清洁工艺验证检查综合指南模板.doc

Validation of Cleaning Processes (7/93) 清洁工艺验证清洁工艺验证检验指南注：此指南是 FDA 检验官和其工作人员参考资料。此文件不约束 FDA，也不给予任何人任何权利，特权，利益或豁免权。介绍自从 FDA 各文件，包含化学原料药检验指南和生物技术检验指南简单地提出了清洁验证这个话题以后，相关清洁工艺验证已经引发了相当多讨论。这些官方文件，全部清楚地确定了对于清洁工艺需要被验证期望。经过讨论那些已被认为可接收（或不可接收）实际情况，此指南是为了建立检验连贯一致性。同时，必需意识到，和其它工艺验证一样，清洁验证方法也不止一个。最终，全部过程验证检验标准是，检验其科学数据能否证实该系统一直如一地达成预期目标，结果稳定地符合预先制订标准。 本指南仅适适用于设备化学残留物清洁验证。 背景1963 年 GMP 法规（133.4 节）要求以下“设备需要被维持在一个清洁、有序状态”。还有一个很相同相关设备清洁章节是在 1978 年 GMP 法规（211.67 节）。同这些法规相比，FDA对于设备在使用前应被清洁要求并不是什么新要求。当然，对于设备清洁总标准是为了预防产品污染或掺杂其它物质。从历史事件看来，FDA检验官发现了部分显著不卫生是因为设备清洁和维护不到位，或防尘控制系统不妥。过去FDA 更多关注于非青霉素类产品和青霉素类产品，或药品和甾类产品和激素类产品之间交叉污染问题。在过去十年中，有大量产品召回事件全部是因为实际或潜在青霉素交叉污染。1988 年召回消胆胺树脂事件，使 FDA 对于潜在交叉污染问题日益重视。那次召回原因是用于生产制剂原料药被农业杀虫剂生产中低剂量中间体和降解物给污染了。造成这次交叉污染原因是因为反复使用了回收溶剂引发。而回收溶剂被污染原因是因为对反复使用溶剂桶缺乏控制。这些桶之前是用于贮存杀虫剂生产线产生回收溶剂，以后又被反复地用于树脂生产线使用回收溶剂贮存。该企业对于这些溶剂桶缺乏有效控制，对于贮存溶剂缺乏合适检测，对于溶剂桶清洁过程也没有进行验证。一部分被杀虫剂污染原料药被供给了在另一地址厂进行最终制剂生产，这就造成2翻译：Cuckoo (); 校对并解读：Chank () 注：个人学习、交流使用，不得用于商业目标。 了该厂流化床干燥机袋子被杀虫剂污染了。转而造成此厂生产众多批次产品被污染，尽管该厂并不生产杀虫剂。1992 年，FDA对一家海外原料药生产商发出了进口警告。该厂使用相同设备生产强效甾类产品和非甾类产品。所以企业是多品种原料药生产厂家，FDA 认为潜在交叉污染可能性很大，对公众健康造成了严重威胁。该企业只是在 FDA 检验近期才开展了清洁验证工作，而 FDA 认为该清洁验证工作是不妥。理由之一是，工厂仅寻求没有前一个物质存在证据。不过用薄层法检测洗涤水后，找到了设备中还残留了前一产品生产过程中反应副产物和降解产物残留物。基础要求FDA 期望企业建立书面程序（SOPs）用于具体描述设备各部件清洁过程。假如企业用同一程序进行相同产品不一样批次之间清洗，而使用不一样程序进行转产之间清洗，企业书面程序应明确说明这些不一样情况。一样，若水溶性残留物和非水溶性残留物清洗方法不一样，则企业书面程序也应说明两种情况，并清楚地要求在何种情况下实施哪个程序。对于化学原料药生产中会产生柏油状或粘胶状残留物生产工序，因为这些物质不轻易被清除，企业能够决定使用专用设备。流化床干燥机袋子，作为一种不轻易被清洗设备，也通常只被专用于某一特定产品生产。对于清洁过程本身留下残留物（清洁剂，溶剂等），也必需被去除。FDA 期望企业建立书面清洁工艺验证通则。FDA 期望这个清洁工艺验证通则要求，验证实施责任人，同意验证工作责任人，接受标准，再验证时间。FDA 期望对于每一个生产系统或每一个设备，企业应预先制订具体书面验证方案，其中应明确要求如取样方法、分析方法（包含方法灵敏度）等方面问题。FDA 期望企业依据方案进行验证工作，并统计归档验证结果。