate),the blade base shape(all are wide wedge).第 2 期 叶 宾等：13 份化橘红种质的鉴定研究 293 有非正毛种质（山车凤尾、山车假西洋、山车光青、山车副毛、平定金钱笃、实生梨形）均大于17.00，正毛种质除平定红肉和带刺正毛外均小于17.00，说明大部分正毛种质的叶比非正毛更偏绿；从所测 b*值可知所有非正毛种质（山车凤尾、山车假西洋、山车光青、山车副毛、平定金钱笃、实生梨形）均小于 25.00，正毛种质除平定红肉和带刺正毛外均大于 25.00，说明大部分正毛种质的叶比非正毛更偏黄。花的性状测定结果见表 4，在花瓣数量、花瓣颜色和花柱状况上这 13 份种质无显著差异；在花瓣长度上，非正毛种质山车凤尾、山车光青、山车副毛、平定金钱笃和实生梨形的均值均在23.00 mm 以下，而正毛种质除平定黄绒、大合黄绒和大合密叶外，剩余均在 23.00 mm 以上，最大的是平定密叶，均值为 36.77 mm；在花瓣宽度上，非正毛种质山车凤尾、山车光青、山车副毛和实生梨形的均值均小于 9.50 mm，仅有平定金钱笃大于 9.50 mm，为 9.67 mm，而在正毛种质中有平定黄绒、平定密叶、大合黄绒和大合密叶 4 份种质大于 9.50 mm，剩余正毛种质的花瓣宽度均大于9.50 mm，最大的是带刺正毛，均值为 10.91 mm；在花粉数量上，山车凤尾、山车假西洋和平定金钱笃的花粉数量测定为中或少，3 份均为非正毛种质；在雄蕊数上，两类种质无显著差异。果实性状测定结果见表 5。13 份化橘红种质在放射沟纹、果顶印圈、果顶凸环、果皮颜色、果心充实度和中果皮颜色这 6 个性状中无显著差异；在果形上，正毛和非正毛种质有显著差异，其中山车假西洋、山车光青、山车副毛、平定金钱笃和实生梨形等非正毛种质中果形指数大于0.95，多呈球形或梨形，而正毛种质果实果型指数小于 0.95，整体呈高扁圆形，差异显著；在果顶形状上，非正毛种质多呈平滑状，正毛种质多浅凹；在果基形状上，2 类种质无显著差异。以平均果型指数 0.95 作为分界时，可见非正毛种质山车凤尾、山车假西洋、山车光青、山车副毛和实生梨形的果型指数均大于 0.95，仅有平定金钱笃小于 0.95；正毛种质中有山车正毛和大合密叶果型指数大于 0.95，剩余正毛种质中平定黄绒和平定红肉的果形指数分别为 0.81 和 0.89，小于0.90，和非正毛种质差异较大。从果实横纵径也可看出，正毛种质的果实形状相比非正毛种质更趋向于扁圆，而非正毛种质果实更趋向于球形。表 4 化橘红种质的花性状测定结果 Tab.4 Results of flower characters about 13 ECG germplasms 种质 Germplasm 花瓣数 Number of petals 花瓣颜色 Petal color 花瓣长 Length of petal/mm 花瓣宽 Width of petal/mm 花型指数 Flower shape index 花粉数量 Pollen quantity 雄蕊数 Number of stamens 花柱状况 Style 山车凤尾 4.10.3a 白色 19.012.77b8.221.16a2.332.20b中 33.62.3a 直立 山车正毛 4.10.3a 白色 24.762.19b10.220.99a2.440.21a多 33.22.0a 直立 山车假西洋 4.20.4a 白色 26.320.97a10.080.63a2.620.15a中 33.72.6a 直立 山车光青 4.20.4a 白色 21.582.05b9.191.17a2.370.25b多 32.32.1a 直立 山车副毛 4.10.3a 白色 21.323.12b8.711.29a2.460.30a多 31.22.7b 直立 平定金钱笃 4.20.4a 白色 22.813.66b9.671.10a2.370.27b少 32.73.0a 直立 平定黄绒 4.70.6a 白色 21.603.40b8.561.41a2.550.23a多 34.04.0a 直立 平定密叶 4.20.4a 白色 36.772.22a7.200.88b2.330.30b多 32.83.2a 直立 平定红肉 4.10.3a 白色 23.333.53b9.741.16a2.400.33a多 37.22.9a 直立 实生梨形 4.00.0a 白色 16.122.10b7.420.88b2.200.33b多 36.83.5a 直立 大合黄绒 4.10.3a 白色 18.532.69b7.410.86b2.560.30a多 35.33.8a 直立 大合密叶 4.10.3a 白色 18.840.94b8.660.79a2.180.19b多 31.92.4b 直立 带刺正毛 4.10.3a 白色 25.720.88a10.910.72a2.360.32b多 36.23.0a 直立 注：同列不同小写字母表示差异显著（P0.05）。