黄芩微乳凝胶对小鼠慢性湿疹的疗效研究.pdf

基础研究摘要目的：拟在前期黄芩自微乳的研究基础上，制备黄芩微乳凝胶，并考察其对慢性湿疹的治疗效果。方法：采用单因素法和响应面法优选凝胶基质、保湿剂等，确定黄芩微乳凝胶的处方工艺；采用Franz扩散池法评价微乳和微乳凝胶的体外透皮性能；建立鼠耳慢性湿疹模型，测定黄芩微乳凝胶对小鼠耳肿胀度、肿胀抑制率、病理改变以及血清中炎症因子TNF-、IL-1和IL-6含量，考察对小鼠慢性湿疹的治疗效果。结果：黄芩微乳凝胶理化性质稳定，微乳凝胶相比于微乳具有更好的透皮性能，微乳凝胶中主要成分黄芩素、汉黄芩素的累积透皮量分别为微乳的1.85倍、2.77倍，且微乳凝胶的稳态流量和渗透系数显著升高，滞后时间明显缩短；药效学研究表明，与模型组相比，黄芩微乳凝胶可显著降低小鼠耳廓肿胀度（P0.05），血清中炎症因子TNF-、IL-1和IL-6含量减少37%以上，相较于传统的以黄芩苷为主的水提物和水提物凝胶对慢性湿疹的治疗作用更好。结论：黄芩微乳凝胶制备工艺可行，透皮性强，对慢性湿疹有显著的治疗作用。关键词黄芩素；汉黄芩素；微乳；微乳凝胶；透皮；湿疹中图分类号：R965.2文献标志码：A文 章 编 号：1009-2501(2024)04-0447-08doi：10.12092/j.issn.1009-2501.2024.04.013湿疹是一种常见的皮肤病，发病原因复杂，易反复发作，常伴有瘙痒和疼痛，严重影响患者的生活质量1。目前，湿疹的治疗主要采用抗过敏药物及激素类药物，虽然短期内可缓解症状，但长期使用容易引起药物依赖性和副作用2。黄芩为唇形科植物黄芩的干燥根3，是一种具有广泛药理活性和应用价值的传统中药，现代临床研究表明黄芩治疗湿疹也有显著效果4-5。其主要成分黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素（结构式见Fig.1）具有抗炎、抗菌、抗过敏、调节免疫等多种药理活性6。其中，黄芩苷、汉黄芩苷为黄芩素和汉黄芩素的葡萄糖醛酸化合物，分子中含有糖苷，脂溶性差，转化为黄芩素等苷元在小肠中才能被直接吸收7-8。大量研究表明，黄芩素、汉黄芩素等苷元具有更强的药理作用，生物利用度更高9-11。然而，黄芩素和汉黄芩素为疏水性较强的脂溶性物质，醇、水等常见溶剂无法溶解。课题组在前期研究中发现，用超临界CO2萃取技术可以获得以黄芩素和汉黄芩素为主的提取物，采用聚氧乙烯蓖麻油做油相、非离子表面活性剂做乳化剂、短链脂肪醇为助乳化剂将其制成微乳，相比传统的以黄芩苷为主的黄芩水提物，黄芩素和汉黄芩素为主的黄芩提取物自微乳对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有更强的抑菌作用12。2023-08-30 收稿2023-09-14 修回山西省自然科学基金项目（202203021211218）；山西省卫生健康委员会重点实验室建设计划（2021SYS23）；山西中医药大学晋药协同创新项目（2022PYTH33）；山西省吕梁市高层次科技人才重点研发项目（2022RC06）王珂，女，硕士研究生，研究方向：中药质量标准研究。E-mail:常银霞，通信作者，女，博士，教授，研究方向：中药活性成分的分离和应用研究。E-mail:张越，共同通信作者，男，博士，教授，研究方向：功能分子合成与应用。E-mail:黄芩微乳凝胶对小鼠慢性湿疹的疗效研究王 珂1，牛晨冰1，常银霞1，秦雪梅2，栾智华1，张 越21山西中医药大学，中药与食品工程学院，太原 030619，山西；2山西大学，化学化工学院，太原 030006，山西中国临床药理学与治疗学中国药理学会主办CN 34-1206/R，ISSN 1009-2501http:/2024Apr;29(4):447-454447Chin J Clin Pharmacol Ther 2024 Apr;29(4)OHOHOHOHOHOHOHOHOHHOHOHOHOHOHOHOOOOOOOOOOOOOOOOOBaicaleinBaicalinWogonosideWogoninFig.1Structural formula of active ingredients in Radix Scutellariae中药微乳凝胶作为中药外用的新型给药系统，既具有微乳提高难溶性药物溶解度、增加药物稳定性、促进药物吸收的优点，还拥有凝胶载药量大、生物相容性好的优势13。