FDA 期望形成一个最终验证汇报，汇报应经过管理层同意，并说明该清洗方法是否有效。数据应该能够支持以下结论，残留物质已经被降低到一个“可接收水平”。 清洁验证评定第一步是明确验证目标。我们曾发觉有部分企业没有建立验证目标。如常见部分生产商，在清洁以后进行了大量取样和检测程序，而没有真正去评定各步清洗操作有效性。在评定清洁工序时，有一系列问题需要被关注。比如，抵达哪个点/程度，一个设备或系统算是清洁了？是不是一定要用手擦洗？用手擦洗达成了什么效果，而只用一个溶剂清洗是达不到？批和批之间或产品和产品之间，人工清洗差异有多大？这些问题答案，对于检验和评定清洁过程来说是很关键，因为检验官必需要全方面评定该过程有效性。而且这些问题答案也有利于省去多出步骤，能更有效地工作，从而为企业节省资源。 检验每个设备有多个清洗方法。理想情况是一个设备或系统拥有一套清洗工艺。然而，这也取决于生产品种，和同一产品不一样批次之间（如大量生产）或不一样产品转产之间是否需要清洗。当清洗方法只用于同一产品不一样批次之间（或同一中间体不一样批次之间），企业仅需要建立“目视清洁”标准。诸如这类批和批之间清洁工艺，不需要被验证。 设备设计检验设备设计，尤其是使用了半自动或全自动在场清洗系统大型生产系统，需要重点关注。比如，应使用没有球阀卫生型管道系统。当使用了那些非卫生型球阀（这在原料药工业中是普遍），清洁工序就变更困难。若在现场检验中发觉使用了上述类型设备系统，实施清洁程序操作人员必需了解问题所在，并已进行了相关系统和阀门清洁特殊培训。检验该操作人员是否了解系统，培训水平和清洁操作经验。并检验书面已验证过清洁程序，判定系统是否已经被合适确实定和验证过。对于大型系统，比如使用了很长转移/输送管道，要检验步骤图和管道图纸从而确定需要清洗阀门，和是否有书面清洁规程。 管道和阀门应标识，方便操作人员识别。有时，阀门标识不妥，不管在打印图纸上和实物上，全部会造成不正确清洁操作。在清洁工序相关文件中，必需检验是否包含了关键原因；确定并控制每次生产结束后至清洁开始时间间隔。这对于局部用药品，悬浮剂和原料药生产尤其关键。因为残留物干燥后，会直接影响清洁效果。不管是否使用了在线清洁系统，全部应考虑设备清洁微生物情况。这包含大量预防性方法，而不只是在染菌以后再除菌。应有证实，常规清洁和设备保留不会有微生物繁殖。比如，设备在保留之前应该干燥，清洁后不许可有任何积水残留其中。对于无菌工艺设备，或非无菌但有利于微生物增加产品，清洁以后还可能需灭菌或消毒。即使灭菌或消毒程序已超出了本指南范围，但要注意是，经过合适清洁和设备保留来控制微生物，是对接下来灭菌/消毒工序能够达成无菌水平确保。从6无菌工艺应控制热原见解来说，这一点也尤其关键。因为设备灭菌工艺不一定能够取得显著灭活或去除热原效果。书面清洗程序程序和文件要检验验证后清洗方法是否具体、具体，检验需要统计项目。我们曾见过不少通用性 SOP，同时也见过其它使用批生产统计或统计表格系统，其要求对每一步操作做出专门文件统计。依据系统复杂程度、清洗方法和操作人员培训程度和能力不一样，多种清洗工作或规程所需文件数量也会有所不一样。当需要进行更为复杂清洗过程时，必需对关键清洗工序做出统计（如一些原料药合成工序）。在这点上，应有专门设备统计，包含清洗人员姓名、评定时间。然而，对于相对简单清洗工作，仅统计“全部清洗工作已经被实施”就足够了。其它原因，诸如清洗历史、清洗后测出残留物水平、检验结果可变性等有时也要记录。比如，清洗以后残留物水平具可变性，而又认定该清洗方法是可接收，则必需证实清洗过程和工人操作有效性。必需对清洗方法做出合适评价，尤其是当认为工人操作有问题时，就要求有更为广泛文件（指导）和统计，并进行更多培训。分析方法应确定用于残留物或污染物检测分析方法专属性和灵敏度。借助于优异分析技术，清洗和生产过程中极少残留物或污染物也能够被检测出来。即使检测不出污染物或残留物水平，也并不能说明清洗以后不存在残留污染物，而只说明样品中没有超出该分析方法灵敏度或检验限之外污染物。