病原微生物评估综合报告.doc
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1、病原微生物风险评定汇报模板1、 生物风险评定依据1)病原微生物试验室生物安全管理条例2)试验室生物安全通用要求3)人间传染病原微生物名目4)WHO试验室生物安全手册2、生物风险评定要素1)病原微生物特征;2)病原微生物相关试验活动;3)试验活感人员;4)试验活动设施、设备和环境;5)风险认定和评定结论。3 生物风险评定实施3.1病原微生物特征评定1)通常生物学特征:病原微生物起源、基因组及编码、产物形态特征、培养特征、细菌或病毒属别和型别内容或技术判定。2)致病性:临床症状、潜伏期、病程、感染剂量、入侵部位、宿主类型、否产生毒素等。3)感染路径:呼吸道、消化道、血液、媒介、皮肤感染等。4)环境
2、中稳定性:是指其抵御外界环境存活能力,不一样微生物稳定性不一样,对病原微生物稳定性评定除考虑其在自然界中稳定性外,还应考虑其对物理原因和化学消毒剂敏感性。5)致病性和感染剂量:不一样病原致病性不一样,即使同类病原不一样菌(毒)株也有不一样强度致病力;另微生物致病性和被感染者免疫状态、易感性相关;暴露后果取决于病原微生物致病性和机体抵御力;不一样属、种、亚种、型病原微生物,甚至不一样株病原微生物,其致病性各异; 还取决于所感染病原微生物剂量,当大量病原微生物侵袭人体时,潜伏期通常较短,而病情则较为严重;不一样个体被传染后,可产生多种不一样结局。6)传输路径:传输方法包含呼吸道传输、经过水和食物等
3、消化道传输、接触传输、血液传输、母婴垂直传输、媒介传输等;传输结果包含一个病原可有多个传输路径和多个病原能够引发相同症状。7)试验动物研究、试验室感染。8)有效预防和诊疗方法:有效药品、有效疫苗、疾病监测手段、有效预防控制方法手段。3.2病原微生物试验活动评定1)试验活动:是指试验室从事和人病原微生物菌(毒)种、样本相关研究、教学培训、检测等活动。2)试验活动类型包含:标本或样品处理、离心、匀浆、超声、移液操作、锐器使用、生物安全柜使用、医疗废物消毒或高压灭菌处理等。3)试验活动风险影响原因:3a.气溶胶产生:离心、旋转、匀浆、接种环等。b.潜在伤害:注射器等锐器、酒精灯、玻璃器皿等。c.标本
4、浓缩:来自临床、现场、培养、浓缩等。d.毒株和细胞:野毒、减毒、疫苗株、毒素产生等。e.操作指导书。4) 病原微生物动物试验风险原因a.标准试验室废弃物处理程序。b.化学消毒剂选择、配置和使用。c.物理消毒设备使用和维护。d.多种试验材料、器具,尤其是锐器处理。e.动物试验动物及其排泄物处理。5) 废弃物处理风险影响原因:a.标准试验室废弃物处理程序。b.化学消毒剂选择、配置和使用。c.物理消毒设备使用和维护。d.多种试验材料、器具,尤其是锐器处理。e.动物试验动物及其排泄物处理。3.3试验活感人员要求评定1)健康情况和健康历史、耐药和过敏。2)人员资质和心里素质。3)生物安全知识。4)微生物
5、学专业知识。5)操作设施设备技能。6)免疫情况。7)培训情况。8)应急事件处理能力。3.4设施、环境和设备原因要求评定1)生物安全试验室对应等级设施。2)试验室生物安全设备。3)试验室检测相关设备。4)应急设施。5)设施设备管理、维护、校准和检验。3.5风险评定结论(降低风险方法):1)病原微生物风险分类2)试验活动和对应设施设备要求3)个人防护装备要求4)人员生物安全和专业技术资质要求5)人员健康和素质要求6)预防和诊疗方法要求7)菌(毒)种和试验活动等风险管理要求8)应急预案和方法要求4、生物安全委员会负责审核病原微生物风险评定汇报适宜性和科学性,并做出评定结论。生物因子生物危害评定汇报模
6、板*菌危害评定汇报一、危害程度分类(一)分类等级(二)不一样试验操作生物安全试验室等级要求二、背景资料(一)通常生物学特征1形态染色2培养特征(二)在外界环境稳定性1在自然环境中稳定性和对温度敏感性2对日光和紫外线敏感性3对化学因子敏感性(三)致病性和感染数量 (四)传输路径及暴露后果1传输路径2暴露后后果(五)*菌宿主范围(六)*菌预防、诊疗和诊疗1预防2诊疗3诊疗三、试验室试验活动及其危险性和预防方法(一)试验室试验活动背景资料1试验活动内容2试验包含*菌菌毒种背景资料3试验室*菌感染动物和培养物最高存量(二)可能造成不良后果原因和预防方法1试验样品接收和开启拟采取防护方法:2试验样品涂片