本研究在课题组前期研究的基础上，进一步研究以黄芩素和汉黄芩素为主的黄芩微乳凝胶的制备工艺，考察活性组分的体外释放规律，并通过构建慢性湿疹动物模型，考察黄芩水提物、黄芩水提物凝胶、黄芩微乳、黄芩微乳凝胶的疗效差异，为其开发利用提供新的思路和方法。1材料与方法1.1实验动物雄性昆明小鼠 64 只，体质量（202）g，清洁级，由北京斯贝福生物技术有限公司提供，许可证号：SCXK（京）20190010；雄性SD级大鼠3只，体质量（18020）g，SPF级，由北京斯贝福生物技术有限公司提供，许可证号：SCXK（京）20190010。动物实验由山西中医药大学伦理委员会批准（编号2022DW172）。1.2药物与试剂黄芩药材（购自山西元和堂中药有限公司，产地：山西，批号200201）经山西中医药大学中药与食品工程学院药用植物教研室樊杰副教授鉴定为唇形科植物黄芩的干燥根；2，4二硝基氯苯（北京百威灵科技有限公司，批号 LD50W04）；卡波姆940（河北冠朗生物科技有限公司，批号00274582）；三乙醇胺（天津市风船化学试剂科技有限公司，批号20220919）；丙三醇（天津市风船化学试剂科技有限公司，批号20181201）；黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷对照品（上海 源 叶 生 物 科 技 有 限 公 司，批 号 分 别 为C04D8Y49741、R31M9F62605、P20A9F39333，纯度98%）；复方醋酸地塞米松乳膏（华润三九医药股份有限公司，批号 2204008S）；肿瘤坏死因子（TNF-）、白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素 6（IL-6）ELISA检测试剂盒（南京建成生物工程研究所有限公司，批号分别为 H052-1-2、H002-1-2、H007-1-1）；脱蜡透明液、中性树胶（武汉赛维尔生物科技有限公司，批号分别为 G1128-500ML、WG10004160）；苏木素-伊红（HE）染液套装（上海爱必信生物科技有限公司，批号abs9217）；甲醇（色 谱 级，瑞 典 欧 森 巴 克 化 学 公 司，批 号22110124G102）、乙腈（色谱级，瑞典欧森巴克化学公司，批号 21100127G110），其余试剂为分析纯。1.3仪器RYJ12B药物透皮扩散试验仪（济南好来宝医疗器材有限公司）、e2695高效液相色谱仪，配备 2998 PDA 检测器（美国 Waters 公司）、NDJ9S 型数字旋转粘度计（山东山泰重工机械有限公司）、BKEL10A型酶标仪（山东博冠生物科技有限公司）、ATS14B型脱水机（孝感奥华医疗科技有限公司）、DP260型染色机（深圳达科为医疗设备有限公司）、BKTE I型包埋机（山东博科生物产业有限公司）、RM2016型病理切片机（上海聚慕医疗器械有限公司）、DM10000型显微镜（北京长恒荣创科技有限公司）。1.4黄芩微乳凝胶的制备工艺优化在本课题组前期研究黄芩提取物自微乳的基础上12，以卡波姆940、丙三醇、pH值等为考察对象，在单因素的基础上，运用响应面法优化黄芩微乳凝胶的制备工艺。1.5含量测定1.5.1色谱条件通过高效液相色谱测定黄芩素等含量14，色谱条件为：Thermo BDSHYPERSILC18色谱柱（250 mm 4.6 mm，5 m），以甲醇（A）-乙腈（B）-0.1%甲酸水（C）为流动相，梯度洗脱，08 min（15%34%A，5%6%B）、825 min（34%55%A，6%7.5%B）、2535 min（55%66%A，7.5%8%B）、3545 min（66%80%A，8%10%B），柱温30，DAD检测波长278 nm，流速1 mL/min，进样量20 L。1.5.2标准曲线的建立精密称取适量黄芩素、汉黄芩素和黄芩苷对照品，加入甲醇，用超声溶解，配448中国临床药理学与治疗学 2024 Apr;29(4)制成质量浓度分别为0.68 mg/mL、0.50 mg/mL和0.60 mg/mL的对照品溶液，将对照品溶液分别稀释成5种不同的浓度，根据“1.5.1”项下色谱条件进行测定，以各对照品浓度（g/mL）为横坐标X，峰面积为纵坐标Y，得到的结果如下，由Tab.1可以看出，相关系数R2接近1，表明线性关系良好。