企业应对分析方法进行挑战性试验，即证实取样方法能够从设备表面取回污染物，其收率是多少，如 50%, 90%等。依据取样结果再做出结论是必需。取样技术不妥也可能得出相反结论（见下文）。 取样可接收通用取样方法有两种。最好是直接从设备表面取样，另一个方法是取漂洗水样。a. 表面直接取样法检验取样器材类型，和其对检测数据影响，因为取样器材可能会干扰检测。比如，取样拭子上粘胶会干扰样品分析。所以，在验证早期，必需确保使用合适取样介质和溶媒（用于从取样介质中提取样品），而且方便使用。 直接取样法优点在于：能够对最难清洗、能够抵达表面清洁程度进行评价，从而建立单位面积上残留物/污染物接收水平。另外，还能够取到“干”或不溶性残留物样品。 b. 漂洗液样品漂洗液取样法含有两点优势：能够对较大表面进行取样；能够对抵达不到系统或日常无法拆卸部位进行取样并做出评价。 其缺点是：残留物或污染物可能是不溶性或吸藏在设备中。此时，可使用“脏点”类推法进行评价。对于“脏点”清洗评定，尤其是有干残留物，不能只检测漂洗水样，而要检验“脏点”，从而确定清洗是否洁净。 当直接检测漂洗水样用于清洗方法验证时，应检验是否直接检测了漂洗水样中残留物或污染物。如若仅检测漂洗水样水质情况（即使符合药典检测方法），而不测定其可能存在污染物，这种做法是不能接收。 常规生产中控c. 日常生产中间控制监测：一旦某清洁方法得到验证以后，日常监测可使用间接检测法，如电导率检测。对于原料药生产商来说，使用反应罐和离心机，大型设备之间管道连接，只能对其漂洗液取样。这种情况下，必需说明间接检测法和设备情况相关性。验证过程中，也应有书面证实：用间接法检测未清洗设备时，检验结果能够证实该设备不能使用和未清洗。即该检测结果能够得出不能够接收目前设备情况结论。（反证法） 程度建立对于清洁方法是否得到了验证，FDA不计划建立统一接收标准和方法。这也不切实际，因为在医药工业中，原料药、制剂产品和设备种类太多。企业应依据本身对该药品了解建立合理、实际可测残留程度。为了建立合理程度，确定分析方法灵敏度十分关键。已经有工业界代表在文件或公开演讲上提出部分检测限标准，如 10ppm；生物活性检测限标准，如正常诊疗剂量 1/1000；或感官标准，如“无可视残留物”等。要检验建立残留限量标准方法。不一样于制剂产品是已知残留物化学成份（如来自于活性成份、非活性成份、洗涤剂等），原料药可能会有部份反应物和其它副产物不能得知。在建立残留程度时，仅关注关键反应物残留限是不够，因为其它化学变量可能更难以除去。此时，除化学分析之外，可能还需要薄层等其它方法。在原料药生产中，尤其是强效化学物质，如一些甾类物质，若不使用专用设备，就必需考虑副产物残留问题。检验目标是确保建立任何程度依据全部是科学合理。 其它问题抚慰剂为了评定和验证清洁方法，有些工厂在相同设备、相同操作参数下生产抚慰剂（无效对照剂）。然后检测分析该批抚慰剂是否受到了残留物污染。然而，我们已统计了使用抚慰剂进行清洁验证多个问题。首先，无法肯定污染物是否均匀分布于生产系统内。如出料阀或混料机泄槽受到了污染，分布于抚慰剂中污染物可能不均匀，通常会集中在出料最初阶段抚慰剂中。另外，假如污染物或残留物粒度较大，在抚慰剂中分布也可能不均匀。有些工厂假定残留物会均匀地损耗于设备表面，这也是无效结论。最终，任何分析手段能力全部会因污染物稀释而受到减弱。因为这些问题存在，抚慰剂验证法应和漂洗液检测或直接取样检测结合使用。清洁剂re only added to facilitate cleaning during the cleaningprocess. Thus, they should be easily removable. Otherwise, a different detergent should be selected. 若使用清洁剂或肥皂清洁，应考虑检测残留物质时可能会碰到困难。一个常见问题是清洁剂组成成份。