7、拟采取防护方法:3*菌接种培养拟采取防护方法:4*菌培养物和动物器官细菌再分离样品制备拟采取防护方法:5试验样品研磨6*菌攻击拟采取防护方法:7感染动物喂养8感染动物解剖9动物血清标本和未经灭活组织标本采集10病理观察用组织标本采集11试验仪器设备12试验动物病原微生物潜伏感染13培养物和试验废弃物销毁14室内空气、试验用具和操作台面污染15菌种和培养物保藏(三)试验室试验活动危害评定四、工作人员素质五、评定结论附表*菌试验室试验活动风险评定*试验室工作人员个人素质评价表金黄色葡萄球菌生物危害评定汇报一、金黄色葡萄球菌传输和致病 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在,在空气、水、灰尘及人和动物排泄
8、物中全部可找到。所以,食品受其污染机会很多。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引发食物中毒占整个细菌性食物中毒33%,加拿大则更多,占45%,中国每十二个月发生这类中毒事件也很多。 金黄色葡萄球菌流行病学通常有以下特点:季节分布,多见于春夏季;中毒食品种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。另外,剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引发中毒事件也有报道;上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%,所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。 通常说,金黄色葡萄球菌可经过以下路径污染食品:食品加工人员、炊事员或销售人员带菌,造成食品污染;食品在加工前本身带菌,或在加工过程中受到了污染,产生了肠
9、毒素,引发食物中毒;熟食制品包装不严,运输过程受到污染;奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时,对肉体其它部位污染。 而肠毒素形成条件包含:存放温度,在37内,温度越高,产毒时间越短;存放地点,通风不良氧分压低易形成肠毒素;食物种类,含蛋白质丰富,水分多,同时含一定量淀粉食物,肠毒素易生成。 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见病原菌,可引发局部化脓感染,也可引发肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。 葡萄球菌性菌血症可发生于任何和血管内导管或其它异物相关不足葡萄球菌脓肿或感染,它是严重烧伤病人死亡常见原因。连续性发烧常见,而且可伴有休克。 葡萄球菌性心内膜炎尤其好发于静脉注射
10、给药者和装有些人工心脏瓣膜病人。忽然出现心脏杂音,脓毒性栓子和其它经典体征便可作出可疑诊疗,确诊需依据超声心动图和血培养。 葡萄球菌性骨髓炎关键见于儿童,可引发寒战,发烧和受累骨疼痛,继之出现红肿。关节周围感染常引发关节积液,提醒为化脓性关节炎而不是骨髓炎。白细胞计数常15000/l而且血培养常阳性。X线改变在1014日内不显著,骨质疏松和骨皮质反应甚至更长时间仍不能测出,而放射性核素骨扫描则常能较早出现异常。 现在葡萄球菌性小肠结肠炎很罕见,但若住院病人出现发烧,肠梗阻,腹痛和腹胀,低血压或腹泻,尤其是新近作过腹部手术或接收过抗生素者,可提醒本病。若粪便镜检发觉大片嗜中性白细胞和革兰氏阳性球
11、菌,则可能作出诊疗,但必需排除产毒性艰苦梭状芽胞杆菌感染,这是抗生素相关性结肠炎最常见原因。 金黄色葡萄球菌致病力强弱关键取决于其产生毒素和侵袭性酶:a.溶血毒素:外毒素,分、四种,能损伤血小板,破坏溶酶体,引发肌体局部缺血和坏死;b.杀白细胞素:可破坏人白细胞和巨噬细胞;c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液或血浆中纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞吞噬作用。葡萄球菌形成感染易局部化和此酶相关;d.脱氧核糖核酸酶:金黄色葡萄球菌产生脱氧核糖核酸酶能耐受高温,可用来作为依据判定金黄色葡萄球菌;e.肠毒素:金黄色葡萄球菌能产生数种引发急性胃肠炎蛋白质性肠毒素,分为A、B、
12、C、D、E及F五种血清型。肠毒素可耐受100C煮沸30分钟而不被破坏。它引发食物中毒症状是呕吐和腹泻。另外,金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。二、金黄色葡萄球菌生物学特征经典金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8m左右,显微镜下呈单个、成双和排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌属于葡萄球菌属,无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性衰老、死亡和被白细胞吞噬后菌体革兰染色呈阴性。金黄色葡萄球菌营养要求不高,在一般培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度3537、最适生长pH7.47.6。 金黄色葡萄球菌有高度耐盐性,可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖
13、、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。很多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶。金黄色葡萄球菌含有较强抵御力,对磺胺类药品敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。三、金黄色葡萄球菌检测和诊疗1.标本采集 采自不一样感染部位多种标本,包含血液、脑脊液、穿刺液;痰液、脓液、创伤分泌物、尿液、粪便和呕吐物等。2.直接涂片镜检 直接涂片检验在正常情况下呈无菌状态体液标本如血液、脑脊液、穿刺液等,若有检出革兰氏阳性,显微镜下呈葡萄状排列、无芽胞、荚膜,直径0.5-1m球菌。即含相关键临床价值。3.分离培养 能够选择一般营养琼脂平板、血平板和高盐甘露醇平板,血平板用葡萄糖肉
14、汤增菌培养基。该菌在一般肉汤中呈均匀快速混浊生长;若接种于琼脂平板上35过夜后可形成直径约23mm厚菌落、湿润有光泽、呈金黄色不透明圆形凸起。若接种于血平板,菌落周围可形成显著透明溶血环。在高甘露醇平板上金黄色葡萄球菌生成淡橙黄色菌落,以此可和其它凝固酶阴性葡萄球菌相判别。4.判别试验(1)血浆凝固酶试验:血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生,和其致病力相关一个侵袭性酶,其作用是使血浆中纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞吞噬。血浆凝固酶分为结合型和游离型。前者结合在细菌细胞壁上,能直接作用于血浆中纤维蛋白原,使之转化为纤维蛋白,围绕菌体而形成凝块。而游离型血浆凝固酶则在产生后被分泌到菌体外
15、,不能直接作用于纤维蛋白原,但能够激活血浆凝血酶原,使之转化成凝血酶,后者再作用于纤维蛋白原使其转化为纤维蛋白。具体测量方法也所以分为玻片法和试管法两种。玻片法:将待试菌落乳化于玻片上盐水中,经1020S证实无自凝后,用接种环取人或兔血浆一环,和乳化菌液混合,出现凝集者为阳性,另设生理盐水为阴性对照。试管法:吸收0.5mL兔血浆和0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤二十四小时培养物充足混匀,置37培养,每隔半小时观察一次,连续观察6小时,出现凝固,立即小试管倾斜或倒置时,内容物不流动,判为阳性。(2)耐热核酸酶试验:将二十四小时肉汤培养物沸水浴处理15min,用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平
16、板,35培养二十四小时,在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。(3)甘露醇发酵试验 金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇。(4)Staphaurex 胶乳凝集试验 是判定金黄色葡萄球菌一个快速、简便商品化直接凝集试验。其基础原理是在纸片上滴加包被有纤维蛋白原和IgG抗体聚苯乙烯胶乳,然后用接种环挑取待判定菌株新鲜培养物加入混匀,若出现凝集块现象即为阳性。5.生化判定 如上述,注意和其它凝固酶阳性葡萄球菌判别关键点:PYR(吡咯烷酮-萘基酰胺试验阴性;VP试验阳性;鸟氨酸脱羧酶试验阴性。6.免疫学方法 用酶联免疫吸附试验和对流免疫电泳方法可检测金葡菌磷壁酸抗体。7.分子生物学方法 包
17、含PFGE脉冲场凝胶电泳和酶切图谱分析等。四、金黄色葡萄球菌防治及生物安全防护一、细菌防治金黄色葡萄球菌控制关键包含:1)预防金黄色葡萄球菌污染食品,预防带菌人群对多种食物污染:定时对生产加工人员进行健康检验,患局部化脓性感染(如疥疮、手指化脓等)、上呼吸道感染(如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等)人员要临时停止其工作或调换岗位。预防金黄色葡萄球菌对奶及其制品污染:如牛奶厂要定时检验奶牛乳房,不能挤用患化脓性乳腺炎牛奶;奶挤出后,要快速冷至-10以下,以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料,注意低温保留。对肉制品加工厂,患局部化脓感染禽、畜尸体应除去病变部位,经高温或其它合适方法处理后
