高效液相色谱法同时测定复合...及二种二苯甲酮化合物的含量_张涛.pdf

202023 年第 1 期（总第 165 期）高效液相色谱法同时测定复合膜袋中苯代三聚氰胺及二种二苯甲酮化合物的含量张涛，曾莉*，林黛琴，聂绍丽（江西省检验检测认证总院工业产品检验检测院，江西南昌，330052）摘 要：本文建立了高效液相色谱法同时测定复合膜袋中苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮和 2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮残留量的方法。试样剪成小于 2mm 的碎片，经甲醇超声提取，氮气浓缩至干，再用 2mL流动相超声溶解，经 0.45m 滤膜过滤后，采用液相色谱（配 PDA 检测器）进行检测，外标法定量。研究表明：在 0.0510.0mg/L 的范围内，各标准物质线性关系良好，相关系数（r）均大于 0.9995，方法检出限低，回收率在 88.60%112.32%，相对标准偏差（RSD）在 0.09%3.05%之间，方法精密度较好。该方法简便快捷，结果准确可靠，时效性高。关键词：复合膜袋；苯代三聚氰胺；2,4-二羟基二苯甲酮；2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮；残留量中图分类号：O657 文献标志码：A 文章编号：1008-3103（2023）01-0020-04Simultaneous Determination of Benzonquanmine and Two Benzophenone Compounds in Composite Membrane Bags by High-performance Liquid ChromatographyZhangTao,ZengLi*,LinDai-qin,NieShao-li（JiangxiGeneralInstituteofTestingandCertificationInstituteofInspectionandTestingforIndustrialProducts,NanchangJiangxi330052,China）Abstract：AHigh-performanceliquidchromatographymethodwasdevelopedforthesimultaneousdeterminationoftheresiduesofbenzonquanmine,2,4-dihydroxybenzophenoneand2-hydroxy-4-methoxybenzophenoneincompositemembranebags.Thesamplewascutintofragmentssmallerthan2mm,extractedbyultrasonicwithmethanol,concentratedtodrywithnitrogen,thendissolvedbyultrasonicwith2mLmobilephase,filteredby0.45mfiltermembrane,detectedbyliquidchromatography（withPDAdetector）andquantifiedbyexternalstandardmethod.Theresultsshowedthatintheconcentrationrangeof0.0510.0mg/L,thelinearrelationshipofthestandardsubstancesweregood,andthecorrelationcoefficient（R）weregreaterthan0.9995.Thedetectionlimitofthemethodwerelow,andtherecoveriesrangedfrom88.60%to112.32%withtherelativestandarddeviation（RSD）of0.09%3.05%,andtheprecisionofthemethodweregood.Themethodissimple,rapid,accurateandreliablewithhightimeliness.Keywords：compositemembranebags;benzonquanmine;2,4-dihydroxybenzophenone;2-hydroxy-4-methoxybenzophenone;residue基金项目：江西省市场监督管理局科技计划项目（GSJK202013）资助。作者简介：张涛（1982），男，本科，工程师，研究方向为食品接触材料及制品。通讯作者：曾莉（1989），女，硕士，工程师，研究方向为食品接触材料及制品。0 引言苯代三聚氰胺，化学品名：2,4-二氨基-6-苯基-1,3,5-三嗪，白色粉末，溶于乙醇、乙醚、稀盐酸，部分溶于二甲基甲酰胺，不溶于丙酮、氯仿、乙酸乙酯，极微溶于水，主要用于制取热固性树脂、改性树脂、氨基涂料和塑料、医药、农药和染料等，其与甲醛DOI:10.14127/ki.jiangxihuagong.2023.01.010212023 年 2 月高效液相色谱法同时测定复合膜袋中苯代三聚氰胺及二种二苯甲酮化合物的含量的反应产物苯代三聚氰胺甲醛树脂被广泛用于食品包装材料的内层涂料或胶黏剂，苯代三聚氰胺对人体的肾脏有潜在危害1。目前，基于紫外光固化油墨（UV油墨）的 UV印刷技术被引入到包装印刷中，二苯甲酮类化合物作为 UV油墨的重要成分，被广泛应用于食品包装材料的 UV 印刷2。二苯甲酮类化合物对人体及动物具有麻醉和刺激作用，会引起内分泌功能障碍甚至致癌3。国家强制性标准食品安全国家标准食品接触材料及制品用添加剂使用标准（GB9685-2016）4对食品接触材料中苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮均给出了特定限量要求。目前苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的检测方法主要有分光光度法5、高效液相法6-13和液质联用法1，3，14，15等。