Note:Different lowercase letters in the same column indicate significant difference(P0.05).294 热带作物学报 第 44 卷 表 5 化橘红种质的果实性状测定结果 Tab.5 The determination results of fruit characters about ECG 种质 Germplasm 果实形状 Fruit shape 果顶形状 Shape of fruit top 果基形状 Shape of fruit base 单果重 Single fruit weight/g 果实横径 Fruit transverse diameter/mm果实纵径 Fruit longitudinal diameter/mm 果型指数Fruit shape index 光滑度 Fruit peel 有无绒毛 Little hairs on the peel中果皮颜色Color of sarcocarp山车凤尾 高扁圆形 平 浅凹 85.467.03a62.005.86a58.424.32a 0.950.04a 粗糙 较少 黄白色 山车正毛 高扁圆形 平 浅凹 64.1815.80b62.1613.33a61.3315.26a0.980.04a 粗糙 有 黄白色 山车假西洋 球形 平 平 65.1413.95b55.145.10b52.344.43a 0.950.04a 粗糙 较少 黄白色 山车光青 球形 平 浅凹 104.6711.21a69.763.92a69.954.47a 1.000.05a 光滑 无 白色 山车副毛 高扁圆形 平 浅凹 88.326.47a53.448.36b53.007.20a 1.000.10a 粗糙 较少 黄白色 平定金钱笃 球形 浅凹 平 102.2515.96a70.385.12a65.844.22a 0.940.08b 粗糙 有 黄白色 平定黄绒 高扁圆形 浅凹 平 121.1517.95a75.182.96a61.284.73a 0.810.05b 粗糙 有 黄白色 平定密叶 高扁圆形 浅凹 浅凹 55.517.03b51.812.76b47.213.15b 0.910.05b 粗糙 有 黄白色 平定红肉 高扁圆形 浅凹 平 59.387.96b55.482.63b49.374.93b 0.890.07b 粗糙 有 黄白色 实生梨形 梨形 平 平 86.497.74a65.662.88a64.683.67a 0.990.04a 粗糙 较少 黄白色 大合黄绒 高扁圆形 浅凹 平 64.306.68b50.652.37b47.593.64b 0.940.05b 粗糙 有 黄白色 大合密叶 高扁圆形 浅凹 短颈 31.185.74b41.032.63b41.362.85b 1.000.04a 粗糙 有 黄白色 带刺正毛 高扁圆形 浅凹 短颈 48.298.99b49.095.75b47.134.08b 0.940.08b 粗糙 有 黄白色 注：同列不同小写字母表示差异显著（P0.05）；表中未列举的果实性状为 13 份种质观测结果相同的性状，分别为放射沟纹（均无）、果顶印圈（均无）、果顶凸环（均无）、果皮颜色（均为绿色）、剥皮难易（均为难）、果心充实度（均为充实）。Note:Different lowercase letters in the same column indicate significant difference(P0.05);The fruit characters not listed in the Tab.5 are the same as the observed results of 13 germplasms,which are the radial groove(none),the fruit top seal ring(none),the apical convex ring(none),peel color(all green),peeling difficult or easy(difficult),the fruit core fullness(full).2.2 化橘红种质干品的化学成分 化橘红种质的化学成分检测结果见表 6。在13 份化橘红样品中，绝大多数正毛种质的野漆树苷平均含量高于 5.00 mg/g，平均含量最高的种质为大合黄绒和山车正毛，分别达到了 11.80 mg/g和 11.59 mg/g；6 份非正毛样品除山车副毛（5.01 mg/g），其他种质的野漆树苷平均含量均低于 5.00 mg/g，尤其是山车假西洋和平定实生梨形，含量低于 1.00 mg/g，非正毛种质的野树漆苷含量与正毛有显著差异，可以一定程度上区分出正毛和非正毛化橘红。13 份材料中有 8 份化橘红样品（其中包括 3份正毛和 5 份非正毛材料）的柚皮苷平均含量高于 80.00 mg/g，平均含量最高为平定金钱笃（124.53 mg/g），非正毛的山车光青和山车副毛柚皮苷平均含量分别为 117.57 mg/g 和 106.35 mg/g，剩余 5 份材料的柚皮苷含量均低于 80.00 mg/g，其中最低为山车凤尾（25.30 mg/g），另外 4 份为正毛化橘红；待测种质中正毛和非正毛化橘红中均存在柚皮苷含量相对较高且含量接近的种质，因此不能完全将正毛种质和非正毛种质区分开来；平定黄绒种质柚皮苷含量要低于大合黄绒，而大合密叶则比平定密叶要低，说明不同的产区或地理条件也可能影响化橘红种质的柚皮苷含量。表 6 化橘红种质的化学成分含量 Tab.6 Content of chemical composition results about 13 ECG germplasms 种质 Germplasm野漆树苷 Wild rhubarb glycoside/(mgg1)柚皮苷 Naringin/(mgg1)水溶性浸出物 Aqueous extract/%醇溶性浸出物Alcohol extract/%平定黄绒 3.920.24b 72.615.38b 37.67 26.69 平定红肉 5.280.38b 74.913.22b 40.69 32.21 平定金钱笃 2.340.16b 124.539.63a 39.42 34.33 平