Tab.1Regression equation and linear rangeComponentBaicaleinWogoninBaicalinLinear range(g/mL)2.01251.2701.8880Regression equationY=40989X+39321Y=28633X+28388Y=48562X+30225R20.99970.99980.99961.6体外透皮实验1.6.1离体皮肤的制备从健康大鼠腹部获取皮肤，去除皮下脂肪和组织，用0.9%NaCl溶液反复冲洗离体皮肤，将处理后的皮肤置于-20 冰箱中冷藏备用，在使用前自然解冻即可15。1.6.2透皮实验采用 Franz 扩散池，将处理后的鼠皮用滤纸吸干水分，然后剪成适当大小的两块，使真皮层面朝上，固定在透皮吸收实验设备的扩散室和接收室之间（背衬层朝向扩散室），分别在鼠皮上涂上黄芩微乳和黄芩微乳凝胶。在接受池中加入经超声处理的0.9%NaCl溶液。在（371），100 r/min的条件下进行恒速搅拌。在2、4、6、8、10、12、24 h 时，取出接受液 0.5 mL，同时补加等体积预温至37 的0.9%NaCl溶液，并排尽气泡16。采用“1.5”项测定黄芩素和汉黄芩素的含量。计算单位面积的累积透皮量（Q），公式如下:Q=(CnV+i=1n-1CiVi)/A在上述公式中，Cn表示第n个取样点测得的质量浓度（g/mL），Ci表示第i个取样点测定的质量浓度（g/mL）。V表示接收池的总体积（7.5 mL），Vi表示取样体积（0.5 mL）。A表示有效透皮面积（2.8 cm2）。将 Q 对时间t进行线性拟合，通过方程Q=JSStJSSTlag，得出稳态流量（JSS/gcm2h1），滞后时间（Tlag/h）；药物渗透系数（KP/cmh1）KP=JSS/C（其中C为接收池中24 h药物浓度）17。1.7黄芩微乳凝胶的药效学研究1.7.1动物分组及药物的制备健康小鼠随机分为8组：空白组、模型组、空白凝胶组、黄芩水提物组、黄芩水提物凝胶组、黄芩微乳组、黄芩微乳凝胶组、阳性药组（复方醋酸地塞米松乳膏），每组8只小鼠。空白凝胶组：称取 0.08 g 卡波姆 940，加入3.82 g水和0.34 g丙三醇，静置溶胀24 h，滴加适量30%三乙醇胺调节pH值为6。黄芩水提物及水提物凝胶组：称取0.02 g黄芩水提物（含黄芩苷 86.2%），溶解于 3.8 g 水中，即得黄芩水提物；在黄芩水提物的基础上，同法加入上述空白凝胶中的卡波姆940、丙三醇及三乙醇胺，即得水提物凝胶。黄芩微乳及微乳凝胶组：参考本课题组前期黄芩自微乳制备12，称取0.02 g黄芩CO2超临界提取物（含黄芩素42.1%，汉黄芩素36.5%），加入0.42 g空白自微乳，搅拌均匀，加入3.38 g水，即得黄芩微乳；在黄芩微乳的基础上，加入空白凝胶中的卡波姆940、丙三醇及三乙醇胺，即得黄芩微乳凝胶。1.7.2慢性湿疹模型的建立参考文献建模18，小鼠在适应性饲养7 d后，第8天对小鼠腹部进行剃毛，实验的第1、2天，在小鼠腹部涂抹100 L的7%2，4二硝基氯苯丙酮溶液致敏，空白对照组则涂以等量的丙酮。随后的5 d，分别在小鼠左耳内外两侧涂抹20 L的1%2，4二硝基氯苯丙酮溶液进行激发，右耳涂抹等量丙酮作为对照，每隔 4 d 激发 1 次，共激发 4 次。每次激发后24 h，在小鼠右耳内测均匀涂抹相应的适量药物，上下午各 1 次，共给药 24 次。末次给药后12 h进行小鼠摘眼球取血，3 000 r/min，离心10 min，取上层血清，随后置于20 冷冻保存。每组小鼠的耳朵沿双耳基线被剪下、打孔称重，4%多聚甲醛固定。1.7.3小鼠耳廓肿胀度按照上述各实验组的设置，使用直径 6 mm的鼠耳打孔器分别在小鼠左右耳相同位置打孔，即得左右耳片，称重，并运用以下公式计算耳肿胀度及肿胀抑制率19。耳肿胀度=左耳耳片质量-右耳耳片质量肿胀抑制率=（模型组肿胀度平均值-给药组肿胀度平均值）/模型组肿胀度平均值100%1.7.4小鼠耳组织病理学变化在称重结束后，立即将耳片置于4%多聚甲醛溶液中固定，进行常规取材、脱水、石蜡包埋，制备4 m厚的组织449Chin J Clin Pharmacol Ther 2024 Apr;29(4)切片，然后进行HE染色。最后，使用光学显微镜观察并拍摄组织切片的图像20。1.7.5ELISA 试剂盒测试炎症因子TNF-、IL-1和IL-6含量取各实验组血清，检测血清中炎症因子TNF-、IL-1和IL-6的含量，按ELISA试剂盒操作说明书进行。1.8统计学处理用 SPSS 23.0 软件进行统计分析，计量数据用均数标准差（x s）表示。