猪瘟(CSF).ppt
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1、猪瘟(猪瘟(CSF)病原学病原学猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus),属黄病毒科、瘟疫病毒属,有囊膜的RNA病毒,正股单链RNA病毒RNA全长12300个碱基,由11个基因组成,编码4种结构蛋白和7种非结构蛋白E2基因编码的外膜蛋白gp55是主要的免疫蛋白,可诱导机体产生有效的免疫保护CSFV只有一个血清型,毒力变化很大强毒株可以引发急性疫病和高死亡率,中等毒力毒株一般引起亚急性或慢性传染,慢毒株可以引起猪胎儿和新出生的仔猪死亡CSFV的毒力特性不稳定,经过猪一代或多代传代后观察到毒力增强培养猪瘟病毒最常用的是猪肾细胞,病毒在胞浆中复制,不引起细胞病变病毒可能在细
2、胞胞浆内成熟,这与在感染细胞的表面检测不到病毒抗原相一致病毒灭活取决于含有病毒的基质,6010分钟,细胞培养液失去感染性;血液中病毒6830分钟,不能使其灭活该病毒在pH5-10条件下相当稳定,高于或低于该pH时,病毒的感染性很快被破坏脂溶剂如乙醚、氯仿很快灭活病毒,病毒对于2%氢氧化钠、氯制剂和复合醛等药物敏感流行病学流行病学猪是CSFV惟一的自然宿主和重要的传染源,患病猪和可疑猪的直接接触是主要的传播方式CSFV可通过口、鼻、泪腺分泌物、尿液和粪便排泄出来怀孕母猪接触慢性CSFV毒株时,病毒可以传播给子宫中的胎儿 这种先天性感染造成死胎和弱胎出生,弱胎在出生后很快死亡如果先天感染的仔猪健康
3、出生,并存活数月,这些猪无疑是病毒的扩散源新购进的表面健康的感染猪进入一个猪群,是最常见的CSFV暴发的原因临床症状临床症状病猪最初出现困倦,尾巴下垂,食欲下降,后期病猪明显厌食。感染CSFV 6天内,体温可高达42以上,病猪挤堆明显病程早期,眼睛出现明显的分泌物,伴有结膜炎,可能一直发展到两眼睑完全粘合发热初期便秘,接着转变为水样的黄绿色下痢,常见病猪呕吐出带有很多胆汁的黄色液体病猪出现后肢麻痹,病程的最后阶段,腹部、耳、鼻和四肢内侧可呈现紫色公猪包皮发炎,有尿潴留患急性CSF猪,大多数在10-20天内死亡患亚急性CSF猪,大多在30天内死亡患慢性CSF猪,生长严重受阻,形成矮小猪,皮肤出现
4、病变,常见弓背站立,可存活100天以上先天性CSFV感染可造成流产,木乃伊胎儿、畸形胎儿、死胎和有震颤症状的弱仔猪出生,或者产出外观正常的被感染的仔猪在子宫中感染的仔猪,皮肤常见出血,死亡率高先天性感染CSFV猪,在相当长时期内呈无病状态,数月后才表现出轻度的厌食,沉郁,结膜炎,下痢,局部运动失调,体温正常,患猪可存活6个月以上,最终导致死亡耳、颈、胸腹部及后肢皮肤呈暗紫色耳、颈、胸腹部及后肢皮肤呈暗紫色肢端皮肤斑点状出血,公猪包皮皮肤出血肢端皮肤斑点状出血,公猪包皮皮肤出血患猪后肢皮肤出血斑点患猪后肢皮肤出血斑点患猪腹部皮肤出血斑点患猪腹部皮肤出血斑点患猪全身皮肤出血斑点患猪全身皮肤出血斑点
5、后期病猪腹泻,腹部等处皮肤发绀后期病猪腹泻,腹部等处皮肤发绀猪群体表污脏,精神沉郁,共济失调,后肢麻痹猪群体表污脏,精神沉郁,共济失调,后肢麻痹齿龈和唇粘膜溃疡齿龈和唇粘膜溃疡患猪眼发红,分泌物增多患猪眼发红,分泌物增多发病机理发病机理自然发病的条件下,CSFV侵入机体的途径为口、鼻,偶尔通过结膜、生殖道粘膜或皮肤擦伤侵入猪体经口腔感染后,扁桃体是病毒复制的最初部位病毒最初感染扁桃体腺窝的上皮细胞,随后通过淋巴管扩散到周围的淋巴网状组织病毒在局部淋巴组织复制后达到外周血液,出现病毒血症,强毒株一般5-6天扩散到猪的全身急性CSF中出现的多发性出血,是由于血管内皮细胞变性、严重的血小板减少以及纤
6、维蛋白质合成障碍急性CSF引起猪只死亡的最主要的原因可能是严重的循环障碍慢性CSF,病毒扩散的慢,在血清和器官中的滴度低临床改善期,病毒在血清中的滴度低或缺乏,常常局限于扁桃体、唾液腺、空肠和肾上皮细胞内在血液循环中同时存在病毒抗原和抗体,导致抗原-抗体复合物在肾脏沉积,引起肾小球肾炎病理变化病理变化急性到亚急性病例中,病理变化为败血性疫病特征,表现为多发性出血另外还有消化道、呼吸道和泌尿生殖道的卡他性、纤维素性和出血性炎症反应淋巴结和肾脏最常观察到病变。淋巴结肿胀和出血,呈现大理石样外观,淋巴细胞排空和网状细胞增生(颌下、腹股沟和肠系膜淋巴结)肾脏肿大,点状到斑状出血,常发生在皮质表面,呈雀