很多清洁剂供给商不会提供具体配方，使用户无法评定其残留物。和药品残留物一样，工厂也应评定该清洁过程对于去除残留清洁剂有效性，这十分重要。然而，和药品残留物要求不一样是，清洗以后不得有任何浓度清洁剂残留（或对于高灵敏度分析方法而言，其残留浓度必需极低）。清洁剂不是生产工序中物质，而仅仅是用于帮助清洗而加入物质。所以，清洁剂应易于清除。不然，应选择另一个类型清洁剂。检测直到清洁有些工厂做法是，自清洗开始就一直反复地检测和评定数次检测结果，直到洁净为止。她们对设备和系统进行取样、检测，再取样、复测，直至得到一个“可接收”残留水平。对于采取经过验证清洁方法对设备或系统进行清洗时，不应采取这种反复取样做法。这种做法只有在极少数情况下能够接收。不停地检测和取样只能说明，所采取清洁方法没有得到验证。因为不停复测实际上反应并统计了这么一个事实，即进行低效清洗以后，仍有超量残留物/污染物存在。Chank 实例解读：作为清洗验证（其实是任何研究活动），其实最关键还是回复以下问题：Why? 为何要做清洗操作？How to clean? 怎么清洗？清洗方法是什么? What is the criteria? 清洗到什么程度？怎么判定已经清洗洁净？What is the analysis method? 清洗检测方法是什么？用什么方法判定已经清洗好？When and where to sample? 取样位置是什么？什么时间去取样？频率和方法？围绕这多个关键问题，就能够把握清洗确定或是清洗验证关键了。为了说明这个问题，我们先举一个最简单例子。假设一个化学反应是 A+B 生成 C，其中 A+B 反应介质是乙醇，A，B,全部在乙醇中易溶 （溶解度为一毫升乙醇能够溶解 10 克以上 A,.B）。不过 C 不能溶于乙醇在乙醇中不溶，一毫升乙醇只能溶解 0.01 克 C。不过 C 在丙酮中能够溶解，一毫升丙酮能够溶解 10 克以上 C）反应还有一个已知杂质 D（在乙醇中不溶，一毫升乙醇只能溶解 0.01 克 D，不过 D 在丙酮中能够微溶，一毫升丙酮能够溶解 0.1 克 D）。反应中使用 300 千克 A，加上 240 千克 B，反应用溶剂乙醇大约 1000 升。得到 530 千克 C，和大约 10 千克 D。通常来说每批反应会投入过量 A，大约 330 千克，所以最终混合物中还有残留 A 大约 30 千克。这是这个反应简单描述和背景介绍。我们先假设这个反应罐（ 升塘玻璃罐，假设表面积达成 10.5 平方米）是专用于这一步反应，那么我们来看看怎么回复之前那些问题：Why? 为何要做清洗操作？我们为何要进行清洗呢？假如我们不对这个罐进行清洗，反应后，残留在系统中物质就有：A,B,C,D,和乙醇，这些物质对于后续批号反应（因为是专用，就做这一步反应）来说，全部是潜在污染物。考虑到反应中使用溶媒介质是有机溶媒（乙醇）。所以首先能够排除考虑微生物污染可能（因为微生物不会再这个系统中生存。通常只有存在水系统才考虑微生物污染可能性）。你看看，A可能残留是最大量为 330-300=30 千克，C,D因为在乙醇中溶解度很低，基础上全部会析出固体，而被转移出去。这么会有在容器壁上残留可能。B因为用量低，且极易溶解于反应液中，而且不是过量物质，即便有少许残留，肯定也就在反应后残留母液中去了，能够不考虑了。对于下一个批号（02批）生产来说，这些残留 A，C，D就是关键污染物。考虑到母液 1000 升，能够溶解最少 10000 千克 A 或 B，残留 30 千克 A，基础上也全部会溶解在母液系统中去了，所以能够排除 A 残留可能性。就只需要考虑 C 和 D 了。因为 C 是易溶解于丙酮，所以即便 530 千克 C 全部残留下来，最多需要 53 升丙酮就能够完全溶解了。D假如全部残留，10千克 D 需要丙酮大约是 100 升。比较这 两个物质在丙酮溶解性质，我们知道最少需要 153 升丙酮才能够全部溶解 530 千克C 和 10 千克 D。