关于同时测定苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮检测方法的文献报道较少。本文研究了采用溶剂超声提取，以及高效液相色谱法同时测定复合膜袋中苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮和 2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮残留量的方法。1 实验部分1.1 仪器与试剂SHIMADZULC-2040C3DPlus高效液相色谱仪（株式会社岛津制作所），配二极管阵列检测器（PDA）；ME204E 分析天平 梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；KQ-500DA 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；N-EVAP24 氮吹仪（美国 Organomation）；PQDIUVM1 制水器 威立雅水处理技术（上海）有限公司。苯代三聚氰胺标准品（CATO 佳途科技）；2,4-二羟基二苯甲酮（坛墨质检）；2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮（CATO 佳途科技）；甲醇（色谱纯，德国默克公司）；乙腈（色谱纯，德国默克公司）。1.2 仪器条件色谱柱：AgilentZORBAXSB-CN柱，5m，4.6mm250mm；流动相：乙腈-水（6040，体积比）；流速：1.0mL/min；柱温：35；进样量：20L；检测波长：苯代三聚氰胺检测波长为 245nm，2,4-二羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮检测波长为 289nm。1.3 试验方法1.3.1标准溶液制备标准储备溶液：分别准确称量苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮标准品 0.01g（精确到 0.1mg），用乙腈溶解后转移至 10mL 棕色容量瓶中，并用乙腈定容至刻度，混匀，各标准储备溶液浓度：1000mg/L。混合标准中间液（50mg/L）：分别准确吸取 0.5mL苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮标准储备溶液于 10mL 棕色容量瓶中，并用乙腈定容至刻度，混匀。标准工作溶液：分别准确吸取混合标准中间液0.025mL、0.25mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL 于 25mL 棕色容量瓶中，用流动相定容至刻度，混匀。此时标准工作溶液浓度分别为 0.05mg/L、0.5mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L、10.0mg/L。1.3.2 样品前处理将样品剪成小于 2mm 的碎片，准确称量 1g（精确到 0.1mg）试样于 10mL 比色管中，加入 5mL 甲醇，超声提取 30min，提取液转移至 25mL 比色管中，残渣每次使用 5mL 甲醇进行淋洗 2 次，淋洗液与提取液合并于 25mL 比色管中，氮气浓缩至干，准确加入 2mL 流动相，超声溶解，经 0.45m 滤膜过滤后，按 1.2 试验条件进行分析。2 结果与讨论2.1 检测波长的选择在波长 220350nm 范围内对苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮混合标准溶液进行 PDA 光谱扫描，光谱图见图 1图 3。由图可知，苯代三聚氰胺在波长为 245nm 处有较强的吸收，2,4-二羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮均在波长为 289nm 处有较强的吸收。因此选择苯代三聚氰胺的检测波长为 245nm，2,4-二羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的检测波长为 289nm。图 1 苯代三聚氰胺标准品的 PDA 光谱图350300250200150100500300245.30mAUnm222023 年第 1 期（总第 165 期）图 4 苯代三聚氰胺标准品的液相色谱图图 5 2,4-二羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮标准品的液相色谱图图 2 2,4-二羟基二苯甲酮标准品的 PDA 光谱图图 3 2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮标准品的 PDA 光谱图15010050300280.12242.42318.37mAUnm2.3 标准曲线与检出限将配制好的标准工作溶液（1.3.1）按优化后的试验条件（1.2）进行分析，以各标准品浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标绘制标准曲线。在 0.0510.0mg/L 范围内，各标准物质线性关系良好，相关系数（r）均大于0.9995。以 0.05mg/L 浓度为基础，以信噪比 S/N=3 和信噪比 S/N=10 对应的浓度作为各目标物的检出限和定量限。具体结果见表 1。130120110100908070605040300287.85241.40321.64mAUnm2.2 液相色谱条件的确定研究考察了甲醇、乙腈分别与水不同配比，不同流速及不同柱温对目标物的分离效果及保留时间的影响。最终发现当流动相为乙腈-水（60 40，体积比）；流速为 1.0mL/min；柱温为 35时，3 种目标物分离效果最佳且出峰时间较短，标准品色谱图见图 4 和图 5。