运用单因素方差分析，采用 LSD 检测方差齐性，P0.05为差异具有统计学意义。2结果2.1黄芩微乳凝胶制备工艺及质量评价本研究在课题组前期黄芩提取物自微乳的基础上制备黄芩微乳凝胶12。黄芩提取物自微乳制备工艺简述如下：（1）黄芩超临界CO2萃取最佳条件，萃取温度 45，萃取压力 25 MPa，黄芩目数 40目，夹带剂95%乙醇用量为每克黄芩0.75 mL，黄芩素和汉黄芩素的含量分别为 42.1%、36.5%，黄芩素和汉黄芩素约占 80%；（2）黄芩自微乳配方工艺，35 g聚氧乙烯蓖麻油、10 g司盘80、5 g吐温20 和 34 g 异丙醇混合搅拌均匀，加入 3.5 g 黄芩CO2超临界提取物，搅拌混合至外观澄清透明，即得黄芩自微乳。在黄芩自微乳的制备基础上，通过单因素和响应面法对凝胶基质、保湿剂等进行了优化，得到黄芩微乳凝胶的最佳制备工艺处方。即0.02 g黄芩CO2超临界提取物中加入0.42 g空白自微乳，搅拌均匀，滴加3.38 g水，加入0.08 g卡波姆940和0.34 g丙三醇，静置24 h使其充分溶胀，滴加适量30%三乙醇胺调节pH值为6，3 000 r/min离心10 min，除去气泡，即得。对制得的3批黄芩微乳凝胶，进行外观、稳定性、黏度等质量指标评价。黄芩微乳凝胶外观，呈黄色澄清、均匀细腻，易涂于皮肤，无油腻感；微乳凝胶在（402）和相对湿度（755）%条件放置 30 d 后，微乳凝胶未发生相分离或药物沉淀等明显变化，表明微乳凝胶稳定性好；微乳凝胶的黏度值为 42 937 mPa s，RSD 小于 2.0%，黏度适中；微乳凝胶中黄芩素和汉黄芩素含量分别为11.3、9.2 mg/g，RSD均小于2.0%。2.2黄芩微乳凝胶主要成分体外透皮实验运用Franz 扩散池法，测定黄芩微乳和微乳凝胶的体外单位面积累积透皮量，实验结果如Fig.2所示。24 h 微乳中黄芩素的累积透皮量达126.4 g/cm2，而微乳凝胶中黄芩素的累积透皮量为233.5 g/cm2，微乳凝胶中黄芩素累积透皮量约为微乳的1.85 倍；24 h 微乳中汉黄芩素的累积透皮量为20.2 g/cm2，而微乳凝胶中汉黄芩素的累积透皮量达56.0 g/cm2，微乳凝胶中汉黄芩素累积透皮量为微乳的2.77倍。可见，微乳凝胶的累积透皮量明显高于微乳。各组成分的透皮吸收参数见Tab.2。从Tab.2可以看出：微乳中黄芩素、汉黄芩素的稳态流量（Jss）分别为 10.90、1.69 gcm2h1，微乳凝胶中Jss分别为19.10、4.22 gcm2h1，微乳凝胶各成分的Jss显著高于微乳；与微乳相比，微乳凝胶中黄芩素、汉黄芩素的渗透系数（Kp）增加，与透皮吸收效果成正比；微乳凝胶中黄芩素、汉黄芩素的滞后时间（Tlag）明显低于微乳。可见，与微乳相比，微乳凝胶更能促进黄芩素和汉黄芩素透皮吸收，可提高稳态流量和渗透系数，降低滞后时间。300250200150100500In vitro percutaneous penetra?on ofof Baicalein(g/cm2)0 5 10 15 20 25Time(h)Microemulsion groupMicroemulsion gel groupA806040200In vitro percutaneous pentra?on ofof Wogonin(g/cm2)0 5 10 15 20 25Microemulsion groupMicroemulsion gel groupTime(h)BFig.2In vitro percutaneous penetration of microemulsion and microemulsion gel(x s,n=4)450中国临床药理学与治疗学 2024 Apr;29(4)Tab.2Influence of in vitro transdermal absorption parameters of various components(x s,n=4)GroupMicroemulsionMicroemulsion gelComponentBaicaleinWogoninBaicaleinWogoninRegressionequationQ=10.90t-3.075Q=1.69t-1.410Q=19.10t-3.152Q=4.22t-1.567R20.98620.99800.99910.9983JSS(gcm2h1)10.901.6919.104.22Q24(g/cm2)126.3616.1420.183.63233.5319.2855.996.29Tlag(h)0.280.830.160.37KP(cm/h)1.371.171.421.462.3耳廓肿胀度及肿胀抑制率不同组别给药后耳廓肿胀的变化如Tab.3所示。