不过逻辑上分析，不可能有这么多 C 和 D 残留（不然就不要生产了,全部被残留下来污染下一批生产了）。我们假设因为转运和操作不方便，残留物质占全部物质 10%，那么实际上就残留了 53 千克 C 和 1 千克 D，那么只需要 15.3升丙酮就能够完全清洗设备了。不过常识也告诉我们，对于一个表面积 10。5平米设备来说，一个 L 大罐，15.3 升溶剂量连反应罐底部才勉强能够覆盖怎么可能去洗涤呢？所以，我们还是会选择反应罐 1/5-1/3 量溶剂去洗涤,也就是最少 400升丙酮。我们能够发觉这么话。400升丙酮基础能够完全洗涤洁净残留东西了。到现在我们其实还没有回复为何要清洗。其实你想假如我们不清洗，最直接后果就是残留 53 千克 C 和 1 千克 D 会留到下个批号 530 千克 C（02批）中去。我们为了降低这么高达 10%上个批号残留，所以我们必需去清洗。假如这个真就是一个专用设备，你想，假如我们选择了 400 升丙酮清洗了。53千克那么可能残留下去 C（01批号）就是 0 了，而 01 批号 C 中杂质 D，根据之前计算，也是不会存在了。这么一个专用设备你还需要验证吗？显然是不需要了。你最多要做就是，用 400 升丙酮清洗后，在用点丙酮冲洗一下设备表面，分析以下冲洗液来确定这个冲洗液中不含 D 就能够了（这里因为 D 和 C 在丙酮中溶解度差 100 被，而她们残留量就差 53 倍，所以杂质 D 变成了最差考虑对象，只要 D 没有了，C自然就没有了。大多数情况下，C，D溶解度不会差距这么大，假如有尽可能考虑 C,D全部易溶溶剂来清洗，这么 C 就能够作为考虑对象了）。你完成这个部分讨论和有一个这么冲洗液检测数据，就能够结束清洗确定活了，没有 FDA 会要求你再去做愈加验证活了。假如你认为风险已经收到控制了，对于专用设备，清洗方面要干活就结束了，下面文字你能够不看了。好了，假如你实在是没有信心，一定要验证，我们就继续回复下面问题。How to clean? 怎么清洗？清洗方法是什么? 上面讨论也能够看出来了，400升丙酮自然就能够清洗洁净系统了。不过一次就够了事情是否，能够再多做几次？那当然了。你喜爱自然能够继续。最差情况就是你做一次 400 升丙酮，把罐子关闭后，搅拌丙酮，尽可能让丙酮接触到这个罐子所有面积，这么只要残留物料一接触这个溶剂就会溶解进去了。你是否需要做其它呢？当然了。假如你愿意，你能够分几次操作（比如每次少点，每次用 200 升，洗 2-3 次？根据之前计算全部是能够也是足够），也能够采取加热和回流方法来增加溶解度和清洗覆盖面（温度越高，溶解度越大）。这些全部是你爱怎么做就怎么做了。不过不管怎样，这里你需要定一个方法出来，一个固定清洗方法出来，这个方法会在后续验证取样，和最好操作 SOP 中变成一个固定操作规程。比如我们选择清洗方法是，第一次采取 300 升丙酮搅拌均匀 30 分钟后放料，然后第二次采取 100 升丙酮冲洗罐表面。然后我们回复下一个问题What is the criteria? 清洗到什么程度？怎么判定已经清洗洁净？你既然洗了，你怎么知道洗到什么程度算是洁净了？是能够接收呢？我们这里有多个行业标准能够用来参考。一个就是有名 0.10%,就是说洗到残留 01 批物料占 02批物料不超出 02 批物料总量 0.10%, 这个是从 ICH Q3 未知杂质标准来。那么如果 02 批物料批量是 530 千克，0.10%就是 0.53 千克。残留 01 批 C 不能超出 0.54千克，当 01 批 C 只有 0.53 千克时候，其中 01 批 D 就只有 0.01 千克了。那么请问这个时候你需要考虑这个 01 批D吗？它是远远低于主成份 02 批 C 0.10%含量，所以显然能够不考虑（这也是我一直说，主成份杂质 D 在后续批号标准计算时候能够忽略不考虑本质原因）。好了，0.54 千克 01 批 C 是我们许可最大残留量，那么在 10.5 平米表面上如果 这 些 物 料 时 均 匀 分 布 ， 她 们 每 25 平 方 厘 米 会 残 留 多 少 量 呢 ？ 