7、斑肾,髓质水肿卡他性到纤维素性支气管肺炎和胸膜炎口腔粘膜、心脏、肺脏、胃、肠、膀胱有出血点或出血斑,甚至形成溃疡脾脏梗死被认为是CSF最具诊断性的病变,梗死是由血管栓子栓塞阻塞血流所致,血管栓子是由变性的血管内皮细胞与红细胞形成“血泥”状物梗死呈黑色,脾脏边缘形成梗死灶脑炎病变,血管周围套形成,内皮细胞增生、小胶质细胞增生结节和局灶坏死胆囊、扁桃体出血、坏死,喉头、会厌软骨出血、坏死持续性CSF最主要的病变为胸腺萎缩和外周淋巴器官中淋巴细胞排空以及滤泡明显持续性CSFV感染造成肾上腺皮质增生,其特征为带状区增宽,球状区和网状区萎缩常见回肠和结肠坏死,形成溃疡,成纽扣状淋巴结出血淋巴结出血患猪颌
8、下淋巴结肿大、出血患猪颌下淋巴结肿大、出血患猪腹股沟淋巴结肿大、出血患猪腹股沟淋巴结肿大、出血患猪肠系膜淋巴结肿大、出血患猪肠系膜淋巴结肿大、出血患猪肾脏肿大、点状出血患猪肾脏肿大、点状出血患猪肾脏皮质出血、髓质水肿患猪肾脏皮质出血、髓质水肿左:肾脏小点出血左:肾脏小点出血 右:肾皮质区域小点出血,肾盂粘膜出血斑块右:肾皮质区域小点出血,肾盂粘膜出血斑块患猪扁桃体出血患猪扁桃体出血患猪喉头点状出血患猪喉头点状出血患猪喉头坏死患猪喉头坏死患猪肺脏点状出血患猪肺脏点状出血患猪胃粘膜斑点状出血患猪胃粘膜斑点状出血左:肺散在出血斑点左:肺散在出血斑点 右:胃粘膜有出血斑点右:胃粘膜有出血斑点混合型猪瘟
9、,肺大理石样变化混合型猪瘟,肺大理石样变化左:心外膜出血左:心外膜出血 右:心内膜出血右:心内膜出血患猪肠浆膜点状出血、胶样渗出患猪肠浆膜点状出血、胶样渗出结肠粘膜上的单个结肠粘膜上的单个“纽扣状肿纽扣状肿”盲、结肠粘膜上单个及融合溃疡盲、结肠粘膜上单个及融合溃疡肠道粘膜出血肠道粘膜出血盲结肠扣状肿盲结肠扣状肿患猪膀胱粘膜点状出血患猪膀胱粘膜点状出血患猪脑水肿、脑脊液增多患猪脑水肿、脑脊液增多脾出血性梗死,脾脏边缘呈紫黑色,边界清楚的隆起斑块脾出血性梗死,脾脏边缘呈紫黑色,边界清楚的隆起斑块诊断诊断尸体剖检中,诊断性的病理变化为淋巴结、肾脏和其它器官的出血以及脾脏梗死实验室诊断方法包括:血清学
10、诊断、分子生物学诊断(一)血清学诊断方法(一)血清学诊断方法琼脂扩散试验(AGP)荧光抗体试验(FAT)间接血凝试验(IHA):正向和反向中和试验:兔体、荧光病毒抗体、过氧化物酶联中和试验酶联免疫吸附试验(ELISA)免疫胶体金技术(IGSS)琼脂扩散试验琼脂扩散试验可用病猪脾、淋巴结作为抗原进行检测,琼扩试验操作简单,不需特殊仪器,费用低但特异性和敏感性差,现在猪瘟的诊断一般不采用此方法 2.荧光抗体试验荧光抗体试验荧光抗体检测猪瘟是一种灵敏而又特异的方法可用FAT直接检测扁桃体、脾脏、肾脏和回肠远端冰冻切片中的抗原也可将病猪扁桃体和脾混合匀浆后接种无猪瘟病毒污染的猪源细胞(如PK-15),
11、24h-72h后进行飞片FAT试验,检查细胞中是否存在CSFV,这种方法比冰冻组织切片法更为敏感3.间接血凝试验间接血凝试验正向间接血凝试验正向间接血凝试验:利用CSFV致敏红细胞,将待检血清梯度稀释后进行抗原抗体反应,根据红细胞的凝集判断结果。此法能够测出猪瘟抗体效价,操作简单,可用于免疫抗体的监测,但此方法的缺点是不能区分抗体水平是由于疫苗免疫还是野毒感染所引起反向间接血凝试验:反向间接血凝试验:用猪瘟免疫血清提取IgG,致敏绵羊红细胞,用之检测CSFV。此法能够检测组织病料如脾脏、淋巴结、扁桃体中的CSFV抗原。但由于对组织病料处理方法有差异,而且组织中的血细胞易造成干扰,非特异性凝集使
12、得结果判定困难,因而现在己很少应用4.中和试验中和试验兔体中和试验兔体中和试验将猪瘟病毒与待检血清中和后接种兔体,观察体温变化曲线当待检血清稀释度大于1:32时,则表明待检血清能够保护猪群免受CSFV感染当待检血清稀释度小于1:32时,应当对猪群进行免疫接种荧光抗体病毒中和试验荧光抗体病毒中和试验此法是国际贸易指定方法飞片培养PK-15细胞,将待检血清5630 min灭活后做适当稀释,与等体积的200 TCID50/0.1 ml的病毒液混合感作2h,最后接入飞片上吸附1h,然后加入维持液孵育2d以上采用直接免疫荧光方法进行荧光观察,并设立对照组,可发现对照组有翠绿色光斑,而试验组光斑消失其优点
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