模型组与空白组相比，模型组的耳廓肿胀显著增加（P0.05）。与模型组相比，黄芩微乳凝胶、黄芩微乳的肿胀抑制率分别为59.03%、34.91%（P0.05），而水提物凝 胶、水 提 物 的 抑 制 率 为 29.27%、21.54%（P0.05），说明黄芩微乳凝胶相较于微乳和黄芩水提物凝胶等能显著降低耳肿胀。阳性药的治疗效果最好，肿胀抑制率为62.03%（P微乳凝胶微乳水提物凝胶水提物空白凝胶。2.4各组药物对小鼠耳组织外观的影响对小鼠造模后的左耳耳廓皮肤进行观察，与正常组相比，其 余 各 组 皮 肤 均 出 现 不 同 程 度 的 损 伤（Fig.3）。模型组的耳廓皮肤出现红斑、脱屑和结痂现象，呈现重度损伤，由此可见造模成功。与其他给药组相比，阳性药组、黄芩微乳凝胶表现出良好治愈效果；黄芩水提物、水提物凝胶组的治疗效果较差，表现为红肿、表皮破损、瘙痒抓痕等；而空白凝胶几乎没有治疗效果。与耳肿胀实验结果基本一致，说明黄芩微乳凝胶对慢性湿疹有较好的疗效。Tab.3Ear swelling degree and swelling inhibition rate ofmice in each group(x s,n=8)GroupNormalModelPositiveMicroemulsion gelMicroemulsionAqueous extract gelAqueous extractBlank gelSwellingdegree(mg)0.930.21e35.295.54ch13.403.93ce14.462.58ce22.974.37ceh24.964.37ceh27.694.01ceh34.403.32chSwelling inhibitionrate(%)/62.0359.0334.9129.2721.542.55cP0.05,compared with the normal group;eP0.05,compared withthe model group;hP0.05,compared with the positive group.ABCDEFGHFig.3Effect of each group on the appearance of ear tissue in miceA:normal group;B:model group;C:positive group;D:blank gel group;E:aqueous extract group;F:aqueous extract gel group;G:mi-croemulsion group;H:microemulsion gel group.451Chin J Clin Pharmacol Ther 2024 Apr;29(4)2.5小鼠耳组织病理学变化不同组别的耳片组织病理结果如Fig.4所示。正常组小鼠皮肤组织结构正常，无炎症浸润细胞，血管无扩张等异常表现；模型组表现为表皮角化过度，毛细血管数量增加，真皮层血管扩张，并有大量炎症细胞聚集；与模型组相比，各组药物对小鼠湿疹均有改善情况，其中阳性组与黄芩微乳凝胶组效果最好，表现为皮肤组织相对正常，表皮细胞轻度变形及角化，真皮层炎性细胞浸润、血管扩张有较大程度的减轻；黄芩水提物及水提物凝胶组效果一般，可见角质层灶状角化不全，真皮层炎性细胞浸润；空白凝胶组的真皮层可见炎细胞弥散性或灶性浸润，毛细血管数量增加，真皮层血管扩张，表明空白凝胶对慢性湿疹几乎没有治疗作用。小鼠耳组织病理切片皮层厚度分析结果见Fig.4（I）。与空白组相比，模型组小鼠耳廓组织的皮层厚度显著增加（P0.01）；与模型组相比，水提物组、水提物凝胶组、黄芩微乳组和黄芩微乳凝胶组均能显著降低小鼠耳组织皮层的厚度（P0.01）；与阳性组相比，黄芩微乳凝胶组耳组织的皮层厚度不具有显著性差异。