18、进行加工生产。2)预防金黄色葡萄球菌肠毒素生成 应在低温和通风良好条件下贮藏食物,以防肠毒素形成;在气温高春夏季,食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超出6小时,而且食用前要根本加热。3)无菌方法(如检验病人前后根本洗手和消毒适用器械)至关关键。已被感染病人应和其它易感病人隔离,患有活动性葡萄球菌感染,即使是局部性感染(如疖)医护人员,在其感染治愈前不得接触病人或器械。无症状鼻腔带菌者,除非所带菌株十分危险或被怀疑为暴发流行传染源,通常无须隔离。诊疗包含脓肿引流,抗生素(重症病人需肠外给药)和全身支持疗法。培养标本应在开始诊疗前或更换抗生素之前获取。抗生素选择和剂量取决于感染部位,疾病严重程度和细菌
19、对药品敏感性。医院取得葡萄球菌和大多数小区取得菌株,通常对青霉素G,氨苄青霉素和抗假单胞菌青霉素有耐药性。大多数菌株对耐青霉素酶青霉素(甲氧苯青霉素,苯甲异噁唑青霉素,乙氧萘青霉素,邻氯青霉素,双氯青霉素),头孢菌素(头孢菌素,头孢唑啉,头孢菌素,头孢拉定,头孢羟唑,头孢西丁和第三代头孢菌素),卡巴培南类(亚胺培南,美罗匹宁),庆大霉素,万古霉素,替考拉宁,林可霉素和氯林可霉素,是敏感。即使头孢菌素和万古霉素全部有效,但通常首选一个耐青霉素酶青霉素。很多葡萄球菌菌株对红霉素,四环素类药品,氨基糖苷类,杆菌肽和氯霉素也敏感,但因有愈加好更安全药可用,故极少使用氯霉素和杆菌肽。现在耐甲氧苯青霉素金
20、黄色葡萄球菌(MRSA)菌株日益增多,这种细菌虽可从小区取得感染病人中分离得到,但多数是从感染静脉吸毒者和重症监护室病人中分离取得。MRSA菌株通常对耐-内酰胺酶青霉素,头孢菌素和卡巴培南类有耐药性。这些细菌对氨基糖苷类和大环内酯类(红霉素,克拉霉素,阿齐霉素,林可霉素和氯林可霉素)耐药性也很普遍。即使亚胺培南-西拉司丁或喹诺酮类对一些MRSA感染是有效,但静脉注射万古霉素为首选。肾功效正常成人通用剂量是每6小时静脉注射500mg 或每12小时静滴注1000mg,最少在1小时内滴完。肾功效受损时,剂量应依据血清中药品浓度加以调整,疗程视感染部位及病人反应而定,但通常为 24周。一些严重或有并发
21、症感染,可能需要静脉给药诊疗68周,然后再口服诊疗1个月或更长时间。可用于替换万古霉素诊疗MRSA感染药品有:TMP-SMZ,成人剂量为TMP1015mg /(kg.d)加SMZ5075mg/(kg.d),分剂口服或肠外给药,每次间隔8小时或12小时,连续24周;利福平(600mg/d)口服或肠外给药;肠外给亚胺培南-西拉司丁(500mg每6小时1次)或美罗匹宁(0.51.0g每8小时1次。但利福平不要单独应用,因为细菌很易产生抗药性。在诊疗异物相关性MRSA感染或浆膜腔MRSA感染时,利福平和氨基糖苷类是有用辅助药品。邻氯青霉素,双氯青霉素,TMP-SMZ,环丙沙星及局部用莫匹罗星(mupi
22、rocin)可用于诊疗MRSA带菌状态,但MRSA对这些药品可产生抗药性。抗万古霉素肠球菌(VRE)菌株流行日益增加, 这种菌株在试验室中可将引发抗万古霉素基因转为凝固酶阳性金黄色葡萄球菌菌株,而在感染病人中则转变为凝固酶阴性葡萄球菌分离株。可是这些葡萄球菌很轻易对诊疗这类感染其它药品产生抗药性。杆菌肽,若有话,可试用于诊疗抗万古霉素葡萄球菌感染。对这些病人应严格隔离,以防她们细菌传输。二、细菌生物安全防护依据病原微生物生物试验室生物安全管理条例中相关要求,人间传输微生物名目(待颁布)金黄色葡萄球菌属于三类,BSL-2。相关防护事宜包含:(1)操作要求1、试验时,未经试验室主任同意,限制或严禁
23、进入试验室。2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。3、全部操作过程应尽可能细心,避免产生和溅出气溶胶。4、对于污染锐器,必需时刻保持高度警惕,包含针、注射器、玻片、加样器等。5、注射和吸收感染材料时,只能使用针头固定注射器或一次性注射器(即注射器和针头是一体)。用过一次性针头必需弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉,或在丢弃前进行人工处理,要不将之小心放入不会被刺穿、用于搜集废弃锐器容器中。非一次性锐器必需放置在坚壁容器中,转移至处理区消毒,最好高压杀菌。6、打坏器皿不能直接用手处理,必需用其它工具处理,如刷子和簸箕、夹子
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