那 就 是(0.54*1000g*25)/(10.5*10000)=0.128g=128 mg. 好，我们先到这里，休息一下。看看另一个行业标准。通常来说对于那些活性物质，潜在毒性又大物质，我们可能会用 10ppm 作为清洗已经洁净标准，也就是说01批C残留在02批C中不能超出02批C量 10ppm，那就是最多只能残留 530kg*10ppm=5.4 克，一样每 25 平方厘米会残留多少许呢？那就是(5.4*1g*25)/(10.5*10000)=1.28 mg. 也就是和前面数据差了 100 倍 （其实很好了解，0.1%和 10ppm 就是相差 100 倍）假如你不幸生产物料是高活性物料，比如抗肿瘤东西，比如激素东西，你知道即便是 2ppm 它毒性、活性就有了，那么你标准就要比 10ppm 好要低了，就是那个数字 1/5,也就是变成了 0.256 mg. 这就是第三个标准，依据你物质生物活性标准来确定。那么我们通常见 目测标准有多么精细呢？老外很较真，其实有这个数据，听说是4mg/cm2（参考以下文件 G.L. Fourman and M.V. Mullen, Determining Cleaning Validation Acceptance Limits for Pharmaceutical Manufacturing Operations, Pharm.Technol. 17 (4), 54-60 (1993)， 那么也就是 100mg， 你发觉没有这个和这个例子中之前 0.1%标准很靠近。对于微生物呢？你标准怎么定呢？等下再说。因为这里没有还包含！总来说也就是回复这个问题时候你需要建立标准就是以上四个标准了。这是计算标准，实际上最好你使用方法足够敏感能够到这些程度，不然你标准定了也白定。所以就有了下面一个问题需要回复了：What is the analysis method? 清洗检测方法是什么？用什么方法判定已经清洗好？知道了吧，你要选是能够敏感到检测到那么低浓度 C 方法才能够。HPLC? 滴定？还是 TLC？这些全部不关键，只要你方法足够敏感能够分析检测到你之前回复上个问题程度方法就能够。什么指标和方法敏感度相关？LOD！所以你这个方法一定要验证 LOD 指标。你怎么确定这点？这是分析方法验证步骤了，你配一个浓度 C，1mg/ml，然后等比例 稀 释 下 去 ， 知 道 某 个 浓 度 比 如 0.5, 0.25.0.125.0.0625. 0.03125. 0.016mg, 0.008, 0.004mg/ml, 你发觉到 0.004mg/ml 时候，信噪比到了 3，那么这个浓度就是你 LOD了。（当然可能更低！）我们怎么把这个分析方法 LOD 程度和之前假设残留标准联络起来呢？发觉没有其实这是一个问题从两个方向拓展出来，我们需要把她们联络起来了。就要看下面问题回复了。When and where to sample? 取样位置是什么？什么时间去取样？频率和方法？因为是验证，所以你需要再次描述你下你设定清洗方法：第一次采取 300 升丙酮搅拌均匀 30 分钟后放料，然后第二次采取 100 升丙酮冲洗罐表面。用什么方法取样？目测？OK，不过不能作为唯一方法。为何？原因很简单，有些人是近视（不是每个人全部能够看到 4mg/cm2），有些地方很暗，看不清楚，有些材质表面反光，看不清楚。为何不能不用这个方法？也很简单，有些时候，你就洗不到，有些时候物料可能结块在某个地方了。目测覆盖面会大。有不少检验官会要求你们有照明设施来看，并要求证实那些边角能够看到，就是这个原因。就剩下两个方法了，一个就是擦拭，一个就是漂洗液直接取样。对于我们设定方法，你喜爱什么取样方法呢？其实随便你用。好吧，我们先简单，就用漂洗液直接取样吧（具体来说，这个漂洗方法也需要具体描述，比如是否需要把罐体关闭状态漂洗？还是敞开式冲洗？取样时候取样品是漂洗后，还是冲洗期间，这些全部包含到你具体取样操作，需要在验证统计中具体交代）。