ABCDEFGH4003002001000NormalPosi?veModelBlank gelAqueous extract gelMicroemuisionMicroemuision gelAqueous extracteechchcehcehcehceheEar skin Lhickness(m)IFig.4HE section staining results and analysis of mouse ear tissue(HE200,x s,n=6)A:normal group;B:model group;C:positive group;D:blank gel group;E:aqueous extract group;F:aqueous extract gel group;G:mi-croemulsion group;H:microemulsion gel group;I:analysis of cortical thickness results in mouse ear tissue.cP0.01,compared withthe normal group;eP0.01,compared with the model group;hP0.01,compared with the positive group.2.6炎症因子TNF-、IL-1和IL-6结果分析各组血清炎症因子结果见Fig.5。与空白组相比，各组血清中炎症因子 TNF-、IL-1 和 IL-6 含量显著增加（P0.01），其中模型组血清中炎症因子TNF-、IL-1和IL-6含量最高。与模型组相比，不同给药组均表现出显著的改善作用，血清中炎症因子TNF-、IL-1和IL-6含量显著减少，差异具有统计学意义（P0.05或P0.01）；以黄芩苷为主的水提物和水提物凝胶组效果一般；以黄芩素、汉黄芩素为主的黄芩微乳凝胶组几乎与阳性组效果相当，血清中炎症因子TNF-、IL-1和IL-6含量减少37%以上，显示出较好的抗炎作用。IL-6 level(pg/mL)200150100500NormalPosi?veModelBlank gelAqueous extract gelMicroemuisionMicroemuision gelAqueous extractficfcicicficfic?cei5004003002001000IL-1 level(pg/mL)NormalPosi?veModelBlank gelAqueous extract gelMicroemuisionMicroemuision gelAqueous extractficfcicficficficficfiNormal8006004002000TNF-level(pg/mL)Posi?veModelBlank gelAqueous extract gelMicroemuisionMicroemuision gelAqueous extractficfcicicficficfic?ABCFig.5Changes in serum TNF-(A),IL-1(B)and IL-6(C)in mice(x s,n=8)cP0.01,compared with the normal group;eP0.05,fP0.01,compared with the model group;hP0.05,iP0.01,compared with thepositive group.452中国临床药理学与治疗学 2024 Apr;29(4)3讨论黄芩，味苦性寒，能清热燥湿、泻火解毒，具有解热、降压、抑菌等功效21-23。文献表明，黄芩可用于治疗多种皮肤病，例如放射性皮炎、头皮糠疹、痤疮、黄褐斑、带状疱疹等，还可以起到一定的防晒作用24-25。因此，本课题在前期研究黄芩自微乳的基础上，加入卡波姆940、丙三醇、三乙醇胺等可以制成均匀细腻、易涂抹、稳定性好的黄色半透明半固体黄芩微乳凝胶。体外透皮实验结果表明，黄芩微乳凝胶相比黄芩微乳具有更好的透皮性能，黄芩微乳凝胶中黄芩素与汉黄芩素累积透皮量分别为微乳的1.85倍和2.77倍，稳态流量和渗透系数显著提高，滞后时间明显缩短。这可能是由于药物需要先从微乳液中释放出来，再经过凝胶基体的网络结构，使其能够被肌肤吸收，因此，其胶体网络结构将会减缓药物在肌肤中的扩散，从而影响其在肌肤中的渗透，延长药效的持续时间，有助于促进药物的经皮吸收26。药效学研究表明，以黄芩素和汉黄芩素为主的黄芩微乳凝胶对小鼠慢性湿疹具有显著治疗作用，而常规的以黄芩苷为主的黄芩水提物和水提物凝胶对慢性湿疹的治疗作用相对较弱。黄芩微乳凝胶的耳肿胀率明显更低，从耳片组织病理的切片来看，也显示黄芩微乳凝胶抗炎效果更佳，可显著降低炎症因子水平，且与阳性药物没有显著差异。