苯代三聚氰胺的保留时间为 2.934min；2,4-二羟基二苯甲酮的保留时间为 4.088min；2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的的保留时间为 5.370min。极大地缩短了样品检测时间。mAUmin苯代三聚氰胺PDAMulti1245nm，4nm3002001000012345678mAUmin2,4-二羟基二苯甲酮2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮PDAMulti2289nm，4nm150100500012345678232023 年 2 月高效液相色谱法同时测定复合膜袋中苯代三聚氰胺及二种二苯甲酮化合物的含量2.4 加标回收试验和精密度各称取 1g 样品，分别加入 2mL1.0mg/L、5.0mg/L、8.0mg/L 的混合标准溶液进行加标回收试验，每个浓度水平做 6 个平行试样，计算各目标物的加标回收率和相对标准偏差（RSD），具体结果见表 2。由表 2 可知，平均 回 收 率 在 88.60%112.32%，RSD 在 0.09%3.05%，方法精密度较好，可以满足分析要求。表 2 回收率和相对标准偏差化合物加标浓度（mg/L）平均回收率（%）RSD（%）苯代三聚氰胺1.05.08.0101.55100.66112.320.090.711.302,4-二羟基二苯甲酮1.05.08.0101.34100.95112.230.200.411.162-羟基-4-甲氧基二苯甲酮1.05.08.091.4088.6097.290.200.543.052.5 样品检测按照试验方法对 20 批次复合膜袋样品进行目标化合物的分析，结果表明，20 批次复合膜袋样品中均未检出苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮和 2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮。3 结论本研究建立了高效液相色谱法同时测定复合膜袋中苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮和 2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮残留量的检测方法。本方法在 0.0510.0mg/L 范围内，各标准物质线性关系良好，相关系数（r）均大于 0.9995，方法检出限低，回收 率 在 88.60%112.32%，相 对 标 准 偏 差（RSD）在0.09%3.05%，方法精密度较好，可以满足分析要求。本方法简便快捷，结果准确可靠，时效性高，弥补了目前暂无同时测定复合膜袋中苯代三聚氰胺、2,4-二羟基二苯甲酮和2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮残留量的空缺，为监管部门、生产企业及标准的制定提供了可靠的技术支持。参 考 文 献1 郝成婷，王红松，徐炎，等.液相色谱-串联质谱法测定液态乳制品中的苯代三聚氰胺 J.分析测试学报，2014，33（02）：227-230.2 刘珊珊，柯玮，范子彦，等.食品接触材料中光引发剂残留及其迁移规律研究进展 J.中国食品卫生杂志，2014，26（05）：507-514.3 冯徐根，席永忠，杨素彬，等.液质联用法快速测定纺织品中 11 种二苯甲酮类物质 J.纺织科技进展，2022，（07）：34-40.4 GB9685-2016食品安全国家标准食品接触材料及制品用添加剂使用标准 S.5 夏新泉，陈灵，殷林园.分光光度法测定 2,4-二羟基二苯甲酮的含量 J.湖北师范学院学报（自然科学版），2008，（02）：82-84.6 SN/T4267-2015 食品接触材料高分子材料食品模拟物中 2,4-二氨基-6-苯基-1,3,5-三嗪的测定高效液相色谱法 S.7 SN/T4268-2015 食品接触材料高分子材料食品模拟物中 2,4-二羟基二苯甲酮的测定高效液相色谱法 S.8 SN/T4269-2015 食品接触材料高分子材料食品模拟物中 2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的测定高效液相色谱法S.9 周志荣，郝成婷，王红松，等.高效液相色谱法测定食品接触材料水性模拟液中苯代三聚氰胺 J.中国卫生检验杂志，2013，23（06）：1399-1401.10 王一超，孙艺，崔蓉，等.高效液相色谱法测定小鼠脑组织中 2,4-二羟基二苯甲酮 J.北京大学学报（医学版），2015，47（03）：541-547.11 保琦蓓，傅科杰，胡峰，等.高效液相色谱法同时测定纺织品中 11 种二苯甲酮类紫外吸收剂 J.理化检验-化学分册，2020，56（05）：511-518.12 郝成婷，周志荣，徐炎，等.高效液相色谱法同时测定食品接触材料水性模拟物中三聚氰胺和苯代三聚氰胺J.食品工业科技，2014，35（08）：54-57.13 郝成婷，王红松，王文辉，等.高压液相色谱法测定食品接触材料水性模拟液中 2,4-二羟基二苯甲酮 J.食品安全质量检测学报，2013，4（04）：1020-1024.14 鲁素雅，邢海艳，刘洋，等.高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中 9 种二苯甲酮类紫外吸收剂的含量 J.理化检验-化学分册，2021，57（12）：1104-1109.15 沈康俊，赵洁，吴之中，等.高效液相色谱-串联质谱法检测食品接触材料及制品中 8 种二苯甲酮类物质的迁移量 J.分析试验室，2022，41（03）：322-329.表 1 线性方程、相关系数、线性范围、检出限及定出限化合物线性方程相关系数线性范围（mg/L）检出限（mg/L）定量限（mg/L）苯代三聚氰胺Y=120922X+518.9330.999950.05-100.0130.0452,4-二羟基二苯甲酮Y=72905.6X-15.9360.999940.05-100.0180.0592-羟基-4-甲氧基二苯甲酮Y=66336.0X-148.4840.999720.05-100.0250.084