我们洗了两次，那就取样两次吧。为了操作方便，我们每次就取 100 毫升漂洗液好了。因为是漂洗方法，所以我们残留量就不需要折算容器面积了。第一次清洗，我们可能残留量在这 100 毫升溶剂中浓度时多少呢？53千克/300 升=0.177g/ml，假如真这么高浓度，我们之前设定方法检测得到吗？那当然！别忘了我们 LOD 是 0.004mg/ml。第二次漂洗呢？因为 C 溶解度很大（1毫升丙酮溶解10 克 C， 53千克相当于只需要 5.3 升丙酮就能够搞定了），所以理论上 53 千克在第一次洗涤后，基础没有残留了，不过要知道可能之前 300 升丙酮不会全部流出罐外，不小心留了 1 升丙酮溶液在罐内，那就是残留了 177 克物料【0.177/530=0.033%】，所以第二次 100 升丙酮溶解完这些残留物质后，我们取样浓度会是多少啊？等于1.77mg/ml 吧, 用我们之前方法也是检测得出来吧？是，能够。那么假设这个东西是这么多，算是洗洁净了吗？第一次清洗后其实就洁净了！【0.177/530=0.033%】,第二次假设不小心又留下来 1 升丙酮，那么就是残留了 1000*1.77mg/ml=1.77g，就是【0.00177/530=3.3ppm】. 除非你这个清洗标准是低于 3.3ppm，不然显然你不需要在清洗了。对于原料药来说，这个已经很洁净了。假如我们采取是擦拭方法取样，那这里又有了相关擦拭方法有效性和代表性能高问题了。讨论代表性时候，你就要具体交代，你计划在这个设备什么位置进行取样？为何在这些位置？为何你认为这些位置能够代表整个设备全部，并综合考虑到了那些最难清洗到部分？你需要把这个设备结构图画出来，并在你计划取样位置做好图示。有效性就包含到你需要做个模拟擦拭确定了。你要找一块和你要洗设备材质一样物料来（通常能够找设备制造商提供相同物料），然后做成 25cm2这么一个方块，然后依据认为加入已知数量 C 物质到这个 25cm2 中去（通常就是溶剂溶解后喷洒在表面，然后晾干），然后用一个棉签往返进行擦拭( 具体擦拭路线，擦拭次数，甚至是用力量大小，全部需要具体描述)。然后将这个棉签溶解到指定体积指定溶剂中去，然后去分析这个溶剂中 C 浓度，算出 C 被擦下来了多少数量，这个数量和你之前喷撒 C 数量比值就是所谓擦拭试验回收率（通常能够接收范围是 50%-130%）。当你确定了你擦拭方法有能够接收回收率时候。你就能够在你选定那多个指定位置进行擦拭取样了。当然也一样，在第一次清洗后，你就下去取样，选择一个一样大小面积 25cm2 区域，根据之前回收率方法一样擦拭方法（方向，往返次数，力道大小），然后用一定体积溶剂来溶解，然后进行 HPLC 分析。于是你就有了一系列数据出来了。你就知道，每个你选择具体位置残留量大小了。假如你棉签全部是溶解在 100 毫升丙酮中，平均回收率为 67% (提议你做最少三个浓度回收率,涵盖你设定标准浓度。这个回收率说明，假如你在设备表面假如实际残留了 100 克东西，擦拭回来东西只有 67g) 那么根据之前计算，假如你标准设定是 0.10%, 算是清洗干 净 标 准 就 是 128mg*67%/100ml =0.86mg/ml. 如 果 是 10ppm, 那 这 个 浓 度 就 是0.0086mg/ml. 根据之前假设 LOD 是 0.004mg/ml 标准，这些全部是在 LOD 之上，所以你就不需要担心这个分析方法不能有效分析出来了。至此，你就完成了你验证，证实用你选择这个方法，能够很灵敏检验出你残留 C，也能够有效判定实际样品中是否有 C 残留了。你就能够根据设定清洗方法去，清洗三次，每次根据取样位置和要求去取样，然后进行制订方法分析，就会得到三组数据，来支持你判定这么清洗是否有效结论了。你清洗验证就结束了。到这里可能你说，我全部看懂了，也很简单，因为你设想情况很简单，是专用设备，又是化合物合成反应，又不需要考虑微生物污染。