这可能与黄芩微乳凝胶中主要药效成分黄芩素和汉黄芩素具有更好的抗菌、抗炎和提高免疫性能有关12。慢性免疫炎症损伤是湿疹等特异性皮炎的重要发病机制之一，机体的免疫功能紊乱是皮炎湿疹类皮肤病发病的基础，但微生物是诱发或者加重机体免疫功能紊乱的重要原因，皮炎患者常因瘙痒抓挠导致其皮肤屏障破坏，进而增加了微生物尤其是细菌、真菌的感染率27-28。综上所述，以黄芩素和汉黄芩素为主的黄芩提取物微乳凝胶制备工艺简单可行，对湿疹有很好的治疗作用，展现良好的药效学特性。本研究为黄芩的深度开发及临床应用提供了一定的理论依据。参考文献1 Hon KL,Chan BCL,Leung PC.Chinese herbal medicineresearch in eczema treatmentJ.Chin Med,2011,6(1):1-8.2 陈佳,郭敏,周黎旸,等.野菊花提取物对小鼠湿疹模型Th1/Th2免疫功能的影响J.中成药,2018,40(02):440-443.3 郑勇凤,王佳婧,傅超美,等.黄芩的化学成分与药理作用研究进展J.中成药,2016,38(1):141-147.4 刘晶晶,张贵君,彭慧,等.黄芩清热燥湿和泻火解毒药效组分分析J.辽宁中医药大学学报,2013,15(11):78-80.5 姜希红,刘树民.黄芩药理作用及其化学物质基础研J.中国药师,2020,23(10):2004-2010.6 李影,周小青,陈杰,等.黄芩属植物化学成分及药理作用的研究进展J.江西中医药大学学报,2023,35(2):111-120.7Song JW,Long JY,Xie L,et al.Applications,phyto-chemistry,pharmacological effects,pharmacokinetics,toxicity of Scutellaria baicalensis Georgi.and its prob-ably potential therapeutic effects on COVID19:a re-viewJ.Chin Med,2020,15(1):1-26.8 杨迪,袁婷婷,干舒蕾,等.静脉注射黄芩苷、黄芩素在大鼠体内的药代规律比较研究J.中国临床药理学与治疗学,2017,22(4):394-400.9 Yim JS,Kim YS,Moon SK,et al.Metabolic activities ofginsenoside Rb1,baicalin,glycyrrhizin and genposide totheir bioactive compounds by human intestinal micro-floraJ.Biol Pharm Bull,2004,27(10):1580-1583.10白荣,白洪越,孔水仙,等.汉黄芩素和汉黄芩苷对UGT1A1体外抑制活性的比较研究 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microemulsion.METHODS:The gel matrix and humectant were op-timized by single factor method and response sur-face method to obtain the formula and preparationtechnique of the gel.The Franz diffusion cell meth-od was used to evaluate the transdermal proper-ties of microemulsion and microemulsion gel in vi-tro.By establishing a chronic eczema model in themouse ear,the swelling degree,swelling inhibitionrate,pathological changes and tumor necrosis fac-tor (TNF-),Interleukin-1(IL-1)and interleukin 6(IL-6)of radix scutellariae microemulsion gelwere measured,to investigate the therapeutic ef-fect on chronic eczema in mice.RESULTS:The phys