产品又不会降解，多么理想状态啊，当然简单了。我清洗验证顾问说，我们问题很复杂，我们是非专用设备，我们辅料会降解，还会粘结成块，还会滋生微生物，用洗涤剂还必需有效去除才可以。我们情况用你方法根本没有措施做。你是简化情况，说起来简单，我们做起来极难。真如此吗？假如你真认为如此，那么你就是根本没有学会清洗验证思绪，我之前教你你全部忘记了。好，我们来看看为何这么说吧。我们把问题开始复杂化，在这个罐里我们还进行了另一个反应 X+Y=W（V是杂质）， X,Y在丙酮中溶解，在乙醇，水中不溶解，反应介质是丙酮（一样是 1000 升）。生产 W是溶解于水，微溶于丙酮，V杂质是不溶解于丙酮，易溶于水。好了，这个设备不是专用了。280千克 X 和 220 千克 Y 会生产出 490 千克 W 和 10 千克 V 杂质。批量也不一样了。这两个系列生产还是交叉。你怎么清洗好？好麻烦啊，A,B,C.D 和 X,Y.W.V 有了八个物质，溶剂系统也复杂了，这么多丙酮，乙醇，水。选哪个好？别急，你还是先回复我第一个问题吧：Why? 为何要做清洗操作？因为生产 C 时候我们不期望有残留 A,B.D 和之前生产 X,Y.W,V 影响。（这个回复和之前就多了四个物质罢了），考虑时候标准还是一样啊。你就去找另一个溶剂出来，恰好能够溶解或是恰好对这些全部东西全部有一定溶解性能。比如你最终发觉，甲醇恰好全部能够溶解或是就 V 最难溶于甲醇（1毫升甲醇只能溶解 0.1 克 V，1毫升甲醇能够溶解 1 克 W），其它全部是易溶以上。你就只需要考虑 V 了。10千克 V 会全部留下来？最差情况就是全部留下来了，那么就需要 100 升甲醇来洗。而假设 490千克 W 全部留下来，你就要用 490 升甲醇来洗。显然还和以前一样，你就考虑你W 就能够了。还是定位啥？就用 500 升甲醇来洗肯定能够洗好了。有些人说，你这么情况是恰好甲醇能够溶解全部这八个东西啊，假如不能够呢？那也简单啊。你就在生产 C 产品之前用溶解 W 产品系统溶剂洗，生产 W 产品系列之前用溶解 C 系统溶剂洗，这么就有了两个清洗方法了。你就需要分别验证了。不过具体分析计算标准还是和我之前教你那个最简单方法一样，思绪也是一样。又有些人出来找麻烦了，你说才公用两个产品啊，假如我又加了第三个产品呢？弟兄，一样啊，你先考虑是否能够把你第三个产品放入一个统一清洗方法中去清洗。看看她溶解度，假如实在不能够，你就帮她定制一个专门清洗方法出来，思绪方法还是和前面一样啊。（这个就算你家庭作业了！你自己分析分析思索思索吧！）假如我东西有降解怎么办？比如我 C 会在放置一段时间后降解为 Ca,Cb。弟兄太简单了，你就要求你清洗方法必需在多少时间内进行完全，并把 Ca，Cb作为和 D 一样杂质来考察。假如我东西有微生物指标怎么办？你就根据之前设定 0.1%模式一样去设定设备表面许可微生物指标。假设我 C 微生物程度时不超出 1000CFU/G. 那么对于这个反应罐来说，微生物程度就不能超出 530kg*1000*1000/10.5*10000=504cfu/cm2. 然后模拟一样擦拭方法取样（擦拭方法一样需要做回收率确定），然后确定你经过几次清洗后设备表面微生物低于这个程度。其它还是和我教你步骤一样。只是多了一个微生物程度要求罢了！难吗？好了，到现在你还会认为难吗？所以看看下面那个清洗验证目录吧,要有全局观！回复我这五个问题吧，你还不清楚？（再不清楚，再重头看一遍本文！）Why? 为何要做清洗操作？How to clean? 怎么清洗？清洗方法是什么? What is the criteria? 清洗到什么程度？怎么判定已经清洗洁净？What is the analysis method? 清洗检测方法是什么？用什么方法判定已经清洗好？When and where to sample? 取样位置是什么？什么时间去取样？频率和方法？18双锥干燥器清洗验证方案- 一、 概述- 2二、 验证目标- 2三、 验证范围- 2四、 验证类型-